為研究黑色素聚集激素（melanin-concentrating hormone,MCH）、促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素（corticotropin-releasing hormone, CRH）和促性腺激素釋放激素（gonadotropin releasing hormone,GnRH）基因在齊口裂腹魚攝食調(diào)控中發(fā)揮的作用,本試驗(yàn)首先利用RT-PCR和RACE技術(shù)首次克隆了齊口裂腹魚（Schizothorax prenanti）MCH、CRH和GnRH2的cDNA全序列；隨后運(yùn)用熒光定量PCR技術(shù)對MCH、CRH和GnRH2在不同組織的分布進(jìn)行了檢測；最后研究在不同攝食狀態(tài)下MCH、CRH和GnRH2 mRNA在下丘腦表達(dá)的影響變化。研究結(jié)果表明：齊口裂腹魚MCH cDNA全長序列為589bp,其中5’非編碼區(qū)（5’-UTR）66bp,3’非編碼區(qū)（3’-UTR）148 bp,開放閱讀框（ORF）375bp,編碼124個(gè)氨基酸包括N末端24個(gè)氨基酸的信號肽、C末端17個(gè)氨基酸的成熟肽和13個(gè)氨基酸的神經(jīng)肽Mgrp,與金魚（Carassius auratus）的MCH的序列同源性最高,相似... 

【文章來源】：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)四川省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略詞表
前言
一、文獻(xiàn)綜述
    1. MCH、CRH和GNRH2的結(jié)構(gòu)
        1.1 MCH的結(jié)構(gòu)
        1.2 CRH的結(jié)構(gòu)
        1.3 GnRH2的結(jié)構(gòu)
    2. MCH、CRH和GNRH2的分布
        2.1 MCH的分布
        2.2 CRH的分布
        2.3 GnRH2的分布
    3. MCH、CRH和GNRH2的生物學(xué)功能
        3.1 MCH的生物學(xué)功能
        3.2 CRH的生物學(xué)功能
        3.3 GnRH2的生物學(xué)功能
    4 本論文研究的目的和意義
二、齊口裂腹魚MCH、CRH和GNRH2基因的克隆
    1 材料
        1.1 動(dòng)物材料
        1.2 試劑
        1.3 主要儀器設(shè)備
    2 方法
        2.1 總RNA的抽提
        2.2 RACE擴(kuò)增
        2.3 目的片段的分離和回收
        2.4 連接和轉(zhuǎn)化
        2.5 菌落PCR及測序
        2.6 基因序列分析
    3 結(jié)果
        3.1 MCH基因的克隆和序列分析
        3.2 CRH基因的克隆和序列分析
        3.3 GnRH2基因的克隆和序列分析
    4 分析與討論
        4.1 MCH基因的系統(tǒng)分析
        4.2 CRH基因的系統(tǒng)分析
        4.3 GnRH2基因的系統(tǒng)分析
三 齊口裂腹魚MCH、CRH和GNRH2基因的分布
    1 動(dòng)物材料
    2 方法
        2.1 引物設(shè)計(jì)與檢測
        2.2 實(shí)時(shí)熒光定量
        2.3 數(shù)據(jù)分析
    3 結(jié)果
    4 分析與討論
        4.1 MCH在不同組織的表達(dá)
        4.2 CRH在不同組織的表達(dá)
        4.3 GnRH2在不同組織的表達(dá)
四 不同攝食水平對MCH、CRH和GNRH2表達(dá)水平的影響
    1 動(dòng)物材料
    2 方法
        2.1 餐前餐后對MCH、CRH和GnRH2表達(dá)水平的影響
        2.2 長期禁食對MCH、CRH和GnRH2表達(dá)水平的影響
    3 結(jié)果
        3.1 禁食對MCH表達(dá)的影響
        3.2 禁食對CRH表達(dá)的影響
        3.3 禁食對GnRH2表達(dá)的影響
    4 分析與討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
附錄
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄



本文編號：3205905