鯉魚肽聚糖識別蛋白2(PGRP2)天然免疫作用的初步研究
發(fā)布時間:2021-05-10 15:15
天然免疫是生物體內(nèi)一種與生俱來的免疫保護(hù)機(jī)制,能夠很好的保護(hù)生物體抵御外來病原的入侵以及啟動相關(guān)的免疫信號通路。天然免疫系統(tǒng)是通過一些在進(jìn)化中高度保守的模式識別受體(PRRs)來識別微生物。這些PRRs能夠識別外界病原微生物的一些特定組分也就是病原相關(guān)分子模式(PAMPs),從而激活相關(guān)的信號通路來啟動天然免疫反應(yīng),進(jìn)而有效的清除和消滅病菌。肽聚糖識別蛋白(PGRPs)是一類重要的天然免疫受體家族,廣泛分布于很多無脊椎動物和脊椎動物中的各個組織和器官中。天然免疫正是通過進(jìn)化上保守的PRRs識別PAMPs來激活相關(guān)通路,如PGRPs等可以識別病原微生物的入侵,PGRPs能夠結(jié)合并且在某些情況下水解細(xì)菌細(xì)胞壁的肽聚糖(PGN),因?yàn)殡木厶鞘菐缀跛屑?xì)菌細(xì)胞壁的組成成分,所以PGRPs對于生物體抵抗外來病原的入侵、啟動相關(guān)免疫應(yīng)答尤為重要。本實(shí)驗(yàn)經(jīng)PCR擴(kuò)增得到鯉魚PGRP2的ORF全長為1449 bp,分析了保守結(jié)構(gòu)域預(yù)測、信號肽預(yù)測、不同物種序列分析以及進(jìn)化分析。本實(shí)驗(yàn)以我國常見的淡水魚種—鯉魚為材料,通過提取經(jīng)嗜水氣單胞菌免疫刺激的鯉魚各個組織的RNA來探究PGRP2在mRNA水平上的...
【文章來源】:山東師范大學(xué)山東省
【文章頁數(shù)】:64 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 綜述
1 天然免疫和肽聚糖
2 肽聚糖識別蛋白
2.1 肽聚糖識別蛋白的發(fā)現(xiàn)和命名
2.2 肽聚糖識別蛋白的分類和結(jié)構(gòu)
2.3 肽聚糖識別蛋白的表達(dá)
2.4 肽聚糖識別蛋白的功能
2.5 本論文的研究意義
第二章 鯉魚PGRP2 基因結(jié)構(gòu)及序列分析
1 前言
2 實(shí)驗(yàn)方法
2.1 實(shí)驗(yàn)方法
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.1 鯉魚PGRP2 氨基酸序列保守結(jié)構(gòu)域
3.2 鯉魚PGRP2 信號肽預(yù)測
3.3 不同物種PGRP氨基酸序列比對
3.4 不同物種PGRP進(jìn)化樹分析
4 討論
第三章 鯉魚PGRP2 基因在發(fā)育階段和免疫刺激后的表達(dá)模式分析
1 前言
2 實(shí)驗(yàn)材料與方法
2.1 實(shí)驗(yàn)材料
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.1 正常鯉魚各組織PGRP2 基因表達(dá)的定量檢測
3.2 鯉魚不同發(fā)育階段的PGRP2 基因表達(dá)的定量檢測
3.3 注射嗜水氣單胞菌刺激后鯉魚PGRP2 基因表達(dá)的定量檢測
3.4 浸泡嗜水氣單胞菌刺激后鯉魚PGRP2 基因表達(dá)的定量檢測
4 討論
第四章 鯉魚PGRP2 基因的體外表達(dá)以及功能檢測
1 前言
2 實(shí)驗(yàn)材料與方法
2.1 實(shí)驗(yàn)材料
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.1 鯉魚PGRP2 ORF擴(kuò)增
3.2 鯉魚PGRP2 菌落PCR及測序鑒定
3.3 鯉魚PGRP2 原核表達(dá)載體構(gòu)建
3.4 鯉魚PGRP2 的表達(dá)及純化
3.5 重組PGRP2 體外活性及功能檢測
4 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
本文編號:3179585
【文章來源】:山東師范大學(xué)山東省
【文章頁數(shù)】:64 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 綜述
1 天然免疫和肽聚糖
2 肽聚糖識別蛋白
2.1 肽聚糖識別蛋白的發(fā)現(xiàn)和命名
2.2 肽聚糖識別蛋白的分類和結(jié)構(gòu)
2.3 肽聚糖識別蛋白的表達(dá)
2.4 肽聚糖識別蛋白的功能
2.5 本論文的研究意義
第二章 鯉魚PGRP2 基因結(jié)構(gòu)及序列分析
1 前言
2 實(shí)驗(yàn)方法
2.1 實(shí)驗(yàn)方法
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.1 鯉魚PGRP2 氨基酸序列保守結(jié)構(gòu)域
3.2 鯉魚PGRP2 信號肽預(yù)測
3.3 不同物種PGRP氨基酸序列比對
3.4 不同物種PGRP進(jìn)化樹分析
4 討論
第三章 鯉魚PGRP2 基因在發(fā)育階段和免疫刺激后的表達(dá)模式分析
1 前言
2 實(shí)驗(yàn)材料與方法
2.1 實(shí)驗(yàn)材料
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.1 正常鯉魚各組織PGRP2 基因表達(dá)的定量檢測
3.2 鯉魚不同發(fā)育階段的PGRP2 基因表達(dá)的定量檢測
3.3 注射嗜水氣單胞菌刺激后鯉魚PGRP2 基因表達(dá)的定量檢測
3.4 浸泡嗜水氣單胞菌刺激后鯉魚PGRP2 基因表達(dá)的定量檢測
4 討論
第四章 鯉魚PGRP2 基因的體外表達(dá)以及功能檢測
1 前言
2 實(shí)驗(yàn)材料與方法
2.1 實(shí)驗(yàn)材料
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.1 鯉魚PGRP2 ORF擴(kuò)增
3.2 鯉魚PGRP2 菌落PCR及測序鑒定
3.3 鯉魚PGRP2 原核表達(dá)載體構(gòu)建
3.4 鯉魚PGRP2 的表達(dá)及純化
3.5 重組PGRP2 體外活性及功能檢測
4 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
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本文編號:3179585
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