中國是世界上最大的魚類生產(chǎn)、消費、加工和出口國,但是魚病的泛濫影響其可持續(xù)發(fā)展,對常規(guī)藥物的耐藥是魚病泛濫的原因之一。極地微生物來源的活性物質(zhì)種類多樣,生物活性強,是極具開發(fā)潛力的新型藥物來源,從極地真菌中尋找具有拮抗水生病原菌的先導化合物,是本研究的目的。本文以南極真菌為主要對象,首先篩選具有拮抗水生病原菌活性的菌株,包括真菌培養(yǎng)性狀觀察,粗提物獲取和活性篩選,其次對真菌做形態(tài)和分子鑒定,接著觀測其發(fā)酵過程特征,最后對抑菌組分進行活性追蹤與結(jié)構(gòu)鑒定。主要研究結(jié)果如下:23株南極真菌經(jīng)發(fā)酵10 d后萃取,每1 L真菌發(fā)酵液的萃取浸膏含量為28-190 mg。經(jīng)過kirby-bauer紙片法篩選,其中一株(B-7)對嗜水氣單胞菌ATCC 7966、鰻弧菌HLPF、無乳鏈球菌均高度敏感。該菌株經(jīng)形態(tài)和顯微觀察,符合擔子菌門(Basidiomycota)的共同特征,經(jīng)18S rDNA和ITS序列測定,鑒定為皺孔菌科(Meruliaceae)的煙管菌屬(Bjerkandera)真菌。經(jīng)過批量發(fā)酵,獲得發(fā)酵產(chǎn)物浸膏20g。發(fā)酵浸膏通過活性追蹤的方法繼續(xù)分離純化,經(jīng)核磁共振波譜和質(zhì)譜在活性組分區(qū)鑒...

【文章頁數(shù)】：71 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
引言
    1.1 課題研究的背景及意義
    1.2 國內(nèi)外同類研究工作的現(xiàn)狀及分析
    1.3 本文主要研究內(nèi)容
第一章 拮抗水生病原菌的南極真菌篩選
    1.1 真菌培養(yǎng)性狀觀察
        1.1.1 材料和方法
            1.1.1.1 實驗材料和設(shè)備
            1.1.1.2 培養(yǎng)基配制
            1.1.1.3 菌種復蘇
            1.1.1.4 菌種斜面培養(yǎng)
            1.1.1.5 發(fā)酵準備
            1.1.1.6 大瓶發(fā)酵
            1.1.1.7 發(fā)酵產(chǎn)物萃取
        1.1.2 結(jié)果與討論
            1.1.2.1 菌種斜面培養(yǎng)觀察
            1.1.2.2 真菌培養(yǎng)過程觀察
            1.1.2.3 發(fā)酵產(chǎn)物測定
    1.2 真菌發(fā)酵產(chǎn)物活性篩選
        1.2.1 材料和方法
            1.2.1.1 材料
            1.2.1.2 培養(yǎng)基配制
            1.2.1.3 細菌復蘇與純化
            1.2.1.4 抑菌實驗紙片制備
            1.2.1.5 kirby-bauer紙片法抑菌篩選
        1.2.2 結(jié)果與討論
第二章 抗菌活性真菌生長觀測與分子鑒定
    2.1 活性真菌生長觀測
        2.1.1 材料和方法
        2.1.2 結(jié)果與討論
            2.1.2.1 真菌B-7原始形態(tài)鑒定
            2.1.2.2 真菌B-7斜面形態(tài)鑒定
            2.1.2.3 真菌B-7種子液形態(tài)鑒定
            2.1.2.4 真菌B-7發(fā)酵產(chǎn)物形態(tài)鑒定
    2.2 活性真菌分子鑒定
        2.2.1 材料和方法
            2.2.1.1 材料
            2.2.1.2 真菌B-7分子鑒定
        2.2.2 結(jié)果與討論
第三章 真菌發(fā)酵特征與浸膏活性追蹤
    3.1 真菌發(fā)酵特征研究
        3.1.1 材料與方法
            3.1.1.1 材料
            3.1.1.2 真菌搖瓶發(fā)酵觀測
            3.1.1.3 真菌批量發(fā)酵
        3.1.2 結(jié)果與討論
    3.2 真菌發(fā)酵浸膏活性追蹤
        3.2.1 材料和方法
            3.2.1.1 材料與設(shè)備
            3.2.1.2 發(fā)酵浸膏分離總體流程圖
            3.2.1.3 發(fā)酵浸膏初次分離步驟
            3.2.1.4 組分1-6-1-2和1-6-4-3-3分離與鑒定
            3.2.1.5 組分1-5-2-2分離與鑒定
        3.2.2 結(jié)果與討論
            3.2.2.1 粗浸膏第一次分離
            3.2.2.2 組分1-6分離
            3.2.2.3 組分1-6-1分離
            3.2.2.4 組分1-6-1-2的結(jié)構(gòu)解析
            3.2.2.5 組分1-6-4分離
            3.2.2.6 組分1-6-4-3-3的結(jié)構(gòu)解析
            3.2.2.7 組分1-5分離和結(jié)構(gòu)鑒定
            3.2.2.8 其余組分成分分析
結(jié)論
參考文獻
攻讀碩士期間的主要科研成績
致謝
附錄
    附錄一 真菌分離化合物的波譜和質(zhì)譜
        組分1-6-1-2的波譜
        組分1-6-4-3-3的波譜和質(zhì)譜
        組分1-5-2-2的波譜



本文編號：3786808