為了探究復(fù)合益生菌在凡納濱對蝦養(yǎng)殖過程中的應(yīng)用及應(yīng)用效果,本研究通過潛在益生菌的分離鑒定,篩選出具有抗副溶血弧菌感染功能的益生菌,將其組成復(fù)合益生菌,探究其對凡納濱對蝦抗副溶血弧菌感染能力的影響,評價復(fù)合益生菌在凡納濱對蝦養(yǎng)殖中的應(yīng)用效果。本研究的主要內(nèi)容包括以下幾個方面:1、幾株潛在益生菌的分離及鑒定本研究從健康對蝦養(yǎng)殖池塘中分離出12株芽孢桿菌屬細(xì)菌。在后續(xù)的細(xì)菌培養(yǎng)過程中發(fā)現(xiàn)其中6株具有明顯的生長優(yōu)勢,對其中3株不具備溶血活性的芽孢桿菌構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹。經(jīng)過系統(tǒng)進(jìn)化樹分析,其中2號,9號初步鑒定為地衣芽孢桿菌,12號初步鑒定為枯草芽孢桿菌,并分別命名為:地衣芽孢桿菌BL-2、地衣芽孢桿菌BL-9、枯草芽孢桿菌BS-12。為了驗(yàn)證前期實(shí)驗(yàn)過程中分離保存的潛在益生菌的安全性,對實(shí)驗(yàn)室分離保存的六株細(xì)菌（地衣芽孢桿菌BL-2、BL-9,枯草芽孢桿菌BS-12,乳酸菌LB-1,假交替單胞菌PA-1,金麗假交替單胞菌CDM8）進(jìn)行了生物安全性驗(yàn)證及養(yǎng)殖安全性驗(yàn)證。生物安全性驗(yàn)證結(jié)果顯示地衣芽孢桿菌BL-2,BL-9,枯草芽孢桿菌BS-12在38小時的血平板培養(yǎng)過程中未出現(xiàn)溶血現(xiàn)象。而在養(yǎng)殖安...

