鯉嗜水氣單胞菌弱毒株篩選及免疫原性評價
發(fā)布時間:2021-05-11 07:43
嗜水氣單胞菌(Aeromonas hydrophila)是一種革蘭氏陰性細菌,可以引起鯉(Cyprinus carpio)、鯽(Carassius aumtus)等多種淡水養(yǎng)殖魚類細菌性敗血癥的爆發(fā),對漁業(yè)生產(chǎn)造成嚴重的經(jīng)濟損失。目前,我國主要使用化學(xué)藥物對魚病進行防控,大量化學(xué)藥物的使用會導(dǎo)致藥物殘留,破壞生態(tài)環(huán)境,并且為超級細菌的產(chǎn)生創(chuàng)造條件,所以使用疫苗對魚病進行免疫防控是未來的發(fā)展趨勢。然而我國尚未普及以疫苗為主的魚病防控方法。原因主要有兩方面:首先由于現(xiàn)階段研制的魚用疫苗免疫效果不穩(wěn)定;另一方面疫苗導(dǎo)入方法不夠高效,難以滿足生產(chǎn)需求。所以,研發(fā)高效穩(wěn)定,操作簡便的魚用疫苗是現(xiàn)階段魚類疾病防控研究的重點。本論文針對由嗜水氣單胞菌引起的傳染性疾病,開展了鯉嗜水氣單胞菌弱毒疫苗的研制及不同導(dǎo)入途徑的疫苗免疫效果評價。旨在找到一種可廣泛應(yīng)用于水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè),高效穩(wěn)定、操作簡便的嗜水氣單胞菌弱毒疫苗,預(yù)防由嗜水氣單胞菌引起的細菌性敗血癥,并為魚用疫苗免疫效果評價標準的建立提供參考。本論文主要內(nèi)容如下:1.利福平篩選嗜水氣單胞菌弱毒菌株以采自新鄉(xiāng)本地的高致病性鯉嗜水氣單胞菌菌株XX1為研究對...
【文章來源】:河南師范大學(xué)河南省
【文章頁數(shù)】:59 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻綜述
1.1 嗜水氣單胞菌疫苗的研究現(xiàn)狀
1.1.1 新型疫苗
1.1.2 滅活疫苗
1.1.3 弱毒疫苗
1.2 疫苗導(dǎo)入方法的研究進展
1.2.1 注射免疫
1.2.2 浸泡免疫
1.2.3 口服免疫
1.3 疫苗免疫效果評價的研究進展
1.3.1 非特異性免疫評價指標
1.3.2 特異性免疫評價指標
1.3.3 相對免疫保護率(RPS)
1.4 本論文研究目的與意義及技術(shù)路線
第二章 采用利福平篩選鯉嗜水氣單胞菌弱毒株
2.1 材料與方法
2.1.1 實驗材料
2.1.2 實驗方法
2.2 實驗結(jié)果
2.2.1 菌液濃度與吸光度值的標準方程
2.2.2 菌株XX1LA的鑒定和菌落形態(tài)
2.2.3 弱毒菌株XX1LA的毒力和穩(wěn)定性
2.3 討論
第三章 嗜水氣單胞菌弱毒疫苗XX1LA免疫效果評價
3.1 材料與方法
3.1.1 實驗材料
3.1.2 實驗方法
3.2 實驗結(jié)果
3.2.1 滅活疫苗和XX1LA對鯉魚種的相對免疫保護率
3.2.2 疫苗免疫后對血清溶菌酶活性的影響
3.2.3 疫苗免疫后血清中特異性抗體效價的變化
3.2.4 疫苗免疫后鯉免疫相關(guān)基因表達量的變化
3.3 討論
第四章 不同導(dǎo)入方式對嗜水氣單胞菌弱毒疫苗XX1LA免疫效果的影響
4.1 材料與方法
4.1.1 實驗用鯉魚種
4.1.2 實驗魚的飼養(yǎng)管理
4.1.3 菌株及培養(yǎng)條件
4.1.4 主要實驗儀器和設(shè)備
4.1.5 魚種的免疫與攻毒實驗
4.1.6 相對免疫保護率測定
4.1.7 血清特異性抗體凝集效價測定(微量凝集反應(yīng))
4.1.8 血清溶菌酶活性的測定
4.1.9 統(tǒng)計分析
4.2 結(jié)果
4.2.1 血清溶菌酶活性
4.2.2 免疫后不同時間血清抗體凝集效價
4.2.3 攻毒后鯉魚種相對免疫保護率
4.3 討論
4.3.1 疫苗不同導(dǎo)入方法對血清溶菌酶活性的影響
4.3.2 疫苗不同導(dǎo)入方法對血清抗體凝集效價和免疫保護率的影響
第五章 研究成果與展望
參考文獻
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表論文
【參考文獻】:
期刊論文
