近年來大鯢養(yǎng)殖過程中疾病頻發(fā),給養(yǎng)殖戶帶來了巨大的經(jīng)濟損失,從重慶某養(yǎng)殖場獲得的患病大鯢的肝臟、心臟中分離出兩株病原菌K4L1和CH6,經(jīng)人工回歸感染實驗確定其致病性,通過形態(tài)學特征、細菌生理生化特性及分子生物學方法進行鑒定,并測定其胞外產(chǎn)物酶活性。結(jié)果顯示,分離出的兩株病原菌按照生理生化鑒定與16S rDNA系統(tǒng)發(fā)育分析確定為弗氏檸檬酸桿菌和嗜水氣單胞菌;致病菌株可引起健康蠑螈、青蛙、大鯢出現(xiàn)與自然發(fā)病癥狀相似的感染癥狀;胞外酶活性發(fā)現(xiàn)弗氏檸檬酸桿菌有卵磷脂酶和淀粉酶活性,不產(chǎn)生蛋白酶、脂酶、明膠酶及脲酶;而嗜水氣單胞菌具有溶血性,產(chǎn)生卵磷脂酶、脂酶、蛋白酶,沒有檢測到淀粉酶和脲酶的活性。由此可以得出結(jié)論,引起此大鯢發(fā)病的病原菌是弗氏檸檬酸桿菌與嗜水氣單胞菌,對大鯢有很強的致病性。本文從抗生素、中草藥和消毒劑三個方面對大鯢致病菌的理化特性進行研究,為大鯢疾病的預防與治療提供理論依據(jù)。采用紙片擴散法測定了病原菌株對30種抗生藥物的敏感性,實驗結(jié)果表明,大鯢源弗氏檸檬酸桿菌對頭孢曲松、頭孢唑酮和頭孢他啶高度敏感;對多粘菌素B、新霉素、慶大霉素中度敏感,對剩余24種抗生素均呈耐藥性,耐藥率... 

【文章來源】：西南大學重慶市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：86 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 文章綜述
    1.1 大鯢的生物學習性及人工養(yǎng)殖研究
        1.1.1 大鯢生物學習性
        1.1.2 大鯢的人工養(yǎng)殖
    1.2 大鯢的致病因素及主要病害
        1.2.1 大鯢的發(fā)病原因
        1.2.2 常見大鯢疾病
    1.3 大鯢病害防治研究概述
        1.3.1 消毒劑
        1.3.2 抗生素
        1.3.3 中草藥
    1.4 研究目的與意義
第二章 引言
第三章 大鯢病原菌的分離鑒定
    3.1 材料與試劑
        3.1.1 實驗材料
        3.1.2 主要試劑
        3.1.3 實驗儀器
    3.2 實驗方法
        3.2.1 病原菌分離與形態(tài)觀察
        3.2.2 病原菌生理生化鑒定
        3.2.3 DNA模板的提取
        3.2.4 基因組DNA的檢測
        3.2.5 引物設計與合成
        3.2.6 16S rDNA目的片段的PCR擴增
        3.2.7 瓊脂糖凝膠電泳
        3.2.8 測序并構(gòu)建 16S rDNA基因系統(tǒng)發(fā)育進化樹
        3.2.9 人工感染實驗
        3.2.10 胞外酶活性檢測
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 菌株形態(tài)特征分析
        3.3.2 生理生化結(jié)果
        3.3.3 16SrDNA序列分析及系統(tǒng)發(fā)育分析
        3.3.4 人工感染結(jié)果
        3.3.5 胞外產(chǎn)物酶活性
    3.4 討論
第四章 大鯢病原菌的敏感藥物篩選
    4.1 材料與試劑
        4.1.1 供試菌
        4.1.2 主要試劑
        4.1.3 實驗儀器
    4.2 實驗方法
        4.2.1 病原菌菌懸液的制備
        4.2.2 大鯢病原菌對抗生素的敏感性實驗
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 菌株K4L1對抗生素的敏感性
        4.3.2 菌株CH6對抗生素的敏感性
    4.4 討論
第五章 中草藥對大鯢病原菌的抑制作用研究
    5.1 材料與試劑
        5.1.1 實驗材料
        5.1.2 主要試劑
        5.1.3 實驗儀器
    5.2 實驗方法
        5.2.1 中草藥母液的制備
        5.2.2 病原菌菌懸液的制備
        5.2.3 體外抑菌效果的測定
        5.2.4 最小抑菌濃度和最小殺菌濃度的測定
        5.2.5 中草藥聯(lián)用抑菌實驗
    5.3 結(jié)果與分析
        5.3.1 中草藥抑菌圈的測定
        5.3.2 中草藥抑菌效果隨作用時間的變化
        5.3.3 中草藥抑菌效果隨熬制后使用時間的變化
        5.3.4 中草藥最小抑菌濃度及最小殺菌濃度
        5.3.5 中草藥二聯(lián)復方的抑制作用評價
    5.4 討論
第六章 消毒劑對大鯢病原菌的抑制作用研究
    6.1 材料與試劑
        6.1.1 供試菌
        6.1.2 主要試劑
        6.1.3 實驗儀器
    6.2 實驗方法
        6.2.1 消毒劑的配制
        6.2.2 病原菌菌懸液的制備
        6.2.3 不同濃度消毒劑抑菌效果的測定
        6.2.4 消毒劑最小抑菌濃度和最小殺菌濃度的測定
        6.2.5 中和劑選定
        6.2.6 消毒劑消毒效果評價
        6.2.7 消毒劑聯(lián)用抑菌實驗
    6.3 結(jié)果與分析
        6.3.1 不同濃度消毒劑抑菌圈的測定
        6.3.2 消毒劑最小抑菌濃度及最小殺菌濃度
        6.3.3 中和劑選定結(jié)果
        6.3.4 消毒劑消毒效果評價
        6.3.5 消毒劑二聯(lián)復方的抑菌作用評價
    6.4 討論
第七章 結(jié)論
參考文獻
致謝
攻讀碩士學位期間發(fā)表論文及參與科研項目



本文編號：3381597