自從蝦肝腸胞蟲（Enterocytozoon hepatopenaei,EHP）在泰國養(yǎng)殖的生長緩慢的斑節(jié)對蝦（Penaeus monodon）中被發(fā)現(xiàn)以來,越南、印尼、馬來西亞和泰國等國家均有檢測出EHP對凡納濱對蝦的感染,對蝦感染該病原后,會出現(xiàn)生長緩慢或生長停滯,有時會出現(xiàn)白便等癥狀,但其攝食和存活率不受影響。本實驗室最早也于2013年從浙江臺州養(yǎng)殖的日本囊對蝦、凡納濱對蝦以及羅氏沼蝦樣品中檢出了EHP的感染,當(dāng)對蝦肝胰腺中EHP SSU rDNA的相對拷貝數(shù)在10³ copies/（ng HpDNA）數(shù)量級或EHP載量指數(shù)在3以上時,對蝦的生長明顯較慢,表明該載量的EHP已處于一個較高的風(fēng)險水平,其導(dǎo)致對蝦生長緩慢的問題給對蝦養(yǎng)殖業(yè)帶來了巨大損失,需要引起高度重視。本研究對EHP的流行病學(xué)進行了更深層次的研究,運用了孢子純化、熒光染色、TaqMan qPCR、原位雜交等技術(shù)手段,旨在了解EHP的更多信息,以期對該病的感染機制和防控策略提供技術(shù)依據(jù)。主要包括以下研究內(nèi)容:1蝦肝腸胞蟲（EHP）孢子的分離純化與計量孢子是EHP進行個體和群體間傳播的關(guān)鍵方式,研... 

【文章來源】：大連海洋大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：67 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 緒論
    1.1 凡納濱對蝦養(yǎng)殖概況
    1.2 凡納濱對蝦養(yǎng)殖常見病害
    1.3 蝦肝腸胞蟲的研究進展
        1.3.1 蝦肝腸胞蟲的發(fā)現(xiàn)
        1.3.2 蝦肝腸胞蟲的分類依據(jù)和感染機制
        1.3.3 蝦肝腸胞蟲的傳播方式
        1.3.4 蝦肝腸胞蟲的檢測方法
        1.3.5 蝦肝腸胞蟲的流行病學(xué)
        1.3.6 蝦肝腸胞蟲的防控措施
    1.4 本研究的目的和意義
第二章 蝦肝腸胞蟲(EHP)孢子的純化與計量
    2.1 材料與方法
        2.1.1 材料
        2.1.2 方法
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 EHP的 TaqMan探針實時熒光PCR標(biāo)準(zhǔn)曲線
        2.2.2 蝦樣的EHP載量檢測
        2.2.3 EHP的蔗糖密度梯度離心提純
        2.2.4 純化的EHP孢子的電鏡觀察
        2.2.5 純化的EHP孢子的光鏡觀察
        2.2.6 純化的EHP孢子的光鏡計數(shù)
        2.2.7 純化的EHP孢子的Taq Man qPCR檢測
    2.3 討論
第三章 熒光染料檢測蝦肝腸胞蟲(EHP)的可行性研究
    3.1 材料與方法
        3.1.1 材料
        3.1.2 方法
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 純化孢子的熒光染料染色結(jié)果
        3.2.2 對蝦糞便和肝胰腺勻漿液的Calcofluor White染色結(jié)果
        3.2.3 對蝦各個組織切片的 Calcofluor White 染色結(jié)果
        3.2.4 套式PCR法驗證試驗結(jié)果
        3.2.5 原位 LAMP(ISDL)驗證試驗結(jié)果
    3.3 討論
第四章 對蝦餌料中蝦肝腸胞蟲(EHP)的攜帶情況調(diào)查
    4.1 材料與方法
        4.1.1 材料
        4.1.2 方法
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 采集樣品的Taq Man qPCR檢測結(jié)果
        4.2.2 陽性沙蠶的DNA序列比對和原位LAMP試驗
        4.2.3 陽性蝦片樣品的人工感染試驗結(jié)果
    4.3 討論
第五章 蝦肝腸胞蟲(EHP)防控藥劑的效果評價
    5.1 材料與方法
        5.1.1 材料
        5.1.2 方法
    5.2 結(jié)果與分析
        5.2.1 包裹材料的篩選結(jié)果
        5.2.2 每次取樣的樣品信息統(tǒng)計
        5.2.3 藥物的效果評價結(jié)果
    5.3 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]凡納濱對蝦感染蝦肝腸胞蟲的群體及組織間差異性分析[J]. 程東遠(yuǎn),邱亮,宋增磊,萬曉媛,董宣,謝國駟,黃倢.  漁業(yè)科學(xué)進展. 2018(04)
[2]蝦肝腸胞蟲的研究進展[J]. 葉鍵,許婷,施禮科,王力,陳凡,郭水榮.  科學(xué)養(yǎng)魚. 2018(01)
[3]柞蠶微孢子蟲的研究進展[J]. 劉中文,徐欣,張英華,楊新峰,郭劍,朱緒偉.  中國蠶業(yè). 2017(04)
[4]警惕鹵蟲可攜帶蝦肝腸孢蟲[J]. 葉鍵,施禮科,王力,陳凡,郭水榮,麻靈芬.  科學(xué)養(yǎng)魚. 2017(11)
[5]中華絨螯蟹微孢子蟲研究進展[J]. 劉洪巖,趙彥華,孫夢玲,薛暉.  水產(chǎn)養(yǎng)殖. 2017(10)
[6]南美白對蝦生物學(xué)特性概述[J]. 李法君.  生物學(xué)教學(xué). 2017(09)
[7]3種蝦片在凡納濱對蝦育苗中的效果評價[J]. 楊育凱,林黑著,楊其彬,黃小林,黃忠.  四川農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2017(02)
[8]凡納濱對蝦3種主要病毒和蝦肝腸胞蟲在遼寧地區(qū)的流行情況分析[J]. 王博雅,王力,劉美如,葉仕根,黎睿君,李華,李強.  大連海洋大學(xué)學(xué)報. 2017(02)
[9]凡納濱對蝦（Litopenaeus vannamei）傳染性皮下及造血組織壞死病毒（IHHNV）及蝦肝腸胞蟲（EHP）的熒光定量PCR檢測[J]. 劉寶彬,楊冰,呂秀旺,萬曉媛,劉珍,黃倢.  漁業(yè)科學(xué)進展. 2017(02)
[10]應(yīng)用熒光染色劑Fluorescent Brightener 28和Propidium Iodide染色識別家蠶微孢子蟲[J]. 戴衛(wèi)江,陳功,彭祥然,李孝良,馬琳,唐旭東,徐莉,沈中元.  蠶業(yè)科學(xué). 2017(01)

碩士論文
[1]對蝦餌料生物攜帶WSSV的風(fēng)險評估及紅肉河藍(lán)蛤?qū)Ψ布{濱對蝦抗病力的影響[D]. 劉家舉.中國海洋大學(xué) 2013
[2]養(yǎng)殖大菱鲆常用餌料攜帶的細(xì)菌與其疾病發(fā)生的相關(guān)性分析[D]. 劉朝陽.中國海洋大學(xué) 2007



本文編號：3471322