低氧誘導(dǎo)大彈涂魚低氧生理應(yīng)激及葛根素和姜黃素的緩釋作用研究
發(fā)布時間:2021-06-26 19:34
本研究采用生理生化及分子生物學(xué)技術(shù),評估了低氧脅迫對大彈涂魚(Boleophthalmus pectinirostris)生理的影響,并通過腹腔注射葛根素和姜黃素,探討其對大彈涂魚低氧生理應(yīng)激的緩釋作用,研究成果將為徹底闡明魚類低氧生理應(yīng)激的分子機(jī)制和調(diào)控策略的研發(fā)提供理論依據(jù)。本研究由以下三個部分組成:(1)HIF-1α信號通路在大彈涂魚耐低氧脅迫中的作用。本研究通過設(shè)置常氧組(NG組)和缺氧組(HG組),探究急性低氧(1、3和6 h)對大彈涂魚低氧相關(guān)酶活性、基因表達(dá)及蛋白含量的影響。結(jié)果顯示,整個低氧過程中,對照組實(shí)驗(yàn)魚肝臟中低氧相關(guān)酶活性、基因表達(dá)及蛋白含量無顯著性差異。缺氧組實(shí)驗(yàn)魚肝臟中乳酸脫氫酶(LDH)、檸檬酸合酶(CS)和丙酮酸激酶(PK)活性呈下調(diào)趨勢,6 h時達(dá)到最低;而葡萄糖激酶(GCK)和磷酸果糖激酶(PFK)活性在3 h時最高,隨后逐漸降低;缺氧組實(shí)驗(yàn)魚肝臟中低氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)、葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)體-1(GLUT1)、脯氨酰羥化酶(PHD)和Bcl2/腺癌E1B19KD交互蛋白3(BNIP3)基因的mRNA表達(dá)量和蛋白含量呈逐漸上調(diào)趨勢;而腫瘤抑制蛋白...
【文章來源】:浙江海洋大學(xué)浙江省
【文章頁數(shù)】:59 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 引言
1.1 含氧量在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的重要性
1.1.1 過高、過低溶解氧對水產(chǎn)養(yǎng)殖魚類造成的影響
1.1.2 低氧的形成及對水生動物造成的影響
1.2 魚類應(yīng)對低氧脅迫的研究進(jìn)展
1.2.1 糖酵解相關(guān)酶在魚類耐低氧脅迫中的作用
1.2.2 HIF信號通路中關(guān)鍵基因在魚類耐低氧脅迫中的分子作用
1.2.3 凋亡通路中關(guān)鍵基因在魚類耐低氧脅迫中的分子作用
1.3 中草藥提取物對低氧誘導(dǎo)疾病的緩釋作用及重要性
1.3.1 葛根素在魚類耐低氧脅迫中的緩釋作用
1.3.2 姜黃素在魚類耐低氧脅迫中的緩釋作用
1.4 大彈涂魚應(yīng)對脅迫的研究進(jìn)展
1.5 本研究的目的與意義
第二章 急性低氧對大彈涂魚低氧應(yīng)答相關(guān)酶活性、基因表達(dá)及蛋白含量的影響
2.1 材料與方法
2.1.1 材料準(zhǔn)備
2.1.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
2.1.3 取樣
2.1.4 總RNA提取及cDNA合成
2.1.5 基因表達(dá)分析
2.1.6 蛋白含量和酶活性分析
2.1.7 統(tǒng)計(jì)分析
2.2 結(jié)果
2.2.1 急性低氧對大彈涂魚低氧應(yīng)答相關(guān)酶活性的影響
2.2.2 急性低氧對大彈涂魚低氧應(yīng)答相關(guān)基因表達(dá)的影響
2.2.3 急性低氧對大彈涂魚低氧應(yīng)答相關(guān)蛋白含量的影響
2.3 討論
第三章 低氧誘導(dǎo)大彈涂魚低氧生理應(yīng)激及葛根素的緩釋作用研究
3.1 材料與方法
3.1.1 材料準(zhǔn)備及實(shí)驗(yàn)分組
3.1.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
3.1.3 取樣
3.1.4 總RNA提取和cDNA合成
3.1.5 基因表達(dá)分析
3.1.6 磷酸化含量分析
3.1.7 統(tǒng)計(jì)分析
3.2 結(jié)果
3.2.1 低氧對大彈涂魚肝臟AKT和GSK-3β磷酸化含量變化的影響
