在水產(chǎn)養(yǎng)殖中由于抗微生物藥物的濫用造成耐藥病原大量出現(xiàn)、養(yǎng)殖環(huán)境不斷惡化、水產(chǎn)品藥物殘留量超標等一系列問題。因而,抗生素替代品的研發(fā)受到了廣泛的關注。現(xiàn)在,許多關于益生菌的研究報道表明其在水產(chǎn)養(yǎng)殖中不僅在一定程度上可以替代抗生素,還可以發(fā)揮許多益生作用,例如,促進魚類生長、提高餌料效率、改善腸道菌群、增強免疫力、拮抗病原及改善水質(zhì)等等。因此,安全、有效的益生菌株的篩選及應用對于水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的可持續(xù)發(fā)展至關重要。本論文通過體外實驗研究了環(huán)境分離菌株及消化道分離菌株的益生特性（胞外酶產(chǎn)生譜、病原菌拮抗譜）及其對胃腸道內(nèi)環(huán)境的耐受力,同時依據(jù)體外實驗結(jié)果選取分離株Bacillus G024 （分離自水體環(huán)境）、Bacillus M001（分離自牙鲆消化道）進行體內(nèi)實驗,研究了其對實驗動物大菱鲆的生長、免疫、抗病力、腸道菌群結(jié)構(gòu)的影響。1.海洋源產(chǎn)胞外酶細菌的分離鑒定本研究從牙鲆（Paralichthys olivaceus）、大菱鲆（S. maximus）、點帶石斑魚（E.coioides）、斑鰶（Konosirus punctatus）消化道及海參露天養(yǎng)殖池的海水和底泥中分離細菌,分別用脫脂... 

