以七鰓鰻為代表的無頜類脊椎動物，是現(xiàn)存具有適應(yīng)性免疫系統(tǒng)最古老的物種。其獨特的特異性抗原受體和白細胞表面抗原等重要的免疫分子，與有頜類脊椎動物的適應(yīng)性免疫系統(tǒng)形成了鮮明地對比。然而，七鰓鰻是以哪種免疫分子執(zhí)行外源入侵細胞的殺傷與清除還沒有相關(guān)文獻報道。本實驗室前期在七鰓鰻免疫小體的研究中，發(fā)現(xiàn)了一種細胞毒作用的蛋白，并命名為李蛋白（Li protein）。根據(jù)Li protein的質(zhì)譜結(jié)果，本研究通過分子生物學(xué)相關(guān)技術(shù)獲得了Li protein的cDNA全長，共1120bp。生物信息學(xué)分析表明李蛋白共有兩個功能域，位于N端的Jacalin_like domain和位于C端的Aerolysin domain，空間結(jié)構(gòu)主要以β折疊片層組成。無論從一級結(jié)構(gòu)還是空間結(jié)構(gòu)，Li protein與哺乳動物的細胞毒作用免疫分子差異顯著。生物信息學(xué)分析還發(fā)現(xiàn)在海七鰓鰻基因組中Li protein具有高度的多態(tài)性，不同序列之間最大差別是等電點不同，這可能與它殺傷不同的靶細胞類型相關(guān)。本研究還利用原核表達系統(tǒng)制備了有活性的重組李蛋白（rLi protein），并以rLiprotein為... 

【文章來源】：遼寧師范大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

特異性抗原受體的起源與進化

對該組織的細胞進行體外培養(yǎng)時發(fā)現(xiàn)，該細胞能夠向培 MCF-7 細胞具有強烈殺傷能力的未知組分。隨后的研究鑒定該組分作用的蛋白分子，并由本實驗室命名為李蛋白（Li protein）。這是國研究中首次發(fā)現(xiàn)具有細胞毒作用的免疫分子，具有很高的研究價值�；蚩寺�、原核表達及組織定位幾個方面進行研究，為探索李蛋白在的生理功能奠定基礎(chǔ)，同時也為適應(yīng)性免疫系統(tǒng)的進化提供一個全

Total RNA 電泳圖 （M: DL-2000 Marker; 1, 2: Totaltal RNA electrophoretogram（M: DL-2000 Marker; 1, 2:因的 EST 驗證 PCR 結(jié)果 cDNA 文庫中，與李蛋白質(zhì)譜結(jié)果相匹配的 E列和 PolyA 尾結(jié)構(gòu)，因此認為該序列具有完整 5'-RACE 便可得到該基因 cDNA 的全長。但是 中是否存在 Li protein 的 mRNA 進行驗證，因時設(shè)立 M-MLV（-）對照），利用 EST 的核苷物 Li-Check R 進行驗證 PCR。隨后將 PCR 產(chǎn)物右的目的條帶（圖 2.2），與理論大小相符合。大連）有限公司測序，測序結(jié)果與 EST 中引物之tal RNA 可以用于下一步的 5'-RACE 實驗。


本文編號：3263305