天然免疫是生物體內(nèi)一種與生俱來的免疫保護機制,能夠很好的保護生物體抵御外來病原的入侵以及啟動相關(guān)的免疫信號通路。天然免疫系統(tǒng)是通過一些在進化中高度保守的模式識別受體（PRRs）來識別微生物。這些PRRs能夠識別外界病原微生物的一些特定組分也就是病原相關(guān)分子模式（PAMPs）,從而激活相關(guān)的信號通路來啟動天然免疫反應,進而有效的清除和消滅病菌。肽聚糖識別蛋白（PGRPs）是一類重要的天然免疫受體家族,廣泛分布于很多無脊椎動物和脊椎動物中的各個組織和器官中。天然免疫正是通過進化上保守的PRRs識別PAMPs來激活相關(guān)通路,如PGRPs等可以識別病原微生物的入侵,PGRPs能夠結(jié)合并且在某些情況下水解細菌細胞壁的肽聚糖（PGN）,因為肽聚糖是幾乎所有細菌細胞壁的組成成分,所以PGRPs對于生物體抵抗外來病原的入侵、啟動相關(guān)免疫應答尤為重要。本實驗經(jīng)PCR擴增得到鯉魚PGRP2的ORF全長為1449 bp,分析了保守結(jié)構(gòu)域預測、信號肽預測、不同物種序列分析以及進化分析。本實驗以我國常見的淡水魚種—鯉魚為材料,通過提取經(jīng)嗜水氣單胞菌免疫刺激的鯉魚各個組織的RNA來探究PGRP2在mRNA水平上的... 

【文章來源】：山東師范大學山東省

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 綜述
    1 天然免疫和肽聚糖
    2 肽聚糖識別蛋白
        2.1 肽聚糖識別蛋白的發(fā)現(xiàn)和命名
        2.2 肽聚糖識別蛋白的分類和結(jié)構(gòu)
        2.3 肽聚糖識別蛋白的表達
        2.4 肽聚糖識別蛋白的功能
        2.5 本論文的研究意義
第二章 鯉魚PGRP2 基因結(jié)構(gòu)及序列分析
    1 前言
    2 實驗方法
        2.1 實驗方法
    3 實驗結(jié)果
        3.1 鯉魚PGRP2 氨基酸序列保守結(jié)構(gòu)域
        3.2 鯉魚PGRP2 信號肽預測
        3.3 不同物種PGRP氨基酸序列比對
        3.4 不同物種PGRP進化樹分析
    4 討論
第三章 鯉魚PGRP2 基因在發(fā)育階段和免疫刺激后的表達模式分析
    1 前言
    2 實驗材料與方法
        2.1 實驗材料
        2.2 實驗方法
    3 實驗結(jié)果
        3.1 正常鯉魚各組織PGRP2 基因表達的定量檢測
        3.2 鯉魚不同發(fā)育階段的PGRP2 基因表達的定量檢測
        3.3 注射嗜水氣單胞菌刺激后鯉魚PGRP2 基因表達的定量檢測
        3.4 浸泡嗜水氣單胞菌刺激后鯉魚PGRP2 基因表達的定量檢測
    4 討論
第四章 鯉魚PGRP2 基因的體外表達以及功能檢測
    1 前言
    2 實驗材料與方法
        2.1 實驗材料
        2.2 實驗方法
    3 實驗結(jié)果
        3.1 鯉魚PGRP2 ORF擴增
        3.2 鯉魚PGRP2 菌落PCR及測序鑒定
        3.3 鯉魚PGRP2 原核表達載體構(gòu)建
        3.4 鯉魚PGRP2 的表達及純化
        3.5 重組PGRP2 體外活性及功能檢測
    4 討論
結(jié)論
參考文獻
致謝



本文編號：3179585