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棕點石斑魚中草藥免疫增強劑的篩選及其非特異性免疫增強效果研究

發(fā)布時間:2021-12-11 07:42
  近年來,海南、福建、廣東等地養(yǎng)殖棕點石斑魚(Epinephelus fuscoguttatus)發(fā)生了較嚴重的暴發(fā)性疾病,制約了其可持續(xù)健康發(fā)展。篩選和使用合適的免疫增強劑以提高水產動物的整體抗病力已成為當前水產病害預防的有效手段之一。目前,在水產養(yǎng)殖中常用的免疫增強劑類型包括糖類、維生素、微量元素、核苷酸、微生態(tài)制劑、中草藥等,其中,中草藥具有天然性、多功能性、低殘留、資源豐富等優(yōu)點,已成為魚類等水產養(yǎng)殖動物免疫增強劑的重要來源之一。本文先采用離體外周血白細胞與中草藥提取液共孵育的方法快速篩選棕點石斑魚中草藥免疫增強劑,再通過體內投喂實驗,檢測所篩選中草藥對棕點石斑魚非特異免疫功能的影響,獲得安全高效的棕點石斑魚中草藥免疫增強劑。根據(jù)已有的文獻資料,選擇39種已報道對水產養(yǎng)殖動物具有較好免疫增強效果的中草藥用于棕點石斑魚免疫增強劑篩選。采用常溫浸泡提取法分別制備39種中草藥提取液,與棕點石斑魚白細胞于體外共同孵育后,采用氮藍四唑(NBT)還原法檢測了生藥量濃度為100mg/mL的39種單方中草藥水提液和添加了5.0mg/mL酵母聚糖的中草藥水提液對棕點石斑魚外周血白細胞氧呼吸爆發(fā)活性... 

【文章來源】:海南大學海南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】:65 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
目錄
第一章 綜述
    1 棕點石斑魚研究進展
        1.1 棕點石斑魚概述
        1.2 棕點石斑魚養(yǎng)殖現(xiàn)狀
    2 養(yǎng)殖魚類疾病及其防治研究進展
        2.1 養(yǎng)殖魚類疾病的發(fā)生及流行概況
        2.2 石斑魚疾病的發(fā)生及流行概況
        2.3 魚類疾病的防治
    3 魚類免疫研究進展
        3.1 魚類免疫器官及組織
        3.2 魚類免疫細胞
        3.3 非特異性免疫因子
        3.4 魚類主要免疫相關因子
    4 魚用免疫增強劑研究進展
        4.1 魚用多聚糖類免疫增強劑
        4.2 魚用中草藥免疫增強劑
    5 本研究的目的及意義
    6 本研究的技術路線
第二章 棕點石斑魚免疫增強劑的體外快速篩選
    1 實驗材料與儀器
        1.1 實驗儀器設備
        1.2 主要試驗試劑及配制方法
    2 試驗方法
        2.1 實驗中草藥
        2.2 實驗用魚
        2.3 中草藥提取液樣品制備
        2.4 棕點石斑魚血液樣品制備
        2.5 外周血白細胞分離混合液選擇及外周血白細胞樣品制備
        2.6 中草藥對外周血白細胞呼吸爆發(fā)活性的影響
        2.7 中草藥對外周血白細胞吞噬活性的影響
        2.8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析
    3 結果
        3.1 棕點石斑魚外周血白細胞分離液的篩選
        3.2 提高棕點石斑魚白細胞氧呼吸爆發(fā)活性中草藥篩選
        3.3 提高棕點石斑魚白細胞吞噬活性中草藥篩選
    4 討論
        4.1 細胞分離液對外周血白細胞分離效果的影響
        4.2 中草藥免疫增強劑篩選
第三章 中草藥對棕點石斑魚生長及非特異性免疫功能的影響
    1 實驗材料與藥品
        1.1 實驗器材
        1.2 實驗試劑及配制方法
    2 實驗方法
        2.1 棕點石斑魚的準備
        2.2 中草藥提取液樣品準備
        2.3 飼料制備
        2.4 取樣
        2.5 體重測定
        2.6 抗凝血樣品的采集及細胞免疫學指標的測定
        2.7 血清樣品的采集及血清免疫學指標的測定
        2.8 脾臟體指數(shù)測定
        2.9 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析
    3 結果與分析
        3.1 投喂三種中草藥對棕點石斑魚體重增長率的影響
        3.2 投喂三種中草藥對脾臟體指數(shù)的影響
        3.3 三種中草藥對棕點石斑魚血液紅細胞數(shù)量的影響
        3.4 三種中草藥對棕點石斑魚血液白細胞數(shù)量的影響
        3.5 三種中草藥對棕點石斑魚外周血白細胞氧呼吸爆發(fā)活性的影響
        3.6 三種中草藥對棕點石斑魚外周血白細胞吞噬活性的影響
        3.7 三種中草藥對棕點石斑魚堿性磷酸酶活性(AKP)的影響
        3.8 三種中草藥對棕點石斑魚血清超氧化物歧化酶(T-SOD)活性的影響
        3.9 三種中草藥對棕點石斑魚血清溶菌酶活性(LSZ)的影響
        3.10 三種中草藥對棕點石斑魚血清總蛋白含量的影響
    4 討論
        4.1 中草藥促生長作用
        4.2 中草藥對脾臟體指數(shù)的影響
        4.3 中草藥對血細胞數(shù)量的影響
        4.4 中草藥對白細胞氧呼吸爆發(fā)活性和吞噬活性的影響
        4.5 中草藥對血清非特異性免疫學功能的影響
第四章 結論
參考文獻
作者攻讀學位期間論文發(fā)表情況
致謝


【參考文獻】:
期刊論文
[1]復方中草藥對大菱鲆非特異性免疫力的影響[J]. 李華,張?zhí)?李強.  大連海洋大學學報. 2013(02)
[2]棕點石斑魚池塘網(wǎng)箱養(yǎng)殖模式研究[J]. 符書源,劉金葉,王永波,鄭飛,王國福,劉天密.  水產科技情報. 2013(02)
[3]中草藥多糖的免疫調節(jié)作用及其受體的研究[J]. 鄒云,謝紅兵,賀建華.  中國飼料. 2013(05)
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博士論文
[1]魚類適應性免疫系統(tǒng)的早期發(fā)生以及Ikaros基因的克隆和表達[D]. 李風鈴.中國海洋大學 2009
[2]人參皂苷抗馬立克氏病腫瘤形成作用及其機制研究[D]. 付本懂.吉林大學 2006
[3]牙鲆免疫系統(tǒng)形態(tài)結構、發(fā)育和感染病理反應的研究[D]. 劉云.中國海洋大學 2003

碩士論文
[1]復方中草藥對羅非魚、草魚生長性能和非特異免疫功能的影響[D]. 張照紅.福建農林大學 2011
[2]草魚體內三種氟喹諾酮類藥物的殘留檢測研究[D]. 劉莉莉.西南大學 2008
[3]復方中草藥對香魚部分免疫生化指標的影響[D]. 馬維波.吉林農業(yè)大學 2007
[4]魚類ILF2和IL-21基因克隆與表達研究[D]. 王惠菊.浙江大學 2006



本文編號:3534278

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