脂肪組織是動物機體主要的儲能器官之一,主要作用是以甘油三酯的形式儲存機體內(nèi)過度的能量。脂肪組織主要由脂肪細胞組成,脂肪細胞是儲存甘油三酯的基本單位。二十二碳六烯酸（docosahexaenoic acid,DHA）屬于n-3系列長鏈多不飽和脂肪酸（n-3LC-PUFAs）的一種,在生長發(fā)育、免疫調(diào)節(jié)、脂質(zhì)代謝等過程中發(fā)揮重要作用。細胞凋亡是細胞的一種程序性死亡,涉及一系列酶及信號分子參與。有研究表明DHA能夠調(diào)控草魚脂質(zhì)蓄積,但是潛在的機制尚不清楚。本研究以草魚為研究對象,探討DHA對脂質(zhì)蓄積的作用、對脂肪細胞凋亡的影響及機制,以期為淡水魚類脂代謝提供一定的參考依據(jù)。獲得的主要結(jié)果如下:1、日糧中添加0.52%的DHA降低草魚腹腔脂肪脂質(zhì)蓄積。在日糧中分別添加0%（對照組）及0.52%（試驗組）的DHA,飼喂初始重為22.19±1.76 g的草魚稚魚3周、6周后,解剖得到草魚腹腔脂肪組織,氣相色譜法檢測脂肪酸相對含量,蘇木精-伊紅染色觀察脂肪細胞形態(tài)變化,甘油三酯試劑盒檢測脂肪組織甘油三酯含量,RT-PCR檢測脂代謝相關(guān)基因mRNA水平,western blot檢測脂代謝相關(guān)蛋白表達水... 

【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 文獻綜述
    1.1 二十二碳六烯酸（DHA）
        1.1.1 DHA的化學結(jié)構(gòu)
        1.1.2 DHA的來源
        1.1.3 DHA的體內(nèi)合成
    1.2 脂肪組織與脂質(zhì)蓄積
        1.2.1 脂肪組織
        1.2.2 脂肪細胞
        1.2.3 脂質(zhì)代謝
        1.2.4 DHA對脂質(zhì)蓄積調(diào)控的研究進展
    1.3 細胞凋亡
        1.3.1 細胞凋亡的生物化學特征
        1.3.2 細胞凋亡的途徑
        1.3.3 脂肪細胞凋亡及特性
    1.4 草魚
    1.5 本研究的目的與意義
第二章 DHA影響草魚脂肪細胞凋亡的在體研究
    2.1 材料與方法
        2.1.1 試驗草魚
        2.1.2 試驗飼料
        2.1.3 飼養(yǎng)及采樣
        2.1.4 脂肪酸組成分析
        2.1.5 蘇木精-伊紅（HE）染色
        2.1.6 甘油三酯含量檢測
        2.1.7 實時定量PCR分析
        2.1.8 蛋白免疫印跡檢測
        2.1.9 統(tǒng)計分析
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 日糧中添加DHA對草魚生長及生物學性狀的影響
        2.2.2 日糧中添加DHA對草魚腹腔脂肪組織脂肪酸含量的影響
        2.2.3 日糧中添加DHA對草魚脂肪細胞大小的影響
        2.2.4 日糧中添加DHA對草魚脂肪組織甘油三酯含量的影響
        2.2.5 日糧中添加DHA對草魚脂肪細胞分化相關(guān)基因表達的影響
        2.2.6 日糧中添加DHA對草魚脂肪細胞凋亡相關(guān)基因及蛋白表達的影響
    2.3 討論
    2.4 小結(jié)
第三章 離體探究DHA誘導草魚脂肪細胞凋亡的作用及機制
    3.1 材料與方法
        3.1.1 試驗草魚
        3.1.2 草魚前體脂肪細胞培養(yǎng)
        3.1.3 細胞活力檢測
        3.1.4 脂肪細胞凋亡率檢測
        3.1.5 Real-timePCR檢測相關(guān)基因mRNA的表達水平
        3.1.6 WesternBlot檢測凋亡相關(guān)蛋白表達情況
        3.1.7 凋亡相關(guān)蛋白酶活性的變化
        3.1.8 數(shù)據(jù)分析
    3.2 結(jié)果
        3.2.1 DHA對草魚脂肪細胞活力的影響
        3.2.2 DHA以劑量依賴的方式誘導草魚脂肪細胞凋亡
        3.2.3 DHA以時間依賴的方式誘導草魚脂肪細胞凋亡
        3.2.4 DHA對草魚脂肪細胞凋亡相關(guān)基因表達的影響
        3.2.5 DHA上調(diào)了草魚脂肪細胞中PPARγ的表達水平
        3.2.6 DHA以PPARγ依賴的方式促進草魚脂肪細胞凋亡
        3.2.7 DHA誘導草魚脂肪細胞凋亡可能通過內(nèi)源性途徑
    3.3 討論
    3.4 小結(jié)
第四章 綜合討論與結(jié)論
    4.1 綜合討論
    4.2 結(jié)論
    4.3 創(chuàng)新點
    4.4 下一步研究計劃
參考文獻
附錄
致謝
作者簡介


【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
[1]EGCG通過抑制內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激凋亡途徑減輕高糖致足細胞損傷[D]. 項春紅.山東大學 2017



本文編號：3155752