淇河鯽CuZnSOD和MnSOD基因的克隆及其對(duì)嗜水氣單胞菌的響應(yīng)
發(fā)布時(shí)間：2021-11-02 05:17
超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase,SOD）是生物抗氧化系統(tǒng)中重要的組成部分,主要用于清除體內(nèi)多余的活性氧自由基,以保護(hù)機(jī)體遺傳物質(zhì)的完整性、細(xì)胞膜的穩(wěn)定性等。水生動(dòng)物由于缺乏特異性免疫,其自身天然免疫十分重要。近年來,大量研究證實(shí)SOD參與水生動(dòng)物抗氧化反應(yīng)。淇河鯽（Qihe crucian carp Carassius auratus）是河南省特有珍貴水產(chǎn)品,擁有很高的營養(yǎng)價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值,因此研究淇河鯽SOD基因特征及對(duì)病原菌的表達(dá)響應(yīng)對(duì)于理解SOD的生物學(xué)功能具有重要意義。本研究以淇河鯽為研究對(duì)象,以淇河鯽肌肉總RNA為模板,采用RT-PCR技術(shù)擴(kuò)增出Cu Zn SOD和Mn SOD的c DNA全長(zhǎng)序列;采用q PCR技術(shù)分別檢測(cè)了Cu Zn SOD和Mn SOD在健康淇河鯽10種器官組織中的表達(dá)情況;探究嗜水氣單胞菌和LPS分別處理后淇河鯽肝、鰓、腎、脾和頭腎中的表達(dá)響應(yīng);同時(shí),采用羥胺法測(cè)定了相應(yīng)酶活性變化。這些研究對(duì)于理解魚體的抗氧化防護(hù)機(jī)制有重要意義,并為淇河鯽疾病防控提供理論依據(jù)�；谝阎蛄�,設(shè)計(jì)引物,分別擴(kuò)增淇河鯽Cu Zn SOD和Mn SO...
【文章來源】：河南師范大學(xué)河南省
【文章頁數(shù)】：78 頁
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【部分圖文】：
淇河鯽不同器官組織MnSODmRNA的表達(dá)Fig.3-2TherelativeRNAexpressionlevelofMnSODindifferentorgansandtissuesofQihecruciancarpCarassiusauratus
control group A.hydrophila LPS圖 3-3 嗜水氣單胞菌及 LPS 處理后淇河鯽 CuZnSOD 和 MnSOD mRNA 表達(dá)變化注：Liver(a)、Gill(a)、Kidney(a)、Spleen(a)和 Head Kidney(a)為淇河鯽 CuZnSOD 的表達(dá)變化圖，Liver(b)、Gill(b)、Kidney(b)、Spleen(b)和 Head Kidney(b)為淇河鯽 MnSOD 的表達(dá)變化圖(平均值±標(biāo)準(zhǔn)差，n=5 ,P<0.05*,P<0.01**)Fig. 3-3 CuZnSOD and MnSOD mRNA relative expression levels after infected by A.hydrophila and LPSin Qihe crucian carp Carassius auratus(mean ±SD , n=5, P<0.05*,P<0.01**)Note：Liver(a)、Gill(a)、Kidney(a)、Spleen(a) and Head Kidney(a) are for CuZnSODLiver(b)、Gill(b)、Kidney(b)、Spleen(b) and Head Kidney(b) are for MnSOD經(jīng)嗜水氣單胞菌和 LPS 處理后，淇河鯽 CuZnSOD 和 MnSOD 基因在各組織中的表達(dá)在特定的時(shí)間點(diǎn)有響應(yīng)，其變化趨勢(shì)大多呈現(xiàn)為：表達(dá)量先上調(diào)，后下降，其中在脾和腎中出現(xiàn)了再次上升的現(xiàn)象。在頭腎中兩種基因的表達(dá)情況與在其他組織的表達(dá)狀況不同。CuZnSOD 在頭腎中的表達(dá)呈現(xiàn)出先下降后上升的趨勢(shì)，且分別在注射嗜水氣單
