發(fā)布時(shí)間：2021-04-23 11:37

　　大黃魚（Larimichthys crocea）是中國(guó)重要經(jīng)濟(jì)海水養(yǎng)殖魚類之一,為中國(guó)特有的地方性種類,人工養(yǎng)殖技術(shù)的成功使其成為目前網(wǎng)箱養(yǎng)殖量最大的魚類,但是隨著養(yǎng)殖量的增加和養(yǎng)殖環(huán)境的破壞,常常導(dǎo)致大面積疾病的爆發(fā),其中副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus）是養(yǎng)殖大黃魚中最常見的病原菌之一,給大黃魚的養(yǎng)殖業(yè)造成了巨大的損失。本研究從大黃魚免疫基因入手,首先克隆獲得腫瘤壞死因子受體（Tumor Necrosis Factor Receptor,TNFR）和免疫球蛋白重鏈（Immunoglobulin heavy chain,IgH）的cDNA全長(zhǎng)。從實(shí)驗(yàn)室已構(gòu)建的大黃魚EST文庫(kù)和前人的研究中篩選獲得18個(gè)免疫相關(guān)基因:Toll樣受體9（toll-like receptor,TLR9）、Toll樣受體22（TLR22）、腫瘤壞死因子受體13B（TNFR13B）、RAC-GTP酶（RacGTPase,RAC）、白介素8（interleukin8,IL8）、白介素10（IL10）、干擾素調(diào)節(jié)因子1（interferon regulatory factor,IRF1）... 

【文章來源】：集美大學(xué)福建省

【文章頁(yè)數(shù)】：54 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第1章 引言
    1.1 大黃魚的養(yǎng)殖現(xiàn)狀及面臨的問題
    1.2 副溶血弧菌
    1.3 魚類的免疫系統(tǒng)
        1.3.1 魚類的免疫組織和器官
        1.3.2 細(xì)胞免疫
        1.3.3 體液免疫
    1.4 研究?jī)?nèi)容和目的意義
        1.4.1 研究?jī)?nèi)容
        1.4.2 本研究的目的和意義
第2章 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.1.2 主要試劑和儀器
        2.1.3 引物
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 總RNA的提取
        2.2.2 cDNA第一鏈的合成和基因片段的獲得
        2.2.3 SMART-RACE技術(shù)獲取基因全長(zhǎng)
        2.2.4 割膠純化基因片段
        2.2.5 與PET19-T質(zhì)粒載體連接
        2.2.6 JM109感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化及篩選
        2.2.7 質(zhì)粒插入片段的PCR檢測(cè)
        2.2.8 質(zhì)粒測(cè)序
        2.2.9 目的基因的生物信息學(xué)分析
        2.2.10 實(shí)時(shí)熒光定量PCR反應(yīng)體系及條件
第3章 結(jié)果
    3.1 大黃魚性腺、脾臟及其他各組織總RNA的質(zhì)量
    3.2 TNFR基因的克隆和序列分析
        3.2.1 TNFR基因的克隆
        3.2.2 TNFR的cDNA序列分析
        3.2.3 大黃魚Lc TNFR空間模擬結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)及系統(tǒng)進(jìn)化樹構(gòu)建
    3.3 IgH基因的克隆和序列分析
        3.3.1 IgH基因的克隆
        3.3.2 IgH的cDNA序列分析
        3.3.3 IgH的同源性分析和系統(tǒng)發(fā)育分析
    3.4 免疫基因在不同組織器官中的表達(dá)結(jié)果
        3.4.1 大黃魚LcTNFR基因在不同組織器官中的差異性表達(dá)結(jié)果
        3.4.2 大黃魚LcIgH基因在不同組織器官中的差異性表達(dá)結(jié)果
    3.5 大黃魚免疫相關(guān)基因在應(yīng)激情況下的表達(dá)
第4章 討論
    4.1 腫瘤壞死因子受體TNFR
    4.2 免疫球蛋白重鏈IgH
    4.3 其它免疫相關(guān)基因
        4.3.1 主要組織相容性復(fù)合體MHC基因
        4.3.2 趨化因子CC、CCL、CCL114和SDF-1 基因
        4.3.3 Toll信號(hào)通路其它相關(guān)基因TNFR13B、TLR9、TLR22、IL8、IL10、IRF1、Caspass9和Rac
        4.3.4 補(bǔ)體1抑制因子、β2-微球蛋白和臂板蛋白
第5章 結(jié)論和展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
致謝
參考文獻(xiàn)
在學(xué)期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]奧利亞羅非魚髓樣分化因子（MyD88）的克隆及其在組織中的表達(dá)[J]. 鄒芝英,王倩,楊弘,李大宇,祝璟琳,肖煒.  動(dòng)物學(xué)雜志. 2013(06)
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博士論文
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碩士論文
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[2]擬穴青蟹（Scylla paramamosain）Toll樣信號(hào)途徑關(guān)鍵基因及抗菌肽SpALF的克隆、表達(dá)與功能分析[D]. 朱磊.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[3]主要經(jīng)濟(jì)魚類血清免疫球蛋白的共同表位研究[D]. 鄭惠.福建農(nóng)林大學(xué) 2012
[4]胸腺γδT細(xì)胞的分化去向[D]. 李紅恩.中國(guó)醫(yī)科大學(xué) 2009



本文編號(hào)：3155257