腎上腺素和五羥色胺作為重要的神經(jīng)遞質(zhì),廣泛分布在生物體內(nèi),在神經(jīng)元、感受器間的化學(xué)突觸中發(fā)揮著重要的信使作用,參與各種復(fù)雜的生命活動(dòng),在調(diào)節(jié)內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)等方面發(fā)揮著重要的作用。在以往的研究中發(fā)現(xiàn)腎上腺素和五羥色胺可以誘導(dǎo)多種軟體動(dòng)物包括厚殼貽貝幼蟲發(fā)生變態(tài),但對(duì)它們的分子通路尚不清楚。本研究以厚殼貽貝（Mytilus coruscus）為研究對(duì)象,對(duì)腎上腺素誘導(dǎo)變態(tài)前后幼蟲的蛋白質(zhì)組學(xué)進(jìn)行了探究,并研究了腎上腺素受體和五羥色胺受體在厚殼貽貝幼蟲變態(tài)中的功能作用。主要結(jié)果如下:1.腎上腺素誘導(dǎo)厚殼貽貝幼蟲變態(tài)前后蛋白質(zhì)組差異分析本研究利用Label-free技術(shù)分離篩選厚殼貽貝幼蟲變態(tài)過程中的差異表達(dá)的蛋白,進(jìn)一步利用PRM技術(shù)鑒定幼蟲變態(tài)過程中發(fā)育相關(guān)的關(guān)鍵蛋白,共篩選出458個(gè)差異蛋白。涉及的信號(hào)通路包括腎上腺素信號(hào)通路,G蛋白偶聯(lián)受體信號(hào)通路,蛋白磷酸化信號(hào)通路,并涉及到細(xì)胞骨架,能量代謝和轉(zhuǎn)錄翻譯等基本細(xì)胞結(jié)構(gòu)和生理活動(dòng)。本研究進(jìn)一步揭示了腎上腺素信號(hào)通路在厚殼貽貝變態(tài)過程中的重要作用,并為全面解析變態(tài)過程的蛋白響應(yīng)機(jī)制提供基礎(chǔ),為了解海洋雙殼類變態(tài)機(jī)制提供參考。2.厚殼貽貝α

【文章來源】：上海海洋大學(xué)上海市

【文章頁數(shù)】：81 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
引言
第一章 海洋無脊椎動(dòng)物變態(tài)發(fā)育相關(guān)分子機(jī)制研究
    1.1 海洋無脊椎動(dòng)物變態(tài)發(fā)育
        1.1.1 什么是變態(tài)
        1.1.2 海洋無脊椎動(dòng)物幼蟲的變態(tài)
        1.1.3 海洋幼蟲的變態(tài)和發(fā)育
    1.2 海洋無脊椎動(dòng)物的變態(tài)分子機(jī)制
        1.2.1 模式生物:果蠅
        1.2.2 兩棲動(dòng)物:青蛙
        1.2.3 脊索動(dòng)物:海鞘
        1.2.4 節(jié)肢動(dòng)物門:藤壺
    1.3 腎上腺素受體和五羥色胺受體在附著變態(tài)中的調(diào)控作用
        1.3.1 腎上腺素受體在附著變態(tài)中的調(diào)控作用
        1.3.2 5 -羥色胺受體在附著變態(tài)中的調(diào)控作用
    1.4 本研究目的、意義及研究思路
        1.4.1 研究目的與意義
        1.4.2 科學(xué)問題
        1.4.3 預(yù)期成果
        1.4.4 技術(shù)路線
第二章 腎上腺素誘導(dǎo)厚殼貽貝幼蟲變態(tài)前后蛋白質(zhì)組差異分析
    2.1 前言
    2.2 材料與方法
        2.2.1 幼蟲培育與樣品采集
        2.2.2 Label-free定量的實(shí)驗(yàn)流程
        2.2.3 PRM定量蛋白質(zhì)組檢測(cè)
        2.2.4 蛋白質(zhì)鑒定和定量
        2.2.5 差異蛋白的功能分析
    2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.3.1 蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
        2.3.2 差異蛋白分析
        2.3.3 通過GO通路和KEGG通路富集分析評(píng)估差異表達(dá)的蛋白質(zhì)
        2.3.4 通過PRM驗(yàn)證差異表達(dá)的蛋白質(zhì)
    2.4 討論
第三章 厚殼貽貝α_2腎上腺素受體和五羥色胺2A受體基因的克隆和表達(dá)分析
    3.1 材料和方法
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
            3.1.1.1 實(shí)驗(yàn)所用厚殼貽貝成貝和幼蟲
            3.1.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
            3.1.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑及耗材
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)方法
            3.1.2.1 厚殼貽貝各組織及發(fā)育階段總RNA的提取及c DNA第一鏈的合成
            3.1.2.2 α_2AR 和 5HT2A 基因片段擴(kuò)增、克隆和測(cè)序
            3.1.2.3 序列分析
            3.1.2.4 熒光定量 PCR(RT-q PCR)
            3.1.2.5 數(shù)據(jù)分析
    3.2 結(jié)果
        3.2.1 α_2AR基因全長(zhǎng)c DNA序列特征和系統(tǒng)進(jìn)化分析
        3.2.2 厚殼貽貝5-HT2AR基因全長(zhǎng)序列及其分析
        3.2.3 α_2AR基因和5-HT2AR基因在成體各組織的表達(dá)分析
        3.2.4 α_2AR基因和5-HT2AR基因在厚殼貽貝不同發(fā)育階段的表達(dá)分析
    3.3 討論
第四章 α_2腎上腺素受體基因在厚殼貽貝幼蟲變態(tài)中的作用
    4.1 實(shí)驗(yàn)材料
        4.1.1 厚殼貽貝幼蟲
    4.2 實(shí)驗(yàn)方法
        4.2.1 siRNA合成
        4.2.2 siRNA電轉(zhuǎn)染厚殼貽貝眼點(diǎn)幼蟲
        4.2.3 熒光定量PCR檢測(cè)α_2AR基因變化
        4.2.4 眼點(diǎn)幼蟲變態(tài)實(shí)驗(yàn)
        4.2.5 眼點(diǎn)幼蟲存活率實(shí)驗(yàn)
        4.2.6 數(shù)據(jù)處理
    4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.3.1 siRNA電穿孔轉(zhuǎn)染效果
        4.3.2 幼蟲變態(tài)
        4.3.3 幼蟲存活率
    4.4 討論
小結(jié)
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3632040