IRF8（Interferon regulatory factors 8）和IRF2都是干擾素調(diào)節(jié)因子家族成員。IRF8擁有一個高度保守的N端DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域（DBD）以及一個保守度較低的C末端的IRF關(guān)聯(lián)結(jié)構(gòu)域（IAD）。IRF8在細(xì)胞生長分化、腫瘤發(fā)生和先天免疫過程中扮演著十分重要的角色。IRF2包含三個結(jié)構(gòu)域:N末端DBD區(qū)域、C末端IAD2區(qū)域、TRD區(qū)域。IRF2也能調(diào)節(jié)細(xì)胞的發(fā)育分化,并受干擾素的誘導(dǎo)表達(dá),在先天免疫中發(fā)揮重要作用。在病毒刺激的免疫基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控中,IRF8與IRF2相互作用形成復(fù)合物,復(fù)合物通過與IRF1競爭ISRE元件上的結(jié)合位點(diǎn),調(diào)控下游基因的表達(dá)。為了研究草魚IRF8（CiIRF8）和IRF2（CiIRF2）在基因表達(dá)調(diào)控中的作用,我們用Q-PCR分析CiIRF8和CiIRF2的表達(dá)。結(jié)果顯示,CiIRF8與CiIRF2在草魚腦、眼、腸、鰓、皮膚、肝、脾、腎各組織中都有表達(dá),Poly I:C刺激后,CiIRF8與CiIRF2在各組織中的表達(dá)量均有上調(diào),但反應(yīng)程度和誘導(dǎo)時間不同。其中CiIRF8在腦、眼、腸、皮膚、肝、脾、腎七大組織中6 h表達(dá)量達(dá)到峰... 

【文章來源】：南昌大學(xué)江西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：57 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖３．１?Ｃ／ＩＲＦ８的組織表達(dá)??Ｆｉｇ．３．１?Ｔｉｓｓｕｅ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｐａｔｔｅｒｎｓ?ｏｆ?Ｃ／ＩＲＦ８??

圖３．２?Ｃ７１ＲＦ２的組織表達(dá)??Ｆｉｇ．?３．２?Ｔｉｓｓｕｅ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｐａｔｔｅｒｎｓ?ｏｆ?Ｃ／ＩＲＦ２??

?第三章實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析???１”??！?１?”??１?１??ｃ?§??？２?１．０－?Ｉ?２．??ｏ．ｏ－ｌ￣■■—＿?〇－＊￣＾??—Ａ—＂丨?＿丨丨ｒｉ，ｎ＞—??，?，?，?，??（Ａ）?（Ｂ）??Ｎ．Ｃ?Ｃ７ＩＲＦ８??ｍｍｍｍ?ｉｆｎ??’續(xù)形贊鄉(xiāng)物想游物哪）賺幽＾?＞■?ｒ?：－：：ｙ．．??ＧＡＰＤＨ??（Ｃ）??圖３．５敲降草魚丨ＲＦ８上調(diào)ＣＶＩＦＮ的表達(dá)??Ｆｉｇ．?３．５?Ｋｎｏｃｋｄｏｗｎ?ｏｆ?Ｃ／ＩＲＦ８?ｕｐ－ｒｅｇｕｌａｔｅｓ?Ｃ／ＩＦＮ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ．??向６孔培養(yǎng)板中接入ＣＩＫ細(xì)胞培養(yǎng)，８ｈ后將２＾ｌｇｓｉＲＮＡ－Ｃ／ｌＲＦ８、２＾ｉｇ＾Ｊ．Ｃ分別轉(zhuǎn)染??進(jìn)ＣＩＫ細(xì)胞中。其中Ｎ．Ｃ為陰性對照。轉(zhuǎn)染２４?ｈ后分別提取各孔細(xì)胞的總ＲＮＡ和總蛋白??質(zhì)，熒光定量ＰＣＲ及蛋白免疫印跡實(shí)驗(yàn)分別檢測Ｃ／ＩＲＦ８的ｍＲＮＡ（Ａ）、Ｃ７１ＦＮｍＲＮＡ（Ｂ）??和蛋白（Ｃ），我們以ｐ－ａｃｔｉｎ作為Ｑ－ＰＣＲ的空白對照組，以ＧＡＰＤＨ作為Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ的陽??性對照內(nèi)參。??３．３?Ｃ７ＩＲＦ８與Ｃ７ＩＲＦ２的亞細(xì)胞定位分析??為了進(jìn)一步了解Ｃ／ＩＲＦ８的生物學(xué)功能，亞細(xì)胞定位分析了?Ｃ／ＩＲＦ８和??Ｃ７ＩＲＦ２在細(xì)胞中分布的位置，并且選�。穑牛牵疲校茫炜蛰d質(zhì)粒作為陰性對照組。??如圖３．６所示，亞細(xì)胞定位結(jié)果表明，Ｃ／１ＲＦ２定位結(jié)果顯示其主要分布于細(xì)胞??核中，而Ｃ７ＩＲＦ８定位結(jié)果顯示細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)中Ｃ／１ＲＦ８均勻分布。再加入??ｐｏｌｙ?Ｉ：Ｃ刺激１２?ｈ后我們發(fā)現(xiàn)，Ｃ７ＩＲＦ８定位結(jié)果顯示細(xì)胞核中熒光強(qiáng)度明顯高??于細(xì)胞質(zhì)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
[1]草魚IRF-2下調(diào)IFN、PKR、PKZ轉(zhuǎn)錄的分子機(jī)制[D]. 谷美慧.南昌大學(xué) 2015
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[5]草魚干擾素及其調(diào)節(jié)因子1和7[D]. 馬梅生.南昌大學(xué) 2010



本文編號：3325564