米爾伊麗莎白菌（Elizabethkingia miricola）是一種臨床新興的條件致病菌,可造成新生兒和免疫缺陷人群菌血癥、尿路感染等,近年來,被報道可引起蛙類歪頭、白內(nèi)障及內(nèi)臟出血等癥狀,導(dǎo)致蛙出現(xiàn)暴發(fā)性死亡。米爾伊麗莎白菌感染對我國蛙類養(yǎng)殖業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟損失。同時,該菌也可作為一種潛在的人畜共患菌,對人類健康具有潛在威脅。因此,建立一種準(zhǔn)確、快速的米爾伊麗莎白菌檢測方法對米爾伊麗莎白菌感染引發(fā)病害的診斷及防控措施的建立均具有重要意義。本研究以米爾伊麗莎白菌為研究對象,建立雙重PCR和熒光定量PCR檢測方法,以期為米爾伊麗莎白菌感染的早期檢測及流行病學(xué)調(diào)查提供技術(shù)支持。1.米爾伊麗莎白菌雙重PCR檢測方法的建立:分別以伊麗莎白菌的PNGase F基因、米爾伊麗莎白菌的ure G基因為分子靶標(biāo),設(shè)計兩對擴增片段長度為1192 bp與246 bp的特異性引物,優(yōu)化反應(yīng)條件,并對其特異性、靈敏性進(jìn)行評價。結(jié)果顯示:該雙重PCR檢測方法具有良好的特異性和靈敏性。PNGase F基因引物僅對伊麗莎白菌屬內(nèi)物種出現(xiàn)了特異性擴增,而ure G基因引物僅能對米爾伊麗莎白菌進(jìn)行特異性擴增;能檢... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

伊麗莎白菌PNGaseF序列比對（局部）

圖2.2雙重PCR退火溫度優(yōu)化

圖2.3雙重PCR退火時間優(yōu)化

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
[1]黑斑蛙白內(nèi)障病原菌的分離鑒定及體外抑菌作用研究[D]. 吳興鎮(zhèn).西南大學(xué) 2016



本文編號：3208448