45control group A.hydrophila LPS圖 3-4 嗜水氣單胞菌及 LPS 處理下淇河鯽各器官組織 SOD 總酶活性變化(平均值±標(biāo)準(zhǔn)差，n=5 , P<0.05*, P<0.01**)Fig. 3-4 SOD activity changesafter infected by A.hydrophila and LPS in Qihe crucian carp Carassiusauratus(mean ±SD , n=5, P<0.05*,P<0.01**)嗜水氣單胞菌和 LPS 處理后，淇河鯽總 SOD 活性在肝臟、鰓、腎、脾和頭腎這五種組織中均有變化。嗜水氣單胞菌處理后，肝臟中 SOD 酶活性在 6h 顯著高于對(duì)照組，這種高酶活性一直持續(xù)至 24h，并在 12h 達(dá)到最大值，隨后酶活下降。LPS 處理后 SOD酶活性在 3h 處顯著升高，并在 12h 處達(dá)到最大值，隨后急劇下降至常值。鰓中 SOD 酶活性在兩種處理后呈現(xiàn)相似的變化趨勢(shì)，均是在 3h 處活性達(dá)到最大值，直至 12h 均極
本文編號(hào)：3471413
【文章來源】：河南師范大學(xué)河南省
【文章頁數(shù)】：78 頁
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【部分圖文】：
淇河鯽不同器官組織MnSODmRNA的表達(dá)Fig.3-2TherelativeRNAexpressionlevelofMnSODindifferentorgansandtissuesofQihecruciancarpCarassiusauratus
control group A.hydrophila LPS圖 3-3 嗜水氣單胞菌及 LPS 處理后淇河鯽 CuZnSOD 和 MnSOD mRNA 表達(dá)變化注：Liver(a)、Gill(a)、Kidney(a)、Spleen(a)和 Head Kidney(a)為淇河鯽 CuZnSOD 的表達(dá)變化圖，Liver(b)、Gill(b)、Kidney(b)、Spleen(b)和 Head Kidney(b)為淇河鯽 MnSOD 的表達(dá)變化圖(平均值±標(biāo)準(zhǔn)差，n=5 ,P<0.05*,P<0.01**)Fig. 3-3 CuZnSOD and MnSOD mRNA relative expression levels after infected by A.hydrophila and LPSin Qihe crucian carp Carassius auratus(mean ±SD , n=5, P<0.05*,P<0.01**)Note：Liver(a)、Gill(a)、Kidney(a)、Spleen(a) and Head Kidney(a) are for CuZnSODLiver(b)、Gill(b)、Kidney(b)、Spleen(b) and Head Kidney(b) are for MnSOD經(jīng)嗜水氣單胞菌和 LPS 處理后，淇河鯽 CuZnSOD 和 MnSOD 基因在各組織中的表達(dá)在特定的時(shí)間點(diǎn)有響應(yīng)，其變化趨勢(shì)大多呈現(xiàn)為：表達(dá)量先上調(diào)，后下降，其中在脾和腎中出現(xiàn)了再次上升的現(xiàn)象。在頭腎中兩種基因的表達(dá)情況與在其他組織的表達(dá)狀況不同。CuZnSOD 在頭腎中的表達(dá)呈現(xiàn)出先下降后上升的趨勢(shì)，且分別在注射嗜水氣單
45control group A.hydrophila LPS圖 3-4 嗜水氣單胞菌及 LPS 處理下淇河鯽各器官組織 SOD 總酶活性變化(平均值±標(biāo)準(zhǔn)差，n=5 , P<0.05*, P<0.01**)Fig. 3-4 SOD activity changesafter infected by A.hydrophila and LPS in Qihe crucian carp Carassiusauratus(mean ±SD , n=5, P<0.05*,P<0.01**)嗜水氣單胞菌和 LPS 處理后，淇河鯽總 SOD 活性在肝臟、鰓、腎、脾和頭腎這五種組織中均有變化。嗜水氣單胞菌處理后，肝臟中 SOD 酶活性在 6h 顯著高于對(duì)照組，這種高酶活性一直持續(xù)至 24h，并在 12h 達(dá)到最大值，隨后酶活下降。LPS 處理后 SOD酶活性在 3h 處顯著升高，并在 12h 處達(dá)到最大值，隨后急劇下降至常值。鰓中 SOD 酶活性在兩種處理后呈現(xiàn)相似的變化趨勢(shì)，均是在 3h 處活性達(dá)到最大值，直至 12h 均極
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