本論文以河南華溪蟹(Sinopptamon henanense)為實(shí)驗(yàn)動物,選擇五個時(shí)間(12、24、48、72、96 h)段、三個鎘濃度(14.5mg·L-1、29mg·L-1、58mg·L-1)組處理。首先研究了鎘對肝胰腺Ca2+-Mg2+/Na+-K+-ATPase活性和組織形態(tài)學(xué)的影響,旨在探討鎘對肝胰腺細(xì)胞的氧化損傷和毒性效應(yīng)；采用生理生化、酶學(xué)組織化學(xué)和瓊脂糖凝膠電泳法,分別檢測了肝胰腺細(xì)胞鈣調(diào)素(CaM)含量、鈣ATP酶(Ca2+-ATPase)活性、Caspase-3和Caspase-9活性,以及鎘對肝胰腺細(xì)胞DNA的影響,旨在研究鎘對肝胰腺細(xì)胞鈣穩(wěn)態(tài)和凋亡的影響。在此基礎(chǔ)上,為了探明Ca2+信號是否參與鎘誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡,進(jìn)一步研究了鈣抑制劑(EGTA, LaCL3)預(yù)處理對鎘誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的影響,探索鎘誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡過程中信號傳遞途徑和調(diào)控機(jī)理。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：(1)不同濃度鎘處理引起肝胰腺細(xì)胞Ca2+-Mg2+/Na+-K+-ATPase的活性在12 h和24 h顯著升高,之后隨著時(shí)間的推移,酶活性開始下降,說明鎘可對膜蛋白產(chǎn)生氧化損傷。(2)在組織形態(tài)學(xué)上,急性58 m...

【文章頁數(shù)】：71 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
第一章 綜述
    1 鎘污染
    2 鎘的毒性機(jī)制
        2.1 氧化損傷
        2.2 鎘對遺傳物質(zhì)的影響
        2.3 鎘對細(xì)胞膜的影響
            2.3.1 鎘對膜脂質(zhì)的影響
            2.3.2 鎘對膜蛋白的影響
        2.4 鎘破壞細(xì)胞鈣平衡
    3 鎘與細(xì)胞凋亡
        3.1 細(xì)胞凋亡
        3.2 細(xì)胞凋亡的途徑
            3.2.1 死亡受體起始的外源途徑
            3.2.2 線粒體起始的內(nèi)源途徑
        3.3 鎘與細(xì)胞凋亡
    4 鎘誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡信號途徑
        4.1 自由基信號與細(xì)胞凋亡
            4.1.1 NO信號與細(xì)胞凋亡
            4.1.2 ROS信號與細(xì)胞凋亡
        4.2 鈣信號
        4.3 鈣調(diào)素(CAM)
        4.4 鈣ATP酶(Ca²⁺-ATPase)
    5 本論文的研究意義及實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
        5.1 本論文的研究意義
        5.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
第二章 鎘對河南華溪蟹肝胰腺ATPase及組織結(jié)構(gòu)的影響
    摘要
    1 材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2 試劑與儀器
        1.3 實(shí)驗(yàn)方法
            1.3.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
            1.3.2 樣品采集和處理
        1.4 Ca²⁺-Mg²⁺-ATPase活性測定
        1.5 Na⁺K⁺-ATPase活性測定
        1.6 組織形態(tài)學(xué)檢測
        1.7 總蛋白含量測定
        1.8 數(shù)據(jù)分析
    2 結(jié)果
        2.1 鎘對河南華溪蟹肝胰腺細(xì)胞Ca²⁺-Mg²⁺-ATPase活性的影響
        2.2 鎘對河南華溪蟹肝胰腺細(xì)胞Na⁺-K⁺-ATPase活性的影響
        2.3 鎘對河南華溪蟹肝胰腺組織形態(tài)學(xué)影響
    3 討論
    abstract
第三章 鎘對河南華溪蟹肝胰腺細(xì)胞凋亡的影響
    摘要
    1 材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)動物
        1.2 實(shí)驗(yàn)藥品
        1.3 儀器設(shè)備
        1.4 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
        1.5 瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗(yàn)
        1.6 樣品制備
        1.7 測定原理
        1.8 Caspase-3,9活性檢測
        1.9 數(shù)據(jù)分析
    2 結(jié)果
        2.1 瓊脂糖凝膠電泳檢測鎘對河南華溪蟹肝胰腺細(xì)胞凋亡的影響
        2.2 鎘對河南華溪蟹肝胰腺細(xì)胞Caspase-3活性的影響
        2.3 鎘對河南華溪蟹肝胰腺細(xì)胞Caspase-9活性的影響
    3 討論
    abstract
第四章 鈣信號對鎘誘導(dǎo)河南華溪蟹細(xì)胞凋亡的調(diào)控
    搞要
    1 材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2 試劑與儀器
        1.3 實(shí)驗(yàn)方法與設(shè)計(jì)
        1.4 CaM含量測定
        1.5 Ca²⁺-ATPase活性檢測
        1.6 組織酶學(xué)檢測
        1.7 Caspase-3,9活性檢測
        1.8 總蛋白含量測定
        1.9 數(shù)據(jù)分析
    2 結(jié)果
        2.1 鎘對河南華溪蟹肝胰腺細(xì)胞CaM含量的影響
        2.2 鎘對河南華溪蟹肝胰腺細(xì)胞Ca²⁺-ATPase活性的影響
        2.3 鎘對河南華溪蟹肝胰腺組織Ca²⁺-ATPase組織酶學(xué)檢測
        2.4 Ca²⁺抑制劑EGTA和LaCl₃預(yù)處理對鎘誘導(dǎo)肝胰腺Caspase-3,9的影響
    3 討論
    Abstract
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個人簡況及聯(lián)系方式
承諾書



本文編號：3749886