3.2.2 低氧對大彈涂魚肝臟低氧基因變化及葛根素緩釋作用的影響
3.2.3 低氧對大彈涂魚鰓低氧基因變化及葛根素緩釋作用的影響
3.3 討論
3.3.1 低氧誘導(dǎo)大彈涂魚肝臟AKT、GSK-3β的磷酸化變化
3.3.2 葛根素在大彈涂魚肝組織耐低氧脅迫中的緩釋作用
3.3.3 葛根素在魚類鰓組織耐低氧脅迫中的緩釋作用
第四章 低氧誘導(dǎo)大彈涂魚低氧生理應(yīng)激及姜黃素的緩釋作用研究
4.1 材料與方法
4.1.1 材料準(zhǔn)備及實(shí)驗(yàn)分組
4.1.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
4.1.3 取樣
4.1.4 總RNA提取和cDNA合成
4.1.5 基因表達(dá)分析
4.1.6 統(tǒng)計(jì)分析
4.2 結(jié)果
4.2.1 低氧對大彈涂魚肝臟低氧基因變化及姜黃素緩釋作用的影響
4.2.2 低氧對大彈涂魚鰓低氧基因變化及姜黃素緩釋作用的影響
4.3 討論
4.3.1 姜黃素在大彈涂魚肝組織耐低氧脅迫中的緩釋作用
4.3.2 姜黃素在大彈涂魚鰓組織耐低氧脅迫中的緩釋作用
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
在讀期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文及研究成果
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]高溶氧對西伯利亞鱘幼魚非特異性免疫指標(biāo)的影響[J]. 王曉雯,朱華,馬國慶,HU Hong-xia. 四川農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2017(01)
[2]低溫脅迫對魚類PI3K/AKT/GSK-3β信號通路的影響[J]. 王金鳳,胡鵬,牛虹博,陳良標(biāo). 生物學(xué)雜志. 2016(06)
[3]姜黃素對草魚急性肝損傷的保護(hù)作用研究[J]. 喻運(yùn)珍,余少梅,熊文靜,張生元,徐志強(qiáng),鄭翠華,周汝珍. 湖北農(nóng)業(yè)科學(xué). 2016(06)
[4]紅景天對斑馬魚游泳和耐低氧能力的影響的初步研究[J]. 范能全,彭蘭,楊武,張璞,江靜子. 藥物分析雜志. 2015(08)
[5]葛根素對PI3K/AKT通路介導(dǎo)PASMCS凋亡的影響[J]. 張曉丹,楊艷南,王淑靜,朱大嶺,王力維,盛潔靜,宋莎莎. 中國中藥雜志. 2015(15)
[6]The hypoxia signaling pathway and hypoxic adaptation in fishes[J]. XIAO Wuhan. Science China(Life Sciences). 2015(02)
[7]鹽度和溶解氧對刺參非特異性免疫酶活性的影響[J]. 鄭慧,李彬,榮小軍,廖梅杰,陳貴平,張正,王嵐,王印庚,鄒安革. 漁業(yè)科學(xué)進(jìn)展. 2014(01)
[8]溫度和低氧對白鰱乳酸與糖水平的影響[J]. 何偉,曹振東,付世建. 重慶師范大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2013(05)
[9]葛根素對大鼠腦缺血再灌注側(cè)皮質(zhì)區(qū)細(xì)胞凋亡及p-Akt (Ser473)表達(dá)的影響[J]. 韓江全,于奎營,何敏,李向榮,胡泳濤,林冬融,盧俊江. 中國中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2012(08)
[10]大彈涂魚(Boleophthalmus pectinirostris)窒息點(diǎn)及晝夜代謝規(guī)律[J]. 曹伏君,郭良珍. 海洋與湖沼. 2011(06)
博士論文
[1]Curcumin治療膠質(zhì)母細(xì)胞瘤分子機(jī)制研究[D]. 吳炳山.南方醫(yī)科大學(xué) 2013
碩士論文
[1];撬釋θ毖/復(fù)氧損傷斑馬魚幼魚腦組織GRP78、GADD34表達(dá)的影響[D]. 黃玉莎.南方醫(yī)科大學(xué) 2016
[2]葛根素對PI3K/AKT通路介導(dǎo)PASMCS凋亡的影響[D]. 楊艷南.哈爾濱商業(yè)大學(xué) 2015