【文章來源】：南京農(nóng)業(yè)大學江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：188 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略符號
引言
第一篇 文獻綜述
    第一章 水產(chǎn)益生菌研究進展
        摘要
        1 前言
        2 益生菌的基礎理論及發(fā)展
            2.1 益生菌的定義
            2.2 益生菌的種類
            2.3 益生菌的作用機理
        3 益生菌的篩選
            3.1 益生菌益生特性的驗證
            3.2 益生菌的動物安全性評價
            3.3 益生菌株對消化道內(nèi)環(huán)境耐受能力的評價
        4 水產(chǎn)益生菌的應用前景
    第二章 魚類腸道菌群研究進展
        摘要
        1 前言
        2 魚類腸道菌群的概念
        3 魚類腸道菌群的形成及結(jié)構(gòu)
            3.1 魚類腸道菌群的形成
            3.2 魚類腸道菌群的結(jié)構(gòu)
            3.3 魚類腸道菌群結(jié)構(gòu)的影響因素
        4 魚類腸道菌群的功能
            4.1 生物拮抗作用
            4.2 免疫調(diào)節(jié)作用
            4.3 營養(yǎng)作用
            4.4 消化道菌群與疾病暴發(fā)的關聯(lián)
        5 魚類腸道菌群的研究手段
        6 今后的科研方向
            6.1 仔稚魚期消化道微生物區(qū)系的研究
            6.2 采用微生態(tài)學手段防控魚類疾病
            6.3 檢測環(huán)境質(zhì)量
        7 本文的研究目的及論文的基本框架
            7.1 本文的研究目的和意義
            7.2 本研究的主要內(nèi)容和技術(shù)路線
第二篇 實驗研究
    第三章 海洋源產(chǎn)胞外酶細菌的分離、鑒定
        摘要
        前言
        1 材料與方法
            1.1 分離產(chǎn)胞外酶菌株的樣品來源
            1.2 海洋源細菌的分離
            1.3 純化后海洋源細菌的產(chǎn)胞外酶特性驗證
            1.4 產(chǎn)胞外酶菌株的革蘭氏染色及形態(tài)學觀察
            1.5 部分產(chǎn)胞外酶菌株的16S r1RNA基因的PCR擴增及遺傳進化系分析
            1.6 已鑒定產(chǎn)胞外酶菌株對水產(chǎn)動物常用藥物的耐藥性檢測
        2 結(jié)果
            2.1 海水魚類消化道及海水、底泥樣本中細菌的分離
            2.2 純化后細菌的產(chǎn)胞外酶特性
            2.3 產(chǎn)胞外酶菌株的革蘭氏染色結(jié)果及形態(tài)學特征
            2.4 產(chǎn)胞外酶菌株的遺傳進化系分析結(jié)果
            2.5 已鑒定產(chǎn)胞外酶菌株的耐藥性特征
        3 討論
        4 本章小結(jié)
        ABASTRACT
    第四章 產(chǎn)胞外酶芽孢桿菌對水產(chǎn)病原菌拮抗效果的評價
        摘要
        前言
        1 材料與方法
            1.1 牛津杯法驗證測試菌株對水產(chǎn)病原菌的抑制作用
            1.2 掃描電鏡觀察測試菌株G024、N004對水產(chǎn)病原菌的抑制效果
        2 結(jié)果
            2.1 測試菌株對水產(chǎn)病原菌的抑菌譜
            2.2 測試菌株G024、N004無細胞培養(yǎng)上清對指示菌株的影響
        3 討論
        4 本章小結(jié)
        ABSTRACT
    第五章 潛在益生芽孢桿菌的生長特性、消化道內(nèi)環(huán)境耐受力及動物安全性研究
        摘要
        前言
        1 材料與方法
            1.1 測試菌株生長特性的評價
            1.2 測試菌株生長曲線測定
            1.3 膽鹽濃度對測試菌株生長影響的評價
            1.4 測試菌株對人工胃液的耐受力的評價
            1.5 測試菌株溶血特性的評價
            1.6 測試菌株卵磷脂酶活性特征的評價
            1.7 測試菌株生物被膜形成能力的評價
            1.8 測試菌株質(zhì)粒提取
            1.9 對魚的安全性試驗
            1.10 數(shù)據(jù)分析
        2 結(jié)果
            2.1 溫度、pH值、鹽度對測試菌株生長的影響
            2.2 測試菌株的生長曲線
            2.3 膽鹽濃度對測試菌株生長的影響
            2.4 人工胃液對測試菌株存活率的影響
            2.5 測試菌株的溶血特性
            2.6 測試菌株的卵磷脂酶活性特征
            2.7 測試菌株生物被膜形成特征
            2.8 測試菌株的質(zhì)粒提取結(jié)果
            2.9 測試菌株的動物安全性
        3 討論
        4 本章小結(jié)
        ABSTRACT
    第六章 潛在益生芽孢桿菌G024和M001對大菱鲆的生長、消化酶活力、天然免疫水平、消化道菌群結(jié)構(gòu)及抗病力的影響
        摘要
        前言
        1 材料與方法
            1.1 實驗設計(大菱鲆飼養(yǎng)試驗)
            1.2 實驗餌料制備
            1.3 菌株G024、M001對大菱鲆生長影響的評價
            1.4 樣品采集及處理
            1.5 大菱鲆肝胰臟、胃、腸道消化酶(蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶)活力的測定
            1.6 大菱鲆血清免疫學指標及其它生理學指標的測定
            1.7 攻毒實驗
            1.8 PCR-DGGE技術(shù)分析大菱鲆消化道菌群結(jié)構(gòu)
            1.9 數(shù)據(jù)分析
        2 結(jié)果
            2.1 潛在益生芽孢桿菌G024、M001對大菱鲆生長的影響
            2.2 潛在益生芽孢桿菌G024、M001對大菱鲆肝胰臟、胃、腸道消化酶(蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶)活力的影響
            2.3 潛在益生芽孢桿菌G024、M001對大菱鲆血清免疫學指標的影響
            2.4 潛在益生芽孢桿菌G024、M001對大菱鲆抗病力的影響
            2.5 潛在益生芽孢桿菌G024、M001對大菱鲆消化道菌群結(jié)構(gòu)的影響
        3 討論
        4 本章小結(jié)
        ABSTRACT
    第七章 全文結(jié)論及創(chuàng)新點
        全文結(jié)論
        創(chuàng)新點
參考文獻
附錄
    附表1 產(chǎn)酶(蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、纖維素酶)菌株的基本特性
    附表2 本博士論文中測序基因的BLAST比對結(jié)果
攻讀學位期間發(fā)表的論文
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]2株魚源芽孢桿菌的生物學特性研究[J]. 馬如龍,楊紅玲,孫云章,葉繼丹,張春曉,林文燕.  水產(chǎn)科學. 2010(09)
[2]草魚和青魚消化酶的分布特性[J]. 劉忠義,王璋.  淡水漁業(yè). 2006(01)
[3]微生態(tài)調(diào)節(jié)劑對提高中國對蝦抗病力的研究[J]. 吳垠,王斌,祝國芹,桂遠明,康白,文姝,孔慶友.  中國微生態(tài)學雜志. 1996(01)
[4]微生態(tài)調(diào)節(jié)劑對鯉生長及腸道菌群的影響[J]. 王斌,陳營,毛連菊,桂遠明,康白,文姝,孔慶友.  中國微生態(tài)學雜志. 1996(01)
[5]雙歧桿菌生態(tài)制劑在中國對蝦育苗生產(chǎn)中的應用[J]. 鄒向陽.  中國微生態(tài)學雜志. 1995(01)
[6]微生態(tài)學的崛起與觀念革命[J]. 康白.  中國微生態(tài)學雜志. 1993(01)
[7]復方回春生對鯉暴發(fā)性肝炎治療效果的初步研究報告[J]. 桂遠明,吳垠,祝國芹,康白,蔣寒青,孔慶友,賀向榮.  中國微生態(tài)學雜志. 1992(02)
[8]微生態(tài)制劑—活菌制劑現(xiàn)狀[J]. 陳婷梅,張德純.  中國微生態(tài)學雜志. 1992(01)
[9]仔鰻生態(tài)失調(diào)死亡率與腸道微生態(tài)系重調(diào)整的研究[J]. 王經(jīng)邦,洪黎民.  中國微生態(tài)學雜志. 1991(03)
[10]仔鰻腸道微生態(tài)的重建與嗜食性研究[J]. 王經(jīng)邦,洪黎民.  中國微生態(tài)學雜志. 1991(01)

博士論文
[1]鰻弧菌Ⅵ型分泌系統(tǒng)（T6SS）的功能及調(diào)控研究[D]. 郝彬.中國科學院研究生院（海洋研究所） 2012
[2]兩株鰻弧菌全基因組序列測定及轉(zhuǎn)錄組比較分析[D]. 李貴陽.中國科學院研究生院（海洋研究所） 2011



本文編號：3486895