鯉魚(yú),包括觀賞性的錦鯉,是歐洲和亞洲的重要淡水養(yǎng)殖品種,具有重要的經(jīng)濟(jì)與生態(tài)價(jià)值。然而,自1998年在以色列和美國(guó)暴發(fā)錦鯉皰疹病毒病以來(lái),錦鯉皰疹病毒病隨后在全球范圍流行。錦鯉皰疹病毒病的病原為錦鯉皰疹病毒(Koi Herpesvirus, KHV),因其是從鯉科魚(yú)體內(nèi)分離鑒定的第三個(gè)皰疹病毒,因此其又稱(chēng)為鯉皰疹病毒Ⅲ型(Cyprinid Herpesvirus3, CyHV-3)。由KHV感染養(yǎng)殖鯉魚(yú)引起的皰疹病毒病是近年嚴(yán)重危害我國(guó)鯉魚(yú)養(yǎng)殖業(yè)的一種重大傳染性疾病,已經(jīng)造成重大經(jīng)濟(jì)損失。目前,錦鯉皰疹病毒病尚無(wú)有效的防治方法。本文研究了KHV感染錦鯉鰭條細(xì)胞(Koi-Fin)誘導(dǎo)其發(fā)生凋亡的過(guò)程,并在建立的細(xì)胞感染系統(tǒng)中進(jìn)行了抗錦鯉皰疹病毒天然藥物篩選,為錦鯉皰疹病毒病防治技術(shù)研究與應(yīng)用奠定了前期基礎(chǔ)。研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下： 1.錦鯉皰疹病毒(KHV)感染錦鯉鰭條細(xì)胞(Koi-Fin)誘導(dǎo)其發(fā)生凋亡的研究。KHV感染錦鯉鰭條細(xì)胞(Koi-Fin),根據(jù)凋亡形態(tài)學(xué)特征檢測(cè),采用hoechst33258染色檢測(cè)方法,根據(jù)凋亡生化特征檢測(cè),采用TUNEL反應(yīng)、DAN片段化檢測(cè)、流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)...

【文章頁(yè)數(shù)】：55 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略語(yǔ)表
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 錦鯉鯉皰疹病毒研究進(jìn)展
        1.1.1 錦鯉皰疹病毒病的癥狀及流行病學(xué)
        1.1.2 錦鯉皰疹病毒的特征
        1.1.3 錦鯉皰疹病毒病的診斷
    1.2 細(xì)胞凋亡及其意義
        1.2.1 細(xì)胞凋亡的概念
        1.2.2 細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)以及生化特征變化
        1.2.3 細(xì)胞凋亡過(guò)程中相關(guān)凋亡因子
        1.2.4 細(xì)胞凋亡的檢測(cè)方法
        1.2.5 細(xì)胞凋亡與病毒感染
    1.3 抗病毒藥物研究
        1.3.1 抗病毒藥物分類(lèi)
        1.3.2 抗病毒藥物篩選的模型研究
        1.3.3 中藥抗病毒藥物研究進(jìn)展
    1.4 研究目的與意義
第二章 錦鯉皰疹病毒KHV誘導(dǎo)錦鯉鰭條細(xì)胞凋亡的研究
    2.1 材料與方法
        2.1.1 試劑
        2.1.2 細(xì)胞、病毒材料與病滴度測(cè)定
        2.1.3 hoechst33258熒光染色
        2.1.4 TUNEL檢測(cè)
        2.1.5 DNA Ladder實(shí)驗(yàn)
        2.1.6 亞G1期(sub-G1)細(xì)胞檢測(cè)
        2.1.7 JC-1檢測(cè)線(xiàn)粒體膜電位變化
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 Koi-Fin細(xì)胞病變效應(yīng)
        2.2.2 Hoechst 33258熒光染色
        2.2.3 TUNEL檢測(cè)
        2.2.4 DNA Ladder實(shí)驗(yàn)
        2.2.5 亞G1期細(xì)胞檢測(cè)
        2.2.6 流式細(xì)胞儀JC-1檢測(cè)
    2.3 討論
    2.4 小結(jié)
第三章 體外抗錦鯉皰疹病毒的植物藥物篩選及其效果比較研究
    3.1 材料與方法
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.2 病毒培養(yǎng)及滴度測(cè)定
        3.1.3 藥物對(duì)Koi-Fin細(xì)胞的毒性測(cè)定
        3.1.4 藥物篩選與抗病毒效果檢測(cè)
        3.1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 病毒培養(yǎng)及滴度測(cè)定結(jié)果
        3.2.2 藥物對(duì)Koi-Fin細(xì)胞毒性的測(cè)定結(jié)果
        3.2.3 先給藥后感染試驗(yàn)組抑制KHV復(fù)制的結(jié)果
        3.2.4 先感染后給藥試驗(yàn)組抑制KHV復(fù)制的結(jié)果
        3.2.5 藥物與病毒共孵育后感染試驗(yàn)組抑制KHV復(fù)制的結(jié)果
    3.3 討論
    3.4 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝



本文編號(hào)：3749827