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擬穴青蟹卵黃蛋白原及其類似物的研究

發(fā)布時(shí)間:2021-08-12 12:19
  卵黃蛋白原(vitellogenin, Vg)廣泛存在于卵生動(dòng)物中,是卵黃磷蛋白(vitellin,Vn)的前體蛋白,而Vn則是卵黃蛋白(yolk protein, YP)的主要成分。Vg是一種高分子量的含糖、磷、脂的蛋白,其最基本的功能是為胚胎發(fā)育提供營養(yǎng)物質(zhì)和能量,此外Vg還具有運(yùn)輸脂類、參與免疫防御等多方面的功能。本課題組先前已克隆了擬穴青蟹(Scylla paramamosain) Vg(SpVg)的gDNA和cDNA全長序列,并且對(duì)SpVg進(jìn)行了時(shí)空表達(dá)分析,因此本文在此基礎(chǔ)上對(duì)SpVg進(jìn)行了進(jìn)一步的研究,主要結(jié)果如下:1)利用三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus) Vn抗體,采用western blot方法確定了雌性擬穴青蟹Vg/Vn蛋白的亞基組成,血淋巴Vg由約80kDa和207kDa兩個(gè)亞基組成,卵巢Vn由約80kDa、100kDa和107kDa三個(gè)亞基組成。并且推測(cè)得到擬穴青蟹外源性Vg的剪切模式:約287kDa的SpVg在肝胰腺合成后,被類枯草桿菌蛋白酶(subtilisin-like endoprotease)識(shí)別RERR保守基序,剪切得到... 

【文章來源】:廈門大學(xué)福建省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:87 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
目錄
Contents
縮略語中英文對(duì)照表
摘要
Abstract
第1章 緒論
    1.1 卵黃發(fā)生
    1.2 卵黃蛋白原的基因序列
    1.3 卵黃蛋白原的剪切加工
    1.4 卵黃蛋白原的生物學(xué)功能
    1.5 雄性動(dòng)物卵黃蛋白原/卵黃蛋白的研究概況
    1.6 本文的研究目的和內(nèi)容
第2章 雌性擬穴青蟹Vg和Vn的研究
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.1.3 主要試劑
        2.1.4 主要溶液配制
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 雌性擬穴青蟹肝胰腺、血淋巴和卵巢總蛋白的提取
        2.2.2 雌性擬穴青蟹Vg和Vn的亞基組成及分子量測(cè)定
        2.2.3 雌性擬穴青蟹Vg和Vn的質(zhì)譜鑒定
        2.2.4 雌性擬穴青蟹肝胰腺和卵巢中Vg和Vn的定位
    2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.3.1 雌性擬穴青蟹Vg和Vn的亞基組成及其分子量大小
        2.3.2 雌性擬穴青蟹Vg和Vn的質(zhì)譜鑒定
        2.3.3 雌性擬穴青蟹肝胰腺和卵巢中Vg和Vn的定位
    2.4 討論
        2.4.1 雌性擬穴青蟹Vg和Vn的亞基組成及其分子量大小
        2.4.2 雌性擬穴青蟹Vg的剪切位點(diǎn)和發(fā)生場(chǎng)所
        2.4.3 雌性擬穴青蟹肝胰腺和卵巢中Vg和Vn的定位
    2.5 小結(jié)
第3章 雄性擬穴青蟹SpVg-like的研究
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        3.1.3 主要試劑
        3.1.4 主要溶液配制
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 雄性擬穴青蟹SpVg-like基因的cDNA克隆和序列分析
        3.2.2 SpVg-like基因在雄性擬穴青蟹各組織中的表達(dá)
        3.2.3 Western blot法檢測(cè)雄性擬穴青蟹SpVg-like蛋白表達(dá)
        3.2.4 擬穴青蟹SpVg-like在生殖系統(tǒng)中的定位
    3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.3.1 雄性擬穴青蟹SpVg-like基因的cDNA克隆和序列分析
        3.3.2 SpVg-like基因在雄性擬穴青蟹各組織中的表達(dá)
        3.3.3 雄性擬穴青蟹SpVg-like蛋白的表達(dá)
        3.3.4 SpVg-like在擬穴青蟹精巢、貯精囊和納精囊中的定位
    3.4 討論
        3.4.1 雄性擬穴青蟹SpVg-like與雌性擬穴青蟹SpVg的序列比較
        3.4.2 SpVg-like基因在雄性擬穴青蟹各組織中的表達(dá)
        3.4.3 雄性擬穴青蟹SpVg-like蛋白的表達(dá)
        3.4.4 SpVg-like在擬穴青蟹精巢、貯精囊和納精囊中的定位
    3.5 小結(jié)
第4章 總結(jié)與展望
    4.1 總結(jié)
    4.2 創(chuàng)新點(diǎn)
    4.3 不足
    4.4 展望
參考文獻(xiàn)
在學(xué)期間參與的科研項(xiàng)目和成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]三疣梭子蟹卵黃磷蛋白純化及其ELISA測(cè)定方法[J]. 張艷,吳旭干,楊帆,劉智俊,成永旭.  水產(chǎn)學(xué)報(bào). 2011(08)
[2]甲殼動(dòng)物血藍(lán)蛋白研究進(jìn)展[J]. 潘魯青,金彩霞.  水產(chǎn)學(xué)報(bào). 2008(03)
[3]鋸緣青蟹精巢發(fā)育的組織學(xué)觀察[J]. 葉海輝,李少菁,黃輝洋,王桂忠.  動(dòng)物學(xué)研究. 2002(02)
[4]鋸緣青蟹卵黃發(fā)生期卵母細(xì)胞和卵泡細(xì)胞之間的結(jié)構(gòu)變化[J]. 成永旭,李少菁,王桂忠,陳學(xué)雷,林瓊武.  動(dòng)物學(xué)報(bào). 2002(01)
[5]鋸緣青蟹卵母細(xì)胞的卵黃發(fā)生[J]. 顏素芬,李少菁,上官步敏.  廈門大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 1995(03)
[6]鋸緣青蟹精子超微結(jié)構(gòu)的研究[J]. 上官步敏,李少菁.  動(dòng)物學(xué)報(bào). 1994(01)
[7]鋸緣青蟹卵巢發(fā)育的組織學(xué)觀察[J]. 上官步敏,劉正琮,李少菁.  水產(chǎn)學(xué)報(bào). 1991(02)

博士論文
[1]鋸緣青蟹Scylla serrata (Forskal)神經(jīng)系統(tǒng)和消化系統(tǒng)內(nèi)分泌細(xì)胞的研究[D]. 黃輝洋.廈門大學(xué) 2001



本文編號(hào):3338305

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