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鱘魚嗜水氣單胞菌滅活疫苗研制及其免疫效果分析

發(fā)布時間:2022-02-21 04:28
  鱘魚是我國淡水養(yǎng)殖重要品種之一,在我國淡水養(yǎng)殖業(yè)中占重要地位。目前鱘魚養(yǎng)殖業(yè)呈快速增長趨勢,但隨著鱘魚養(yǎng)殖集約化和規(guī);潭炔粩嗵岣,細菌性疾病不斷發(fā)生。嗜水氣單胞菌是弧菌科氣單胞菌屬成員,廣泛存活在淡水、淤泥、土壤等環(huán)境,常常引起魚類包括鱘魚等以及兩犧動物發(fā)生病死亡。當前,細菌性疾病防治多用抗生素及化學藥物,但若長期不合理或不規(guī)范使用,引起細菌耐藥現象出現,導致環(huán)境細菌污染嚴重等問題,而疫苗預防具有效果好和低污染等優(yōu)點,已在鱘魚養(yǎng)殖業(yè)中廣泛應用。本研究在前期分離得到鱘魚源嗜水氣單胞菌的基礎上,通過比較滅活條件包括甲醛濃度(0.05%、0.1%、0.2%、0.3%和0.4%)、滅活溫度(4℃、28℃、30℃和37℃)和滅活時間(4h、8h、12h和24h),制備鱘魚用嗜水氣單胞菌滅活疫苗。然后選取鱘魚140尾,隨機分為對照組、疫苗組、佐劑組和疫苗+佐劑組,每組35尾,相應以無菌PBS溶液、滅活疫苗、黃芪多糖和滅活疫苗+黃芪多糖進行注射。于注射后第1d、7d、14d、21d和28d時,隨機采集試驗鱘尾靜脈血液樣本,5尾/組,采用ELISA測定鱘魚血液常規(guī)生化指標(谷草轉氨酶AST、谷丙轉... 

【文章來源】:貴州大學貴州省211工程院校

【文章頁數】:54 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
文獻綜述
    1 嗜水氣單胞菌病概述
        1.1 病原菌形態(tài)特征
        1.2 病原菌致病因子
    2 嗜水氣單胞菌疫苗種類
        2.1 滅活疫苗
        2.2 弱毒疫苗
        2.3 核酸疫苗
        2.4 亞單位疫苗
    3 免疫佐劑種類
        3.1 免疫佐劑分類
        3.2 黃芪多糖
    4 魚類免疫系統(tǒng)
        4.1 魚類免疫系統(tǒng)的組成
        4.2 魚類免疫相關評價指標
    5 研究目的與意義
前言
1 材料
    1.1 試驗動物與菌株
    1.2 主要試劑
    1.3 主要儀器
2 方法
    2.1 滅活疫苗的制備
        2.1.1 菌株復蘇及菌液配制
        2.1.2 滅活條件篩選
        2.1.3 滅活疫苗的制備具體過程
        2.1.4 滅活疫苗無菌及安全性檢驗
    2.2 試驗分組管理及相關指標檢測
        2.2.1 黃芪多糖溶液的制備
        2.2.2 試驗動物分組飼養(yǎng)管理及免疫接種
        2.2.3 試驗樣品采集及處理
        2.2.4 常規(guī)生化指標測定
        2.2.5 相關免疫指標測定
    2.3 免疫保護效果
        2.3.1 攻毒試驗
        2.3.2 免疫保護率
        2.3.3 對組織細胞的影響
    2.4 數據處理
3 結果
    3.1 滅活疫苗制備結果
        3.1.1 滅活條件篩選結果
        3.1.2 滅活疫苗無菌檢驗及安全性檢驗結果
    3.2 相關免疫指標檢測結果
        3.2.1 常規(guī)生化指標檢測結果
        3.2.2 血清免疫指標檢測結果
    3.3 免疫保護效果
        3.3.1 免疫保護率
        3.3.2 對組織細胞影響的結果
4 討論
    4.1 滅活疫苗制備結果分析
    4.2 相關指標檢測結果分析
        4.2.1 常規(guī)生化指標檢測結果分析
        4.2.2 相關免疫指標檢測結果分析
    4.3 免疫保護效果分析
        4.3.1 免疫保護率結果分析
        4.3.2 對組織細胞影響結果分析
5 全文結論
參考文獻
致謝
附錄 攻讀碩士學位期間發(fā)表論文情況


【參考文獻】:
期刊論文
[1]嗜水氣單胞菌滅活疫苗對鯽魚的免疫效果[J]. 祭仲石,厲成新,王中清,韋艷,張木泓.  江蘇農業(yè)科學. 2020(04)
[2]嗜水氣單胞菌孔蛋白OmpF重組表達及其免疫原性分析[J]. 高云山,劉丹丹,徐俊林,桑雨濃,梁夏夏,劉建欣,王文彬.  生物技術通報. 2019(09)
[3]西伯利亞鱘致病性嗜水氣單胞菌的分離鑒定[J]. 葉彩燕,汪開毓,劉韜,賀揚,王二龍,楊倩,何琦瑤,謝恒,何晟毓.  中國預防獸醫(yī)學報. 2018(03)
[4]黃芪多糖對雜交鱧生長性能、免疫能力、抗氧化能力和抗病力的影響[J]. 王煜恒,徐孝宙,王會聰,陳軍,張坤,倪新毅.  動物營養(yǎng)學報. 2018(04)
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[6]漁用疫苗免疫佐劑應用研究[J]. 楊星,張美彥,張效平,商寶娣.  科學養(yǎng)魚. 2017(12)
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[9]簡述溶菌酶的研究現狀[J]. 李紅,易建中,劉成倩,孫曉云,嚴華祥.  國外畜牧學(豬與禽). 2016(06)
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博士論文
[1]褐牙鲆早期生活史階段的抗氧化和免疫系統(tǒng)對甲基汞毒性的響應[D]. 任中華.中國科學院大學(中國科學院海洋研究所) 2019
[2]中華絨螯蟹常見病原的分離鑒定、致病及免疫機制研究[D]. 徐海圣.浙江大學 2004

碩士論文
[1]嗜水氣單胞菌滅活疫苗浸泡水溫對異育銀鯽免疫應答的影響研究[D]. 劉恩秀.西南大學 2018
[2]GCRV弱毒疫苗與黃芪多糖免疫草魚母本的免疫因子代間傳遞與表達特性[D]. 周智愚.湖南農業(yè)大學 2017
[3]兩種佐劑對虹鱒殺鮭氣單胞菌滅活疫苗免疫效果的影響[D]. 劉帥.上海海洋大學 2017
[4]俄羅斯鱘性腺潰爛病的免疫效果研究及膿包病病原的分離鑒定[D]. 肖艷翼.上海海洋大學 2016
[5]大鯢細菌病原的分離鑒定與嗜水氣單胞菌滅活疫苗的免疫應答研究[D]. 楊星.南京農業(yè)大學 2014
[6]加州鱸嗜水氣單胞菌滅活疫苗免疫效果及免疫學評價[D]. 付亞成.湖南農業(yè)大學 2010
[7]黃芪多糖增強疫苗免疫效力及機理研究[D]. 高艷艷.中國農業(yè)科學院 2006



本文編號:3636498

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