[3]急、慢性缺氧對斑馬魚幼魚神經(jīng)系統(tǒng)損傷機(jī)制的初步研究[D]. 趙丹.南方醫(yī)科大學(xué) 2014
[4]姜黃素誘導(dǎo)MDA-MB-468乳腺癌細(xì)胞凋亡中Akt-FoxO1通路的初步研究[D]. 張莉.華東師范大學(xué) 2012
[5]限制溶解氧供應(yīng)對褐牙鲆幼魚生長的影響及其機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究[D]. 李潔.中國海洋大學(xué) 2011
[6]齊墩果酸預(yù)處理對大鼠肝臟缺血再灌注損傷中PI3K-AKT-GSK-3β信號傳導(dǎo)通路的影響[D]. 華福洲.南京醫(yī)科大學(xué) 2010
本文編號:3251949
【文章來源】:浙江海洋大學(xué)浙江省
【文章頁數(shù)】:59 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 引言
1.1 含氧量在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的重要性
1.1.1 過高、過低溶解氧對水產(chǎn)養(yǎng)殖魚類造成的影響
1.1.2 低氧的形成及對水生動物造成的影響
1.2 魚類應(yīng)對低氧脅迫的研究進(jìn)展
1.2.1 糖酵解相關(guān)酶在魚類耐低氧脅迫中的作用
1.2.2 HIF信號通路中關(guān)鍵基因在魚類耐低氧脅迫中的分子作用
1.2.3 凋亡通路中關(guān)鍵基因在魚類耐低氧脅迫中的分子作用
1.3 中草藥提取物對低氧誘導(dǎo)疾病的緩釋作用及重要性
1.3.1 葛根素在魚類耐低氧脅迫中的緩釋作用
1.3.2 姜黃素在魚類耐低氧脅迫中的緩釋作用
1.4 大彈涂魚應(yīng)對脅迫的研究進(jìn)展
1.5 本研究的目的與意義
第二章 急性低氧對大彈涂魚低氧應(yīng)答相關(guān)酶活性、基因表達(dá)及蛋白含量的影響
2.1 材料與方法
2.1.1 材料準(zhǔn)備
2.1.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
2.1.3 取樣
2.1.4 總RNA提取及cDNA合成
2.1.5 基因表達(dá)分析
2.1.6 蛋白含量和酶活性分析
2.1.7 統(tǒng)計(jì)分析
2.2 結(jié)果
2.2.1 急性低氧對大彈涂魚低氧應(yīng)答相關(guān)酶活性的影響
2.2.2 急性低氧對大彈涂魚低氧應(yīng)答相關(guān)基因表達(dá)的影響
2.2.3 急性低氧對大彈涂魚低氧應(yīng)答相關(guān)蛋白含量的影響
2.3 討論
第三章 低氧誘導(dǎo)大彈涂魚低氧生理應(yīng)激及葛根素的緩釋作用研究
3.1 材料與方法
3.1.1 材料準(zhǔn)備及實(shí)驗(yàn)分組
3.1.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
3.1.3 取樣
3.1.4 總RNA提取和cDNA合成
3.1.5 基因表達(dá)分析
3.1.6 磷酸化含量分析
3.1.7 統(tǒng)計(jì)分析
3.2 結(jié)果
3.2.1 低氧對大彈涂魚肝臟AKT和GSK-3β磷酸化含量變化的影響
3.2.2 低氧對大彈涂魚肝臟低氧基因變化及葛根素緩釋作用的影響
3.2.3 低氧對大彈涂魚鰓低氧基因變化及葛根素緩釋作用的影響
3.3 討論
3.3.1 低氧誘導(dǎo)大彈涂魚肝臟AKT、GSK-3β的磷酸化變化
3.3.2 葛根素在大彈涂魚肝組織耐低氧脅迫中的緩釋作用
3.3.3 葛根素在魚類鰓組織耐低氧脅迫中的緩釋作用
第四章 低氧誘導(dǎo)大彈涂魚低氧生理應(yīng)激及姜黃素的緩釋作用研究
4.1 材料與方法
4.1.1 材料準(zhǔn)備及實(shí)驗(yàn)分組
4.1.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
4.1.3 取樣
4.1.4 總RNA提取和cDNA合成
4.1.5 基因表達(dá)分析
4.1.6 統(tǒng)計(jì)分析
4.2 結(jié)果
4.2.1 低氧對大彈涂魚肝臟低氧基因變化及姜黃素緩釋作用的影響
