病害問題已經(jīng)嚴(yán)重制約了大黃魚（Larimichthys crocea）養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。大黃魚病原復(fù)雜多變,因此深入了解其免疫識(shí)別及激活機(jī)制,對(duì)于大黃魚病害防控、促進(jìn)養(yǎng)殖業(yè)健康發(fā)展具有重要意義。本研究利用RT-PCR及RACE-PCR技術(shù)克隆了大黃魚Toll樣受體（TLR）家族中的TLR1、TLR2與TLR21,核因子NF-κB家族中的p65、p52、c-rel與IκB,以及白細(xì)胞介素家族的IL-11與IL-21基因的全長(zhǎng)cDNA序列,分析了它們的分子結(jié)構(gòu);利用定量PCR技術(shù)或半定量PCR技術(shù),研究了它們?cè)诖簏S魚不同組織的表達(dá)譜,解析了病原或病原相關(guān)分子模式（PAMPs）刺激后,大黃魚脾臟、肝臟、頭腎以及LCK細(xì)胞系中上述基因的轉(zhuǎn)錄表達(dá)變化;重組表達(dá)了TLR途徑中關(guān)鍵接頭分子MyD88,并采用GST-pulldown技術(shù)研究了與MyD88相互作用的蛋白;獲得了IL-1β、IL-21的原核重組表達(dá)產(chǎn)物。結(jié)果如下:（1）TLR家族部分基因TLR1全長(zhǎng)3216 bp,5’UTR為39 bp,3’UTR為768 bp,ORF為2409 bp,編碼802個(gè)氨基酸,包含LRR、跨膜區(qū)和TIR結(jié)構(gòu)域。T... 

【文章來源】：集美大學(xué)福建省

【文章頁數(shù)】：129 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

大黃魚外部性特征

未對(duì)NF-κB下游基因的表達(dá)進(jìn)行分析。以上說明魚類中NF-κB信號(hào)通路可能存在其特有的調(diào)控方式。圖1.2 推測(cè)的魚類TLR信號(hào)通路，灰色底紋表示負(fù)調(diào)控因子1.2.3.5 炎癥反應(yīng)與干擾素反應(yīng)哺乳動(dòng)物的研究中，病原菌及病毒等病原刺激物激活TLR信號(hào)途徑后，通過NF-κB、IRF3、IRF7等信號(hào)途徑實(shí)現(xiàn)對(duì)干擾素和白介素等細(xì)胞因子的轉(zhuǎn)錄和表達(dá)，最終引發(fā)機(jī)體對(duì)入侵病原的免疫反應(yīng)，這其中包括IL-1、IL-2、IL-6、IL-12等前炎癥細(xì)胞因子的表達(dá)和分泌，促進(jìn)機(jī)體合成和分泌大量急性期蛋白，促進(jìn)B細(xì)胞的分化并加強(qiáng)免疫活性等；I 型IFN

0×Taq buffer 2μL，dNTP( 倍的 cDNA）1μL，Taq 酶 3 min；93℃ 30 s，56℃in。反應(yīng)完成后將 PCR 產(chǎn)R2 全長(zhǎng) cDNA 克隆與、腎臟總 RNA 進(jìn)行 1.5%S 與 18S rRNA 兩條帶清晰

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]香魚（Plecoglossus altivelis）NFκB抑制因子α基因PaIκBα克隆及表達(dá)[J]. 張文青,龔一富,章麗,李軍,劉曉丹.  動(dòng)物學(xué)研究. 2013(04)
[2]大黃魚地理種群劃分的探討[J]. 張其永,洪萬樹,楊圣云,劉敏.  現(xiàn)代漁業(yè)信息. 2011(02)
[3]網(wǎng)箱養(yǎng)殖大黃魚與天然大黃魚營(yíng)養(yǎng)成分的比較分析[J]. 段青源,鐘惠英,斯列鋼,麥康森.  浙江海洋學(xué)院學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2000(02)



本文編號(hào)：3229396