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抑制維氏氣單胞菌乳酸菌的篩選及抑菌活性初步研究

發(fā)布時(shí)間:2022-02-08 18:49
  乳酸菌(lactic acid bacteria,LAB)是一類能把可發(fā)酵碳水化合物(葡萄糖或乳糖)生成大量乳酸的革蘭氏陽性細(xì)菌的總稱。主要來自于自然土壤、糞便及腸道等。乳酸菌能產(chǎn)生有機(jī)酸、過氧化氫及細(xì)菌素等具有抑菌活性的物質(zhì),是理想的抗生素的替代品之一。維氏氣單胞菌(Aeromonas veronii,A.veronii)屬于最為常見的水生生物有害菌之一,其能釋放溶血素、細(xì)胞毒素以及腸毒素等多種致病因子,進(jìn)而引發(fā)魚、蝦等水生生物的批量死亡,給水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的養(yǎng)殖者帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失。本研究從鯉魚、鯽魚、武昌魚3種魚腸道內(nèi)容物中篩選乳酸菌,共分離120株菌,通過菌株菌落形態(tài)觀察、革蘭氏染色、觸酶實(shí)驗(yàn),對(duì)篩選出的菌株進(jìn)行初步鑒定,得到98株疑似為乳酸菌。制備無菌細(xì)胞培養(yǎng)液,以維氏氣單胞菌TH0426為指示菌,通過打孔法進(jìn)行抑菌試驗(yàn),發(fā)現(xiàn)有較強(qiáng)抑菌效果的共15株菌。最后,對(duì)有抑菌效果的菌進(jìn)行基因組提取,16S rDNA基因序列分析等鑒定種屬,有11株菌為腸球菌,3株干酪乳桿菌,1株植物乳桿菌。其次,將篩選乳酸菌針對(duì)其耐藥性、耐受性(膽鹽、不同pH、蛋白酶、溫度)、抑菌譜試驗(yàn)、粘附性、動(dòng)物安全性... 

【文章來源】:吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省

【文章頁數(shù)】:53 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

抑制維氏氣單胞菌乳酸菌的篩選及抑菌活性初步研究


顯微鏡下分離菌的形態(tài)

電泳圖,乳酸菌,基因擴(kuò)增,電泳圖


圖 1.2 部分乳酸菌的 16S rDNA 基因擴(kuò)增電泳圖Fig.1.2 16S rDNA gene amplification electrophoresis of Lactobacillus.Lactobacillus plantarum subsp. plantarum AB601177.1Lactobacillus pentosus strain LS3(JN680705.1)Lactobacillus plantarum subsp. plantarum (AB598976.1)Lactobacillus plantarum strain KW30 (GU552552.1)Lactobacillus plantarum strain LS5 (JN680707.1)Lactobacillus plantarum subsp. plantarum (AB598986.1)Uncultured compost bacterium partial (FN667291.1)Lactobacillus plantarum subsp. plantarum (AB598986.1)(2)Lactobacillus plantarum subsp. plantarum (AB598981.1)Lactobacillus plantarum subsp. plantarum (AB598972.1)Lactobacillus pentosus strain 124-2 (NR 029133.1)W21KR 1020130091214-A/1: Lactobacillus plantarum KACC91941006230

維氏,氣單胞菌,上清液,菌體


圖 3.2 是做掃描電鏡觀察到的效果圖。A 組為未經(jīng)任何處理的維氏氣單胞TH0426 的結(jié)構(gòu)圖,為對(duì)照組,從該圖可以清晰的看出細(xì)胞形態(tài)完整,邊緣清B 組為的經(jīng)植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)W21 培養(yǎng)上清液處理的維氏單胞菌 TH0426 細(xì)胞結(jié)構(gòu)的變化圖,從該圖可以直觀的看出培養(yǎng)上清液對(duì)菌體態(tài)的影響,菌體細(xì)胞萎縮,塌陷,細(xì)胞膜表面不平整。C 組為干酪乳桿(Lactobacillus casei)L2 培養(yǎng)上清液處理的維氏氣單胞菌 TH0426 細(xì)胞結(jié)構(gòu)的化圖,從該圖可以看出,菌體細(xì)胞變形,出現(xiàn)孔洞,破碎,呈絮狀。D 組為干乳桿菌(Lactobacillus casei)L31 培養(yǎng)上清液處理的維氏氣單胞菌 TH0426 細(xì)結(jié)構(gòu)的變化圖,從該圖可以看出菌體形態(tài)菌體細(xì)胞變形,出現(xiàn)孔洞,破碎,呈狀。說明3株乳酸菌的培養(yǎng)上清液是能夠破壞維氏氣單胞菌TH0426的細(xì)胞結(jié)

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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碩士論文
[1]江蘇地區(qū)大宗淡水魚養(yǎng)殖池塘氣單胞菌分離、鑒定和遺傳多樣性研究[D]. 王一娟.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010



本文編號(hào):3615569

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