4.2.2 低氧對大彈涂魚鰓低氧基因變化及姜黃素緩釋作用的影響
4.3 討論
4.3.1 姜黃素在大彈涂魚肝組織耐低氧脅迫中的緩釋作用
4.3.2 姜黃素在大彈涂魚鰓組織耐低氧脅迫中的緩釋作用
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
在讀期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文及研究成果
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]高溶氧對西伯利亞鱘幼魚非特異性免疫指標(biāo)的影響[J]. 王曉雯,朱華,馬國慶,HU Hong-xia. 四川農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2017(01)
[2]低溫脅迫對魚類PI3K/AKT/GSK-3β信號通路的影響[J]. 王金鳳,胡鵬,牛虹博,陳良標(biāo). 生物學(xué)雜志. 2016(06)
[3]姜黃素對草魚急性肝損傷的保護(hù)作用研究[J]. 喻運(yùn)珍,余少梅,熊文靜,張生元,徐志強(qiáng),鄭翠華,周汝珍. 湖北農(nóng)業(yè)科學(xué). 2016(06)
[4]紅景天對斑馬魚游泳和耐低氧能力的影響的初步研究[J]. 范能全,彭蘭,楊武,張璞,江靜子. 藥物分析雜志. 2015(08)
[5]葛根素對PI3K/AKT通路介導(dǎo)PASMCS凋亡的影響[J]. 張曉丹,楊艷南,王淑靜,朱大嶺,王力維,盛潔靜,宋莎莎. 中國中藥雜志. 2015(15)
[6]The hypoxia signaling pathway and hypoxic adaptation in fishes[J]. XIAO Wuhan. Science China(Life Sciences). 2015(02)
[7]鹽度和溶解氧對刺參非特異性免疫酶活性的影響[J]. 鄭慧,李彬,榮小軍,廖梅杰,陳貴平,張正,王嵐,王印庚,鄒安革. 漁業(yè)科學(xué)進(jìn)展. 2014(01)
[8]溫度和低氧對白鰱乳酸與糖水平的影響[J]. 何偉,曹振東,付世建. 重慶師范大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2013(05)
[9]葛根素對大鼠腦缺血再灌注側(cè)皮質(zhì)區(qū)細(xì)胞凋亡及p-Akt (Ser473)表達(dá)的影響[J]. 韓江全,于奎營,何敏,李向榮,胡泳濤,林冬融,盧俊江. 中國中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2012(08)
[10]大彈涂魚(Boleophthalmus pectinirostris)窒息點(diǎn)及晝夜代謝規(guī)律[J]. 曹伏君,郭良珍. 海洋與湖沼. 2011(06)
博士論文
[1]Curcumin治療膠質(zhì)母細(xì)胞瘤分子機(jī)制研究[D]. 吳炳山.南方醫(yī)科大學(xué) 2013
碩士論文
[1];撬釋θ毖/復(fù)氧損傷斑馬魚幼魚腦組織GRP78、GADD34表達(dá)的影響[D]. 黃玉莎.南方醫(yī)科大學(xué) 2016
[2]葛根素對PI3K/AKT通路介導(dǎo)PASMCS凋亡的影響[D]. 楊艷南.哈爾濱商業(yè)大學(xué) 2015
[3]急、慢性缺氧對斑馬魚幼魚神經(jīng)系統(tǒng)損傷機(jī)制的初步研究[D]. 趙丹.南方醫(yī)科大學(xué) 2014
[4]姜黃素誘導(dǎo)MDA-MB-468乳腺癌細(xì)胞凋亡中Akt-FoxO1通路的初步研究[D]. 張莉.華東師范大學(xué) 2012
[5]限制溶解氧供應(yīng)對褐牙鲆幼魚生長的影響及其機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究[D]. 李潔.中國海洋大學(xué) 2011
[6]齊墩果酸預(yù)處理對大鼠肝臟缺血再灌注損傷中PI3K-AKT-GSK-3β信號傳導(dǎo)通路的影響[D]. 華福洲.南京醫(yī)科大學(xué) 2010
本文編號:3251949
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