米爾伊麗莎白菌（Elizabethkingia miricola）是一種臨床新興的條件致病菌,可造成新生兒和免疫缺陷人群菌血癥、尿路感染等,近年來,被報道可引起蛙類歪頭、白內障及內臟出血等癥狀,導致蛙出現暴發(fā)性死亡。米爾伊麗莎白菌感染對我國蛙類養(yǎng)殖業(yè)造成了巨大的經濟損失。同時,該菌也可作為一種潛在的人畜共患菌,對人類健康具有潛在威脅。因此,建立一種準確、快速的米爾伊麗莎白菌檢測方法對米爾伊麗莎白菌感染引發(fā)病害的診斷及防控措施的建立均具有重要意義。本研究以米爾伊麗莎白菌為研究對象,建立雙重PCR和熒光定量PCR檢測方法,以期為米爾伊麗莎白菌感染的早期檢測及流行病學調查提供技術支持。1.米爾伊麗莎白菌雙重PCR檢測方法的建立:分別以伊麗莎白菌的PNGase F基因、米爾伊麗莎白菌的ure G基因為分子靶標,設計兩對擴增片段長度為1192 bp與246 bp的特異性引物,優(yōu)化反應條件,并對其特異性、靈敏性進行評價。結果顯示:該雙重PCR檢測方法具有良好的特異性和靈敏性。PNGase F基因引物僅對伊麗莎白菌屬內物種出現了特異性擴增,而ure G基因引物僅能對米爾伊麗莎白菌進行特異性擴增;能檢... 

【文章來源】：華中農業(yè)大學湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數】：68 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

伊麗莎白菌PNGaseF序列比對（局部）

圖2.2雙重PCR退火溫度優(yōu)化

圖2.3雙重PCR退火時間優(yōu)化

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
[1]黑斑蛙白內障病原菌的分離鑒定及體外抑菌作用研究[D]. 吳興鎮(zhèn).西南大學 2016



本文編號：3208448