[1]脂多糖與β葡聚糖對遲鈍愛德華氏菌亞單位疫苗的免疫促進效果研究[J]. 刁菁,葉海斌,于曉清,許拉,樊英,李天保,王淑君,王娟. 中國農(nóng)學(xué)通報. 2014(05)
[2]嗜水氣單胞菌滅活疫苗對虹鱒免疫力和抗病力的影響[J]. 孫金輝,王慶奎,陳成勛,白東清,喬秀亭. 淡水漁業(yè). 2013(01)
[3]兩種多糖作為遲緩愛德華氏菌(Edwardsiella tarda)滅活疫苗佐劑對大菱鲆(Scophthalmus maximus)的免疫保護效果[J]. 隋虎辰,謝國駟,邊慧慧,王秀華,張曉華,黃倢. 海洋與湖沼. 2012(05)
[4]嗜水氣單胞菌3種疫苗免疫的青魚外周血免疫指標的變化[J]. 張波,曾令兵,羅曉松,高正勇,周勇,安偉. 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2012(01)
[5]草魚的一種急性細菌性傳染病病原的分離鑒定及致病性研究[J]. 李楠,郭慧芝,焦冉,張書環(huán),劉志新,姚衛(wèi)建,聶品. 水生生物學(xué)報. 2011(06)
[6]3種美人魚發(fā)光桿菌疫苗對卵形鯧鲹的免疫效果[J]. 蘇友祿,馮娟,郭志勛,王瑞旋,徐力文,姜敬哲,王江勇. 華南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2011(03)
[7]草魚嗜水氣單胞菌候選疫苗[J]. 邱并生. 微生物學(xué)通報. 2011(03)
[8]幾種免疫增強劑對草魚SOD、CAT及AKP活性的影響[J]. 李赫,宋文華,于翔,富麗靜,姚福相,胡宗云,張濤. 水產(chǎn)學(xué)雜志. 2010(04)
[9]嗜水氣單胞菌滅活疫苗浸泡后鱖IgM基因表達量和抗體效價的變化[J]. 劉雨果,潘厚軍,陳償,石存斌,吳淑勤. 淡水漁業(yè). 2009(06)
[10]Synergistic actions of complement and lysozyme in clearance of Escherichia coli from amphioxus Branchiostoma belcheri[J]. Guangfeng Wang a,Shicui Zhang a,Zhimeng Zhuang b,Zhiping Wang a a Department of Marine Biology,Ocean University of China,Qingdao 266003,China b Yellow Sea Fisheries Research Institute,Qingdao 266071,China. Progress in Natural Science. 2009(02)
碩士論文
[1]草魚呼腸孤病毒微載體培養(yǎng)技術(shù)與滅活疫苗浸泡免疫效果研究[D]. 劉秋鳳.上海海洋大學(xué) 2013
本文編號:3181024
【文章來源】:河南師范大學(xué)河南省
【文章頁數(shù)】:59 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻綜述
1.1 嗜水氣單胞菌疫苗的研究現(xiàn)狀
1.1.1 新型疫苗
1.1.2 滅活疫苗
1.1.3 弱毒疫苗
1.2 疫苗導(dǎo)入方法的研究進展
1.2.1 注射免疫
1.2.2 浸泡免疫
1.2.3 口服免疫
1.3 疫苗免疫效果評價的研究進展
1.3.1 非特異性免疫評價指標
1.3.2 特異性免疫評價指標
1.3.3 相對免疫保護率(RPS)
1.4 本論文研究目的與意義及技術(shù)路線
第二章 采用利福平篩選鯉嗜水氣單胞菌弱毒株
2.1 材料與方法
2.1.1 實驗材料
2.1.2 實驗方法
2.2 實驗結(jié)果
2.2.1 菌液濃度與吸光度值的標準方程
2.2.2 菌株XX1LA的鑒定和菌落形態(tài)
2.2.3 弱毒菌株XX1LA的毒力和穩(wěn)定性
2.3 討論
第三章 嗜水氣單胞菌弱毒疫苗XX1LA免疫效果評價
3.1 材料與方法
3.1.1 實驗材料
3.1.2 實驗方法
3.2 實驗結(jié)果
3.2.1 滅活疫苗和XX1LA對鯉魚種的相對免疫保護率
3.2.2 疫苗免疫后對血清溶菌酶活性的影響
