針對海帶(Saccharina japonica)配子體保存過程中嚴(yán)重污染材料的分離純化進(jìn)行研究。(1)液相培養(yǎng)分離純化法:將克隆材料經(jīng)超聲波細(xì)胞粉碎儀打碎后重新附著到90 mm培養(yǎng)皿中,利用微毛細(xì)吸管在顯微鏡下分離出狀態(tài)好且無菌絲附著的細(xì)胞段,繼續(xù)保存。(2)固相培養(yǎng)分離純化法:將克隆材料4 000 r/min離心5～10 min,棄上清,加滅菌PESI培養(yǎng)液重新懸浮藻液,利用5 mL無菌注射器吸取2 mL粉碎后的配子體細(xì)胞,逐點(diǎn)注射入固相平板上,接種后利用Parafilm封口膜密封培養(yǎng)皿,平板培養(yǎng)約60～120 d后觀察,將未長出菌落且藻斑直徑達(dá)2 mm的克隆團(tuán)挑出,然后在PESI液體培養(yǎng)基中復(fù)蘇繼續(xù)保存。

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【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 材料及培養(yǎng)基的制備
    1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        1.2.1 液相培養(yǎng)分離純化
        1.2.2 固相培養(yǎng)分離純化
2 結(jié)果
    2.1 液相培養(yǎng)分離純化
    2.2 固相培養(yǎng)分離純化
3 討論



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