大型魚類性成熟時間長的問題普遍存在,這給人工繁殖生產(chǎn)和提高良種選育效率帶來了較大困難。與哺乳動物類似,魚類性腺發(fā)育和性成熟啟動亦受下丘腦-垂體-性腺軸的調控,其中垂體促性腺激素（Gonadotropin,GtH）尤其是促黃體生成素（Luteinizing hormone,LH）脈沖式釋放是性成熟啟動的關鍵�；诖�,以草魚為研究對象,我們擬通過解析催乳素釋放激素（Prolactin-releasing peptide,PrRP）和雌二醇（17β-estradiol,E2）對垂體中GtH合成與分泌的調節(jié)機制,進而揭示這兩個因子在魚類性成熟啟動調控中的作用。本研究將豐富我們對魚類性成熟啟動調控網(wǎng)絡的認識,對下一步開發(fā)魚用高效催熟藥,提高大型魚類的育種效率具有重要意義。17β-雌二醇是由卵巢和腦生成的一種重要的性類固醇激素。在哺乳動物中,E2通過作用于下丘腦-垂體-性腺軸參與性成熟啟動過程的調控。但是,人們對E2在硬骨魚垂體中的功能了解較少。以草魚為研究對象,我們首先從其垂體中克隆得到三種雌激素核受體（nERs:ERα,ERβ1和ERβ2）和兩種G蛋白偶聯(lián)膜受體（GPERs:GPER1a和GP... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：84 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

草魚nERs和GPERs序列分析

圖 2-2 草魚 nERs 和 GPERs 的系統(tǒng)進化分析Fig. 2-2 Phylogenetic analysis of grass carp nERs and GPERs注釋：（A）脊椎動物中 ER 氨基酸序列的系統(tǒng)進化分析。使用青鳉的 AR 基因作為外群。（B）草魚 GPER 氨基酸序列的系統(tǒng)進化分析。使用草魚 NK3R 作為外群。Note： (A) Phylogenetic analysis of ER amino acid sequences in vertebrate species. The Oryzias latipes AR was usedas the outgroup. (B) Phylogenetic tree of grass carp GPER using predicted amino acid sequences. NK3R from grasscarp served as an outgroup to root the tree.3.2 草魚 nERs 和 GPERs 的組織表達利用 qRT-PCR，分析了 5 種雌二醇受體（GPER1a，GPER1b，ERα，ERβ1 和ERβ2）在不同腦區(qū)中的表達情況。如圖 2-3 所示，這五種受體的轉錄信號廣泛分布于嗅球，端腦，視頂蓋，小腦，延髓，下丘腦和垂體。其中，GPER1a，ERα，ERβ1和 ERβ2 都在垂體中的表達量最高。在垂體中，ERβ1 的轉錄信號比其它的雌二醇受體都高。除此之外，與其它 4 種雌二醇受體相比，GPER1b 在垂體中的表達水平最低。

圖 2-3 草魚 nERs 和 GPERs 在腦中的組織分布Fig. 2-3 Tissue distribution of nERs and GPERs in grass carp brain areas3.3 在體實驗驗證 E2 在草魚垂體中的功能以草魚為研究模型，我們檢測了 E2 的在體生理功能。按照 2 ng/g 草魚體重的濃度對草魚進行腹腔注射，處理 24 h 之后，可以顯著地提高草魚垂體中 LHβ 和 FSH的 mRNA 表達（圖 2-4A）。同時在腹腔注射 E2 3 h 到 6 h 之間，草魚血清 LH 分泌水平顯著增加（圖 2-4B）；類似的，E2 亦能顯著（P<0.05）提高草魚血清中 FSH分泌水平（圖 2-4C）。


本文編號：3601433