3.2.3 疫苗免疫后血清中特異性抗體效價的變化
3.2.4 疫苗免疫后鯉免疫相關(guān)基因表達量的變化
3.3 討論
第四章 不同導(dǎo)入方式對嗜水氣單胞菌弱毒疫苗XX1LA免疫效果的影響
4.1 材料與方法
4.1.1 實驗用鯉魚種
4.1.2 實驗魚的飼養(yǎng)管理
4.1.3 菌株及培養(yǎng)條件
4.1.4 主要實驗儀器和設(shè)備
4.1.5 魚種的免疫與攻毒實驗
4.1.6 相對免疫保護率測定
4.1.7 血清特異性抗體凝集效價測定(微量凝集反應(yīng))
4.1.8 血清溶菌酶活性的測定
4.1.9 統(tǒng)計分析
4.2 結(jié)果
4.2.1 血清溶菌酶活性
4.2.2 免疫后不同時間血清抗體凝集效價
4.2.3 攻毒后鯉魚種相對免疫保護率
4.3 討論
4.3.1 疫苗不同導(dǎo)入方法對血清溶菌酶活性的影響
4.3.2 疫苗不同導(dǎo)入方法對血清抗體凝集效價和免疫保護率的影響
第五章 研究成果與展望
參考文獻
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表論文
【參考文獻】:
期刊論文
[1]脂多糖與β葡聚糖對遲鈍愛德華氏菌亞單位疫苗的免疫促進效果研究[J]. 刁菁,葉海斌,于曉清,許拉,樊英,李天保,王淑君,王娟. 中國農(nóng)學(xué)通報. 2014(05)
[2]嗜水氣單胞菌滅活疫苗對虹鱒免疫力和抗病力的影響[J]. 孫金輝,王慶奎,陳成勛,白東清,喬秀亭. 淡水漁業(yè). 2013(01)
[3]兩種多糖作為遲緩愛德華氏菌(Edwardsiella tarda)滅活疫苗佐劑對大菱鲆(Scophthalmus maximus)的免疫保護效果[J]. 隋虎辰,謝國駟,邊慧慧,王秀華,張曉華,黃倢. 海洋與湖沼. 2012(05)
[4]嗜水氣單胞菌3種疫苗免疫的青魚外周血免疫指標的變化[J]. 張波,曾令兵,羅曉松,高正勇,周勇,安偉. 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2012(01)
[5]草魚的一種急性細菌性傳染病病原的分離鑒定及致病性研究[J]. 李楠,郭慧芝,焦冉,張書環(huán),劉志新,姚衛(wèi)建,聶品. 水生生物學(xué)報. 2011(06)
[6]3種美人魚發(fā)光桿菌疫苗對卵形鯧鲹的免疫效果[J]. 蘇友祿,馮娟,郭志勛,王瑞旋,徐力文,姜敬哲,王江勇. 華南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2011(03)
[7]草魚嗜水氣單胞菌候選疫苗[J]. 邱并生. 微生物學(xué)通報. 2011(03)
[8]幾種免疫增強劑對草魚SOD、CAT及AKP活性的影響[J]. 李赫,宋文華,于翔,富麗靜,姚福相,胡宗云,張濤. 水產(chǎn)學(xué)雜志. 2010(04)
[9]嗜水氣單胞菌滅活疫苗浸泡后鱖IgM基因表達量和抗體效價的變化[J]. 劉雨果,潘厚軍,陳償,石存斌,吳淑勤. 淡水漁業(yè). 2009(06)
[10]Synergistic actions of complement and lysozyme in clearance of Escherichia coli from amphioxus Branchiostoma belcheri[J]. Guangfeng Wang a,Shicui Zhang a,Zhimeng Zhuang b,Zhiping Wang a a Department of Marine Biology,Ocean University of China,Qingdao 266003,China b Yellow Sea Fisheries Research Institute,Qingdao 266071,China. Progress in Natural Science. 2009(02)
碩士論文
[1]草魚呼腸孤病毒微載體培養(yǎng)技術(shù)與滅活疫苗浸泡免疫效果研究[D]. 劉秋鳳.上海海洋大學(xué) 2013
本文編號:3181024
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