發(fā)布時間：2021-11-16 18:39

　　云紋石斑魚（Epinephelus moara）是東南亞最重要的水產(chǎn)養(yǎng)殖種類之一,主要分布在中國西北太平洋和沿海地區(qū),是目前作為唯一用于制作刺身的石斑魚種類,肉質(zhì)細嫩、味道鮮美,具有極高的經(jīng)濟價值。超低溫冷凍保存技術(shù)可為云紋石斑魚石斑魚種質(zhì)資源的保存提供一個很好的途徑。近年來,由于魚胚體積大（直徑為≥1mm）、雙層膜、卵膜通透性差、卵黃囊含水量多,其冷凍保存比哺乳類胚胎困難許多。到目前為止,只有極少數(shù)品種的魚胚能夠成功冷凍保存。因此,加強魚胚低溫生物學(xué)的基礎(chǔ)研究,對于闡明魚類胚胎冷凍損傷機制,更好地制定相應(yīng)的魚胚冷凍保存方法,攻克魚胚冷凍保存的技術(shù)難關(guān)具有重要作用。本文研究計劃不同于以往大多數(shù)的魚類胚胎冷凍研究路線,摒棄了對胚胎冷凍操作方法的單一摸索,采取三條技術(shù)路線相結(jié)合的策略。一方面利用傳統(tǒng)玻璃化液PMG3S和PMG3T對云紋石斑魚胚胎存活影響進行初步研究,分析不同玻璃化冷凍保存條件對云紋石斑魚胚胎存活的影響,進行定向優(yōu)化;另一方面,在傳統(tǒng)玻璃化液研究的基礎(chǔ)上,根據(jù)低溫生物學(xué)領(lǐng)域的最新研究動向,研發(fā)新型非滲透性冷凍保護劑（NPC）,并探究NPC在云紋石斑魚胚胎冷凍保存中的應(yīng)用;同時... 

【文章來源】：上海海洋大學(xué)上海市

【文章頁數(shù)】：108 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

—1一種玻璃化冷凍保護劑對不同發(fā)育時期云紋石斑魚胚胎的影響

上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文1738.35±22.05%）（P>0.05），均高于對照組（11.11±5.65%）（P<0.05）（圖2—2）。圖2—2兩種玻璃化冷凍保護劑對單一發(fā)育時期胚胎的影響Fig.2-2TheeffectoftwovitrificationsolutionsonTBstageembryosofE.moara2.3.3三種濃度玻璃化冷凍保護劑對單一發(fā)育時期胚胎的影響結(jié)果顯示，用35%、40%、45%濃度PMG3S處理過的尾芽期胚胎，隨著PMG3S濃度的增加，胚胎存活率顯著降低（P<0.05）；其中35%PMG3S組的存活率最高，為72.05±17.33%；40%PMG3S組的存活率其次，為63.36±19.94%；45%PMG3S組生存率最低，為36.79±24.01%，遠低于平均存活率57.49%。并且45%PMG3S組的正常發(fā)育率為21.27%，同樣遠低于35%和40%PMG3S組（31.5±7.06%和25.26±14.65%）（P<0.05）。在畸形率方面，三組之間無顯著差異（P>0.05），平均為36.13%，但均顯著高于對照組（P<0.05），且各分組的胚胎存活率和正常發(fā)育率均顯著低于對照組（86.76±10.67%，70.65±7.12%，P<0.05）（圖2—3a）。結(jié)果顯示，用35%、40%和45%的PMG3T處理的尾芽期胚胎，同樣隨著玻璃化液濃度的增加，胚胎存活率顯著降低（P<0.05）。35%、40%、45%處理的存活率分別為55.18±12.24%、43.93±19.17%和37.11±16.75%，平均為45.41%。在胚胎正常發(fā)育率方面，三種濃度條件下處理的胚胎的正常發(fā)育率差異并不顯著（P>0.05），平均為11.04%。但胚胎畸形率方面，45%PMG3T處理組的胚胎畸形

上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文18率顯著低于35%和40%PMG3T組（P<0.05），平均為31.04%。各分組的生存率和正常發(fā)育率同樣均顯著低于對照組（P<0.05）（圖2—3b）。圖2—3三種濃度玻璃化冷凍保護劑對單一發(fā)育時期胚胎的影響Fig.2-3Theeffectof35%,40%and45%PMG3S(a)andPMG3T(b)onTBstageembryos2.3.4冷凍保存成活統(tǒng)計結(jié)果顯示，利用不同濃度的玻璃化液PMG3S和PMG3T冷凍保存各發(fā)育階段胚胎中，肌節(jié)期、尾芽期和胚體顫動期的胚胎獲得成活個體，35%、40%、45%濃度PMG3S和45%濃度PMG3T處理組獲得成活個體。冷凍保存胚胎的存活率在尾

【參考文獻】：
期刊論文
[1]云紋石斑魚（♀）×藍身大斑石斑魚（♂）遠緣雜交后代發(fā)育與生長[J]. 唐江,田永勝,李振通,成美玲,馬文輝,龐尊方,李文升,王曉梅,翟介明.  廣東海洋大學(xué)學(xué)報. 2019(04)
[2]低溫脅迫導(dǎo)致斑馬魚尾部發(fā)育畸形的分子機制[J]. 李文豪,冉皓宇,陳良標(biāo).  基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué). 2018(06)
[3]低溫脅迫對魚類PI3K/AKT/GSK-3β信號通路的影響[J]. 王金鳳,胡鵬,牛虹博,陳良標(biāo).  生物學(xué)雜志. 2016(06)
[4]云紋石斑魚仔、稚、幼魚的形態(tài)觀察[J]. 劉銀華,張雅芝,鐘幼平,李軍,謝仰杰,胡家財.  應(yīng)用海洋學(xué)學(xué)報. 2016(04)
[5]云紋石斑魚胚胎發(fā)育及仔、稚、幼魚形態(tài)觀察[J]. 宋振鑫,陳超,翟介明,李炎璐,馬文輝,王魯,龐尊方,吳雷明.  漁業(yè)科學(xué)進展. 2012(03)
[6]Perspectives:Gene expression in fisheries management[J]. Jennifer L.NIELSEN,Scott A.PAVEY.  Current Zoology. 2010(01)
[7]斜帶石斑魚仔魚變態(tài)過程中甲狀腺的發(fā)育變化[J]. 唐嘯塵,劉曉春,林浩然.  水生生物學(xué)報. 2010(01)
[8]飛秒激光在生物學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用[J]. 王麗,邱建榮.  激光與光電子學(xué)進展. 2010(01)
[9]不同抗凍劑對牙鲆胚胎毒性研究以及玻璃化顆粒冷凍保存方法的應(yīng)用[J]. 劉本偉,陳松林,田永勝,孔曉瑜,王春花.  中國水產(chǎn)科學(xué). 2007(05)
[10]超聲波空化及其應(yīng)用[J]. 陳輝,強穎懷,葛長路.  新技術(shù)新工藝. 2005(07)

博士論文
[1]三種海水魚類胚胎玻璃化冷凍保存研究[D]. 田永勝.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2004

碩士論文
[1]玻璃化凍存對鯽魚卵細胞的影響[D]. 沈薔.浙江農(nóng)林大學(xué) 2013
[2]真鯛精子胚胎冷凍保存研究[D]. 丁福紅.中國科學(xué)院研究生院（海洋研究所） 2004



本文編號：3499370