超氧化物歧化酶(SOD)通過清除生物體內(nèi)產(chǎn)生的超氧化物而發(fā)揮抗氧化作用,其中,胞外超氧化物歧化酶(Ec-SOD)是重要細(xì)胞外抗氧化蛋白,但存在于牡蠣血漿內(nèi)的Ec-SOD同源蛋白已經(jīng)證實(shí)沒有SOD酶活性。在太平洋牡蠣基因組中鑒定到3個(gè)與美洲牡蠣dominin高度相似的序列片段,并通過RT-PCR克隆驗(yàn)證均為表達(dá)基因,將其中的Cg-dominin 2成熟多肽在大腸桿菌中重組表達(dá)獲得重組蛋白�？寡趸钚詼y定顯示,重組Cg-dominin2的總抗氧化活性相當(dāng)于0.0525 mmol/g Trolox。將太平洋牡蠣以不同濃度的Cd²⁺, Zn²⁺進(jìn)行脅迫刺激,定量PCR檢測顯示Cg-dominin2基因的相對表達(dá)量有顯著上調(diào),血漿蛋白的對應(yīng)金屬含量也有所增加。上述結(jié)果提示太平洋牡蠣胞外超氧化物歧化酶同源蛋白可能通過參與體內(nèi)金屬代謝過程從而在抵御重金屬脅迫中發(fā)揮作用。

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【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 供試材料
    1.2 序列查找與分析
    1.3 序列驗(yàn)證
    1.4 Cg-dominin2重組蛋白的制備和抗氧化活性測定
    1.5 金屬刺激實(shí)驗(yàn)
    1.6 Cg-dominin2基因表達(dá)實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 檢測
    1.7 血漿沉淀蛋白中金屬含量的測定
2 結(jié)果與分析
    2.1 Cg-dominin基因、轉(zhuǎn)錄物和氨基酸序列分析
    2.2 Cg-dominin2基因體外重組表達(dá)和活性測定
    2.3 鋅和鎘脅迫下的Cg-dominin2基因表達(dá)
    2.4 金屬刺激后太平洋牡蠣血漿沉淀蛋白質(zhì)中相應(yīng)金屬含量
3 討論



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