草魚（Ctenopharyngodon idellus）是我國重要的淡水養(yǎng)殖魚類,其產(chǎn)量及產(chǎn)值在最近幾年一直位于淡水養(yǎng)殖魚類前列。然而當(dāng)前病害問題已成為制約草魚養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的瓶頸,其中由嗜水氣單胞菌（Aeromonas hydrophila）引發(fā)的敗血癥一直是草魚養(yǎng)殖過程中的重要疾病。本研究從理論和實際兩方面考慮,立足我國國情,以草魚腎細(xì)胞（C.idellus kidney,CIK）為研究對象,開展以發(fā)掘草魚免疫相關(guān)基因為目標(biāo)的轉(zhuǎn)錄組研究。以期為今后草魚相關(guān)基因的克隆和草魚免疫學(xué)研究,尤其是草魚細(xì)菌性敗血癥的發(fā)病機(jī)理提供重要的基礎(chǔ)理念。本研究采用CCK-8和ELISA檢測試劑盒分別測定CIK細(xì)胞經(jīng)熱滅活嗜水氣單胞菌刺激后的細(xì)胞活力和相關(guān)酶活指標(biāo);依據(jù)半定量RT-PCR技術(shù)確定滅活病原菌刺激CIK細(xì)胞的最適濃度和最佳時長,并對該刺激條件下的細(xì)胞樣品進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測序;利用Illumina測序技術(shù)構(gòu)建了CIK細(xì)胞經(jīng)滅活病原菌刺激后的轉(zhuǎn)錄組文庫,結(jié)合生物信息學(xué)分析的方法,探究CIK細(xì)胞的抗菌免疫應(yīng)答機(jī)制。主要結(jié)果如下:1.在細(xì)胞活力測定中,隨著刺激時間的延長,CIK細(xì)胞數(shù)目逐漸減少,細(xì)胞活性逐漸減... 

【文章來源】：西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

滅活病原菌刺激對CIK細(xì)胞形態(tài)的影響（10×）

第2章嗜水氣單胞菌對草魚腎細(xì)胞致病性研究21不清，細(xì)胞逐漸裂解（圖2-2C），當(dāng)孵育時間為3h時，細(xì)胞裂解程度進(jìn)一步加強(qiáng)，部分細(xì)菌被消化（圖2-2D）。圖2-2CIK細(xì)胞體外吞噬現(xiàn)象觀察孵育時長：（A）0h;（B）1h;（C）2h;（D）3h。Figure2-2ObservationofphagocytosisofC.kidneycellinvitroDurationofincubation:（A）0h;（B）1h;（C）2h;（D）3h.2.3.2細(xì)胞活性檢測結(jié)果經(jīng)滅活嗜水氣單胞菌刺激處理的CIK細(xì)胞活性檢測情況如圖2-3所示。圖2-3滅活嗜水氣單胞菌刺激對CIK細(xì)胞活性的影響Figure2-3EffectsofActivatedA.hydrophilaStimulationonC.idelluskidneycell’sviabilityindex

第2章嗜水氣單胞菌對草魚腎細(xì)胞致病性研究21不清，細(xì)胞逐漸裂解（圖2-2C），當(dāng)孵育時間為3h時，細(xì)胞裂解程度進(jìn)一步加強(qiáng)，部分細(xì)菌被消化（圖2-2D）。圖2-2CIK細(xì)胞體外吞噬現(xiàn)象觀察孵育時長：（A）0h;（B）1h;（C）2h;（D）3h。Figure2-2ObservationofphagocytosisofC.kidneycellinvitroDurationofincubation:（A）0h;（B）1h;（C）2h;（D）3h.2.3.2細(xì)胞活性檢測結(jié)果經(jīng)滅活嗜水氣單胞菌刺激處理的CIK細(xì)胞活性檢測情況如圖2-3所示。圖2-3滅活嗜水氣單胞菌刺激對CIK細(xì)胞活性的影響Figure2-3EffectsofActivatedA.hydrophilaStimulationonC.idelluskidneycell’sviabilityindex

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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[8]大黃魚感染刺激隱核蟲病前后肝臟轉(zhuǎn)錄組分析以及三種組蛋白的克隆與表達(dá)研究[D]. 金媛.廈門大學(xué) 2014
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本文編號：3577840