甲殼動物占有水生節(jié)肢動物中最大的比例,其經(jīng)濟價值不可估量。其中對蝦是甲殼類中最重要的水產(chǎn)養(yǎng)殖動物,然而由于多種細菌和病毒入侵蝦體導(dǎo)致疾病甚至死亡,使對蝦養(yǎng)殖業(yè)遭受巨大損失。其中鰻弧菌(Vibrio anguillarum)是海水養(yǎng)殖對蝦產(chǎn)業(yè)的主要病原菌之一。因此,對于對蝦先天免疫機理的研究,不僅可以為防治蝦病提供新方法及基礎(chǔ)理論指導(dǎo),同時還可以豐富無脊椎動物的先天免疫理論,與模式生物的研究互為印證,具有重要的實際意義和科學(xué)意義。絲氨酸蛋白酶抑制因子(Serpin)能夠特異性的抑制絲氨酸蛋白酶,參與到對蝦的酚氧化酶原激活系統(tǒng)中,調(diào)控機體的黑化作用,從而參與對蝦的抗病原體免疫過程。目前對于絲氨酸蛋白酶抑制因子的其他生物學(xué)功能目前了解仍不多。因此,對Serpin的研究不僅可以獲得對該基因功能的新認識,為闡明其在對蝦先天免疫中的作用奠定基礎(chǔ)；還可以豐富絲氨酸蛋白酶抑制因子的理論體系,為對蝦養(yǎng)殖實踐中蝦病的防治提供理論依據(jù),具有重要的理論和現(xiàn)實意義。 我們從日本囊對蝦中鑒定出九種絲氨酸蛋白酶抑制因子,分別命名為MjSerp1-9,它們的組織分布模式各有不同,在受到鰻弧菌和白斑病毒刺激后,部分絲氨...

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略詞說明
第一章 綜述
    一.甲殼動物的疾病
        1. 甲殼動物的研究意義
        2. 侵害對蝦的主要病原菌
    二.甲殼動物的先天免疫系統(tǒng)
        1. 先天免疫概述
        2. 先天免疫的模式識別
        3. 免疫信號的轉(zhuǎn)導(dǎo)
        4. 細胞免疫
        5. 體液免疫
    三.絲氨酸蛋白酶抑制因子的研究進展
        1. 絲氨酸蛋白酶
        2. 絲氨酸蛋白酶抑制因子
    四.本論文研究的目的、意義與技術(shù)路線
第二章 絲氨酸蛋白酶抑制因子在日本囊對蝦先天免疫中的功能研究
    一.前言
    二.材料方法
        1. 試劑和儀器
        2. 菌株與載體
        3. 實驗材料和免疫刺激
        4. RNA提取和DNA合成
        5. MjSerp1 cDNA全長克隆
        6. 序列分析
        7. MjSerp1 mRNA水平組織分布和表達模式
        8. 重組蛋白表達和純化
        9. 前酚氧化酶抑制實驗
        10. 微生物結(jié)合實驗
        11. 抗菌活性檢測
        12. 蛋白酶抑制實驗
        13. 細菌清除實驗
        14. 體內(nèi)RNA干擾與細菌清除實驗
        15. 免疫細胞化學(xué)檢測蛋白的核質(zhì)定位
        16. 免疫共沉淀檢測蛋白相互作用
    三.實驗結(jié)果
        1. MjSerp1-9的組織分布和表達模式
        2. MjSerp1的序列分析
        3. MjSerp1的組織分布和表達模式
        4. MjSerp1的重組表達、純化和功能研究
        5. MjSerp1的抗菌活性及細菌結(jié)合實驗
        6. MjSerp1的蛋白酶抑制實驗
        7. MjSerp1促進了日本囊對蝦的體內(nèi)清除鰻弧菌作用
    四.討論
創(chuàng)新點總結(jié)
參考文獻
致謝
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本文編號：3816158