基于toxR基因的輪蟲弧菌熒光定量微流控快速檢測技術的建立
發(fā)布時間:2021-07-07 21:44
以輪蟲弧菌的單拷貝基因toxR基因的高保守區(qū)域為目的片段,設計特異性引物,構建重組質粒標準品,建立針對該菌的熒光定量PCR檢測方法。以此為基礎,實驗選用UF-150 Genechecker微流控熒光定量PCR儀,通過優(yōu)化反應體系和反應條件,建立了輪蟲弧菌的微流控熒光定量PCR檢測方法。結果顯示,該方法能特異性擴增toxR基因目的片段,對輪蟲弧菌純培養(yǎng)物檢測下限為1.34×100拷貝/μL。在人工感染樣品中的應用結果顯示,對魚體組織中輪蟲弧菌的檢測下限為1.34×103 CFU/g,檢測結果可以目視判讀,檢測時間縮短至42 min以內。研究表明,該檢測方法具有特異性強、敏感度高、場地要求低等突出優(yōu)勢,適于開發(fā)水產病原實用性的現場快速檢測技術。
【文章來源】:水產學報. 2020,44(12)北大核心CSCD
【文章頁數】:10 頁
【參考文獻】:
期刊論文
[1]致急性肝胰腺壞死病副溶血弧菌(VpAHPND)自然感染三疣梭子蟹[J]. 郝景偉,高保全,王崇,孟憲亮,萬曉媛,李小平,劉萍,張慶利. 水產學報. 2019(07)
[2]一株感染深水網箱養(yǎng)殖許氏平鲉的病原菌分離與鑒定[J]. 王凱,王印庚,姜勇,張正,于永翔,廖梅杰. 漁業(yè)科學進展. 2019(01)
[3]用于農殘快速檢測的離心式微流控芯片研制[J]. 葉嘉明,邵佳美,楊平,范真真,馮何凱,陳波,杜漢根. 食品科學. 2017(12)
[4]4株長牡蠣(Crassostrea gigas)致病性哈維氏弧菌(Vibrio harveyi)鑒定及其毒力基因檢測[J]. 高曉建,姚東瑞,孫晶晶,白雪松,繆一恒,張熒熒,畢可然,秦蕾,張曉君. 海洋湖沼通報. 2015(03)
[5]用于農藥殘留現場快速檢測的微流控芯片研制[J]. 苑寶龍,王曉東,楊平,范真真,黃昱俊,陳炯,葉嘉明. 食品科學. 2016(02)
[6]食品中副溶血性弧菌toxR和tdh基因雙色熒光PCR檢測方法的建立[J]. 曹冬梅,袁慕云,許龍巖,曹際娟. 食品安全質量檢測學報. 2013(05)
[7]半滑舌鰨病原菌輪蟲弧菌(Vibrio rotiferianus)的分離與鑒定[J]. 陳政強,姚志賢,林茂,常建波. 生物技術通報. 2012(06)
[8]基于toxR基因的SYBR GreenⅠ實時定量PCR檢測病原副溶血弧菌方法的建立[J]. 張曉君,梁利國,閻斌倫,畢可然,秦國民. 中國獸醫(yī)學報. 2012(04)
[9]基于lolB和toxR基因的水產品中霍亂弧菌雙重PCR檢測方法[J]. 秦國民,張曉君,畢可然,閻斌倫,秦蕾. 食品科學. 2011(22)
[10]基于toxR基因病原哈氏弧菌PCR檢測方法的建立[J]. 姚東瑞,朱明,陳麗,畢可然,史愛琴,張曉君. 水產科學. 2011(09)
本文編號:3270424
【文章來源】:水產學報. 2020,44(12)北大核心CSCD
【文章頁數】:10 頁
【參考文獻】:
期刊論文
[1]致急性肝胰腺壞死病副溶血弧菌(VpAHPND)自然感染三疣梭子蟹[J]. 郝景偉,高保全,王崇,孟憲亮,萬曉媛,李小平,劉萍,張慶利. 水產學報. 2019(07)
[2]一株感染深水網箱養(yǎng)殖許氏平鲉的病原菌分離與鑒定[J]. 王凱,王印庚,姜勇,張正,于永翔,廖梅杰. 漁業(yè)科學進展. 2019(01)
[3]用于農殘快速檢測的離心式微流控芯片研制[J]. 葉嘉明,邵佳美,楊平,范真真,馮何凱,陳波,杜漢根. 食品科學. 2017(12)
[4]4株長牡蠣(Crassostrea gigas)致病性哈維氏弧菌(Vibrio harveyi)鑒定及其毒力基因檢測[J]. 高曉建,姚東瑞,孫晶晶,白雪松,繆一恒,張熒熒,畢可然,秦蕾,張曉君. 海洋湖沼通報. 2015(03)
[5]用于農藥殘留現場快速檢測的微流控芯片研制[J]. 苑寶龍,王曉東,楊平,范真真,黃昱俊,陳炯,葉嘉明. 食品科學. 2016(02)
[6]食品中副溶血性弧菌toxR和tdh基因雙色熒光PCR檢測方法的建立[J]. 曹冬梅,袁慕云,許龍巖,曹際娟. 食品安全質量檢測學報. 2013(05)
[7]半滑舌鰨病原菌輪蟲弧菌(Vibrio rotiferianus)的分離與鑒定[J]. 陳政強,姚志賢,林茂,常建波. 生物技術通報. 2012(06)
[8]基于toxR基因的SYBR GreenⅠ實時定量PCR檢測病原副溶血弧菌方法的建立[J]. 張曉君,梁利國,閻斌倫,畢可然,秦國民. 中國獸醫(yī)學報. 2012(04)
[9]基于lolB和toxR基因的水產品中霍亂弧菌雙重PCR檢測方法[J]. 秦國民,張曉君,畢可然,閻斌倫,秦蕾. 食品科學. 2011(22)
[10]基于toxR基因病原哈氏弧菌PCR檢測方法的建立[J]. 姚東瑞,朱明,陳麗,畢可然,史愛琴,張曉君. 水產科學. 2011(09)
本文編號:3270424
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