【文章來源】： 上海海洋大學(xué)上海市

【文章頁數(shù)】：62 頁

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摘要
Abstract
引言
第一章 水產(chǎn)養(yǎng)殖常見益生菌種類,作用機(jī)理及研究現(xiàn)狀
    1.1 水產(chǎn)養(yǎng)殖常見益生菌種類
    1.2 益生菌在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用機(jī)理
        1.2.1 競爭性抑制
        1.2.2 分泌抑菌生物活性因子
        1.2.3 提高養(yǎng)殖動物機(jī)體免疫功能
        1.2.4 營養(yǎng)作用
        1.2.5 益生菌對養(yǎng)殖環(huán)境的改善作用
    1.6 益生菌的研究現(xiàn)狀
第二章 幾株潛在益生菌的分離及鑒定
    2.1 材料及方法
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)所用培養(yǎng)基
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1.3 細(xì)菌生物安全性驗(yàn)證
        2.1.4 細(xì)菌的養(yǎng)殖安全性驗(yàn)證
        2.1.5 潛在益生菌抗副溶血弧菌感染能力驗(yàn)證
        2.1.6 數(shù)據(jù)處理
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 細(xì)菌種類鑒定
        2.2.2 細(xì)菌生物安全性驗(yàn)證結(jié)果
        2.2.3 細(xì)菌養(yǎng)殖安全性驗(yàn)證結(jié)果
        2.2.4 潛在益生菌對凡納濱對蝦抗弧菌病能力的影響
    2.3 討論
    2.4 結(jié)論
第三章 假交替單胞菌CDM8 發(fā)酵培養(yǎng)基的優(yōu)化
    3.1 材料及方法
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)菌種
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)所用培養(yǎng)基及試劑
        3.1.3 主要儀器
        3.1.4 發(fā)酵培養(yǎng)基優(yōu)化實(shí)驗(yàn)方法
    3.2 結(jié)果
    3.3 討論
    3.4 結(jié)論
第四章 一種復(fù)合益生菌對凡納濱對蝦抗副溶血弧菌感染能力的影響
    4.1 材料方法
        4.1.1 對蝦與菌種
        4.1.2 實(shí)驗(yàn)周期及實(shí)驗(yàn)分組
        4.1.3 實(shí)驗(yàn)管理
        4.1.4 樣品及處理
        4.1.5 RNA提取及cDNA合成
        4.1.6
        4.1.7 免疫酶活性檢測
        4.1.8 數(shù)據(jù)分析與處理
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 益生菌浸泡階段養(yǎng)殖水體及對蝦腸道可培養(yǎng)細(xì)菌數(shù)量
        4.2.2 副溶血弧菌攻毒后各組對蝦累積存活率
        4.2.3 對蝦肝胰腺組織免疫基因相對表達(dá)量
        4.2.4 免疫和攻毒階段對蝦免疫相關(guān)酶活性檢測
    4.3 討論
    4.4 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]零換水條件下益生菌組合在凡納濱對蝦育苗生產(chǎn)中的應(yīng)用 [J]. 孫博超,楊運(yùn)楷,王海亮,宋曉玲,黃倢.  上海海洋大學(xué)學(xué)報. 2019(01)
[2]海洋產(chǎn)黑色素假交替單胞菌XH2的篩選及培養(yǎng)條件優(yōu)化 [J]. 竇旖君,薛永常.  微生物學(xué)雜志. 2018(06)
[3]南美白對蝦產(chǎn)業(yè)發(fā)展及瓶頸綜述 [J]. 張井增,馬建軍,孫志新,高哲穎,劉珊,楊超.  河北漁業(yè). 2018(09)
[4]一種枯草芽孢桿菌對副溶血弧菌的頡頏作用研究 [J]. 朱晶婷,趙波,藍(lán)志豪,何竺柳,李壯,裘麗君,張翎,儲張杰.  浙江海洋大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2018(05)
[5]凡納濱對蝦感染致急性肝胰腺壞死病副溶血弧菌(VpAHPND)的定量分析 [J]. 陳蒙蒙,董宣,邱亮,萬曉媛,謝國駟,黃倢.  漁業(yè)科學(xué)進(jìn)展. 2018(04)
[6]凡納濱對蝦急性肝胰腺壞死病(AHPND)病原分離鑒定及其致病性分析 [J]. 賈丹,史成銀,黃倢,張慶利,萬曉媛,許華,劉冉陽,王海波,郭程程,謝國駟.  漁業(yè)科學(xué)進(jìn)展. 2018(03)
[7]水產(chǎn)健康養(yǎng)殖理念與發(fā)展對策 [J]. 曾品保.  江西農(nóng)業(yè). 2017(23)
[8]副溶血弧菌對凡納濱對蝦肝胰腺抗氧化酶活性和基因表達(dá)的影響 [J]. 趙偉,王雷,劉梅,蔣克勇,齊燦燦,楊廣,王寶杰.  中國水產(chǎn)科學(xué). 2017(06)
[9]乳酸鏈球菌素和檸檬酸對甜櫻桃中沙門氏菌的抑制 [J]. 錢紅玫,胡文忠,李琳,戰(zhàn)楊,管玉格.  食品工業(yè)科技. 2017(15)
[10]飼料添加益生菌對凡納濱對蝦腸道菌群、Toll受體及溶菌酶基因表達(dá)及抗感染的影響 [J]. 張盛靜,趙小金,宋曉玲,王春迪,劉文亮,黃倢.  中國水產(chǎn)科學(xué). 2016(04)

博士論文
[1]金麗假交替單胞菌JG1抑菌機(jī)理研究[D]. 于敏.中國海洋大學(xué). 2013

碩士論文
[1]假交替單胞菌胞外產(chǎn)物的特性分析及其抑菌蛋白的克隆與表達(dá)[D]. 唐楊.上海海洋大學(xué). 2017
[2]凡納濱對蝦防病益生菌的篩選和效果評價[D]. 王春迪.上海海洋大學(xué). 2016
[3]飼料中黃曲霉毒素B1對凡納濱對蝦生長、生化指標(biāo)及肝胰腺顯微結(jié)構(gòu)的影響[D]. 王靜.河北農(nóng)業(yè)大學(xué). 2014
[4]溶藻弧菌肽聚糖對凡納濱對蝦常用免疫指標(biāo)、蝦青素含量和LvLT基因表達(dá)的影響[D]. 謝警鴻.廣東海洋大學(xué). 2013
[5]凡納濱對蝦“早期死亡綜合癥”的初步研究[D]. 蘇樹葉.海南大學(xué). 2013
[6]堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿菌PC465在凡納濱對蝦養(yǎng)殖中的應(yīng)用技術(shù)及效果評價[D]. 柴鵬程.上海海洋大學(xué). 2012
[7]飼料中添加復(fù)合益生菌對羅非魚生長性能、腸道蛋白酶活性和飼料消化率的影響[D]. 賴凱昭.廣西大學(xué). 2012



本文編號：3535462