線粒體ATP酶是機(jī)體生命活動(dòng)中供能的關(guān)鍵酶,它有F1和F0兩部分組成,在結(jié)合狀態(tài)下具有合成ATP的活性,而在分離狀態(tài)下具有水解ATP的活性,ATP的水解能夠驅(qū)動(dòng)F1的轉(zhuǎn)動(dòng),跨膜的質(zhì)子流能促進(jìn)F0的轉(zhuǎn)動(dòng),因此ATP酶通過F1和Fo兩部分的有序配合,從而合成維持機(jī)體正常生命活動(dòng)所需的能量供給。 鰱(Hypophthalmichthys molitrix),俗稱白鰱、跳鰱、水鰱、鰱子,隸屬于鯉形目(Cypriniformes),鯉科(Cyprinidae),是我國著名的四大家魚之一,已成為我國主要養(yǎng)殖的淡水魚類之一。鰱由于性情活潑,喜跳躍,耐低氧能力較差,環(huán)境劇烈變化時(shí)易發(fā)生大水面積的浮頭泛塘現(xiàn)象,因而選育耐低氧鰱品種(系)已經(jīng)成為鰱新品種選育的重要研究課題之一。低氧狀態(tài)下,由于供氧不足,線粒體中的氧化磷酸化反應(yīng)受阻,不能及時(shí)有效的合成ATP,造成能量代謝受阻,無法滿足魚體對ATP正常的生理需求,魚類游動(dòng)緩慢,當(dāng)缺氧嚴(yán)重時(shí),會(huì)導(dǎo)致魚類的死亡。 本文旨在通過RACE技術(shù)對鰱線粒體ATP酶F1部分p、γ、6亞基基因的克隆,采用SYBR-green Ⅰ熒光定量PCR技術(shù)對其在低氧脅迫過程中鰱各組織...

【文章頁數(shù)】：77 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
目錄
摘要
Abstract
第一章 前言
    1 鰱的生物學(xué)特征和研究現(xiàn)狀
    2 魚類低氧脅迫的研究進(jìn)展
    3 線粒體ATP酶
        3.1 線粒體ATP酶結(jié)構(gòu)
        3.2 外界環(huán)境應(yīng)激對線粒體ATP酶的影響
        3.3 線粒體ATP酶F₁各亞基的研究現(xiàn)狀
    4. 技術(shù)路線
    5. 本研究的目的和意義
第二章 鰱線粒體ATP酶活性分析
    1 材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2 實(shí)驗(yàn)方法
    2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
        2.1 ATP合酶活性的測定標(biāo)準(zhǔn)曲線
        2.2 低氧脅迫過程中鰱線粒體ATP酶在各組織中的活性
    3 討論
第三章 鰱線粒體ATPβ基因的克隆及表達(dá)
    1 材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2 實(shí)驗(yàn)方法
    2 結(jié)果與分析
        2.1 鰱線粒體F₁-β基因全長cDNA的獲得
        2.2 鰱線粒體ATP酶β亞基基因cDNA序列分析
        2.3 鰱線粒體ATP酶β亞基氨基酸序列同源性分析
        2.4 鰱線粒體ATP酶β亞基的生物信息學(xué)分析
        2.5 鰱F₁-βmRNA表達(dá)的特異性及低氧脅迫過程中的表達(dá)變化
    3 討論
第四章 鰱線粒體F₁-ATPγ基因的克隆、表達(dá)
    1 材料與方法
    2 結(jié)果與分析
        2.1 鰱線粒體ATP酶γ亞基基因cDNA全長的克隆
        2.2 鰱線粒體ATP酶γ亞基基因cDNA序列分析
        2.3 鰱線粒體ATP酶γ亞基的生物信息學(xué)分析
        2.4 鰱線粒體ATP酶γ亞基氨基酸序列同源性分析
        2.5 鰱線粒體ATP酶γ基因表達(dá)特征分析
    3 討論
第五章 鰱線粒體F₁-ATP δ基因的克隆與表達(dá)
    1 材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2 試驗(yàn)方法
    2 結(jié)果與分析
        2.1 鰱F₁-δ基因全長cDNA全長的獲得
        2.2 鰱線粒體F₁-δ基因cDNA序列分析
        2.3 氨基酸序列比對及系統(tǒng)進(jìn)化樹分析
        2.4 鰱F₁-δ蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)、結(jié)構(gòu)域及信號(hào)肽分析
        2.5 鰱F₁-δmRNA表達(dá)的組織特異性及低氧脅迫過程中的表達(dá)變化
    3 討論
參考文獻(xiàn)
致謝
碩士期間發(fā)表的主要論文



本文編號(hào)：3750839