生物防治與藥物防治相比,具有很大的優(yōu)越性。篩選對副溶血弧菌具有高效的抑菌菌株具有實際生產(chǎn)意義。本試驗從生病的南美白對蝦上篩選出一株副溶血弧菌Vp1,利用其篩選出7株具有較強抑菌效果的芽孢桿菌A、B、C、D、E、F、G,其中B、C、D、E、F、G為地衣芽孢桿菌,A為解淀粉芽孢桿菌。進行安全試驗表明:G菌的抑菌效果較好,A、C菌具有溶血現(xiàn)象,B、D、E、F等的抑菌圈都較小。后續(xù)實驗采用G菌進行了生物學特性及對感染副溶血弧菌的斑馬魚的保護效果實驗,結果表明:G菌在32℃,pH為5,鹽度0.5%時,生長最佳。人工腹腔急性毒性注射感染斑馬魚4x108CFU/mL,12h全部死亡,可作為后續(xù)保護實驗中病原菌的濃度。菌株G對斑馬魚96 h-LC50大于2330 mg/L。Vp1（2.046x108CFU/mL）與G菌（1.5375x108CFU/mL）混合,起到50%的保護效果。因此,實驗結果表明成功篩選的G菌對副溶血弧菌Vp1具有較好的防治效果,為開發(fā)新的生物制劑提供一些理論依據(jù)。 

【文章來源】：南京農(nóng)業(yè)大學江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：46 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－２魚體表感染副溶血弧菌的臨床癥狀（Ａ為對照魚，Ｂ為感染魚）??

，，，養(yǎng)殖用水將１丄５受試液分為２－６組，終濃度分別為：化２３３、２．３３、２３３０ｍｇ／Ｌ?（５．６ｘｌ〇ｉＧｃＦＵ／ｍＬ），第１組為陰性對照：無菌生理鹽水，性對照組，副溶血弧菌Ｖｐｌ菌株，終濃度２３．３ｍｇ／Ｌ（３．５ｘｌ〇９ＣＦＵ／ｍＬ魚浸泡在１－６組菌液中，觀察１?ｈ、２?ｈ、４?ｈ、８?ｈ、１６?ｈ、２４?ｈ、４８?ｈ、７２體異常及死亡數(shù)目，根據(jù)謝鳳君等Ｐｓｉ及《新化學物質(zhì)評估導則》ｐｅｌ準評定菌株Ｔ－１對斑馬魚的毒性分級。??抗菌株對幾株致病弧菌的括抗效果??用點種法，同２．２，對哈維氏弧菌，副溶血弧菌Ｋ，溶藻弧菌的掉抗效驗結果??抗菌株茹選結果??篩選得到屯株具有枯抗副溶血弧菌Ｖｐｌ的菌株，分別命名為Ａ、Ｂ、ＣＦ、Ｇ，其中經(jīng)溶血性檢測發(fā)現(xiàn)Ａ、Ｃ具有溶血性。初篩實驗結果圖３－

然后３７°Ｃ倒置培養(yǎng)２４ｈ，再將Ｖｐｌ?（Ｏ．ｌｍＬ）與營養(yǎng)瓊脂液態(tài)（ｌＯｍＬ，５０’Ｃ）??混合均勻，倒入涂有Ｇ菌的平板上，３７’Ｃ倒置培養(yǎng)２４ｈ。發(fā)現(xiàn)枯抗效果更明顯。??具體結果見圖３－３。??口闕??圖３－３?Ｇ菌對幾株弧菌的括抗效果??Ｆｉｇ．?３－３?Ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｉｃ?ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?Ｇ?ｏｎ?ｓｅｖｅｒａｌ?ｓｔｒａｉｎｓ?ｏｆ?Ｖｉｂｒｉｏ??３．５?Ｇ菌對斑馬魚的急性毒性試驗??試驗結果見表３－２，顯７Ｋ斑馬魚浸泡在濃度為０?ｍｇ／Ｌ、０．２３３?ｍｇ／Ｌ、２．巧ｍｇ／Ｌ、??２３．３ｍｇ／Ｌ、２３３ｍｇ／Ｌ、２３３０ｍｇ／Ｌ的受試菌液中生長良化未出現(xiàn)死亡、行動遲??緩等癥狀，說明菌株Ｇ對斑馬魚９６ｈ－ＬＣ５０大于２３３０ｍｇ／Ｌ；根據(jù)《ＧＢ／Ｔ１３２６７－??９１水質(zhì)物質(zhì)對淡水魚（斑馬魚）急性毒性測定方法》標準評定菌株Ｇ對斑馬魚??無毒，而浸泡Ｖｐｌ的陽性對照組，平均死亡率在１００％，說明該斑馬魚對該致病??菌非常敏感??１４??

【參考文獻】：
期刊論文
[1]海產(chǎn)品中副溶血弧菌檢測方法研究進展[J]. 紀懿芳,胡文忠,姜愛麗,馮可,董妍.  食品工業(yè)科技. 2015(05)
[2]石斑魚及暫養(yǎng)環(huán)境中副溶血弧菌分離鑒定與毒力評價[J]. 高磊,鄧益琴,劉助紅,龍云映,陳償.  海洋與湖沼. 2014(06)
[3]枯草芽孢桿菌K-6-9發(fā)酵條件優(yōu)化及放大[J]. 陳莉,汪立平,趙勇,陳樂,鄧添.  食品工業(yè)科技. 2014(03)
[4]地衣芽孢桿菌及其在水產(chǎn)養(yǎng)殖生產(chǎn)中的應用[J]. 郭荷梅.  北京農(nóng)業(yè). 2012(21)
[5]6株芽孢桿菌的生物學特性比較研究[J]. 李雅麗,秦艷,周緒霞,李衛(wèi)芬.  中國畜牧獸醫(yī). 2011(04)
[6]枯草芽孢桿菌生物學特性的研究[J]. 楊鋒,章亭洲.  飼料研究. 2011(03)
[7]來自大黃魚（Pseudosciaena crocea）腸道的弧菌拮抗菌的篩選與鑒定[J]. 王娟,封永輝,蔡立勝,王建,曲憲成,張慶華.  海洋與湖沼. 2010(05)
[8]副溶血弧菌檢測方法的研究進展[J]. 王國玲,欒玉明,劉達雄,陸家海.  中國衛(wèi)生檢驗雜志. 2010(06)
[9]副溶血弧菌的快速鑒定檢測方法研究進展[J]. 楊芳,李秀娟,徐保紅.  河北醫(yī)藥. 2010(07)
[10]高效固氮芽孢桿菌篩選及其生物學特性[J]. 孫建光,張燕春,徐晶,胡海燕.  中國農(nóng)業(yè)科學. 2009(06)

碩士論文
[1]副溶血弧菌感染斑馬魚的致病性及天然免疫應答研究[D]. 張永華.上海海洋大學 2012
[2]雞源益生菌BL-Y-1菌株分離鑒定、發(fā)酵條件及其耐受性研究[D]. 王煥.河北農(nóng)業(yè)大學 2009
[3]大黃魚兩株病原弧菌拮抗菌的研究[D]. 郭國軍.集美大學 2007
[4]地衣芽孢桿菌TS-01培養(yǎng)條件的研究[D]. 谷春濤.中國農(nóng)業(yè)大學 2004



本文編號：3229478