Ⅵ型分泌系統(tǒng)T6SS-1核心組分及烯醇化酶在副溶血弧菌致病過程中的作用
發(fā)布時間:2021-04-17 23:56
副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)是一種革蘭氏陰性短桿菌,是海產(chǎn)品引起食物中毒的重要致病茵之一,其致病性與其產(chǎn)生的毒力因子密切相關(guān)。細菌蛋白分泌系統(tǒng)及其表面蛋白可通過與宿主相互作用而直接參與病原茵的致病過程。VI型分泌系統(tǒng)(T6SS)是細菌重要的蛋白分泌系統(tǒng),在細菌的生存和致病過程中起著至關(guān)重要的作用,目前國內(nèi)外關(guān)于副溶血弧菌T6SS功能的報道還很少。已有報道表明烯醇化酶是細菌重要的黏附因子,參與多種病原的致病過程,至今還沒有關(guān)于副溶血弧茵的烯醇化酶及其功能的報道。本研究首次研究了副溶血弧菌T6SS-1中主要核心組分VipA1, Hcp1舳DotU1,以及表面黏附因子烯醇化酶的生物學功能。1.副溶血弧茵主要毒力相關(guān)因子的分布了解副溶血弧菌毒力相關(guān)因子在分離株中分布情況,對于了解細菌的致病機制和潛在的致病因子至關(guān)重要。我們對實驗室中155株副溶血弧菌環(huán)境分離株和30株臨床分離株的溶血素基因(tdh和trh)、黏附相關(guān)因子基因(MAM7和eno)、Ⅲ型分泌系統(tǒng)(T3SS-1和T3SS-2)以及VI型分泌系統(tǒng)(T6SS-1和T6SS-2)基因簇中的主要基因進行PCR...
【文章來源】:南京農(nóng)業(yè)大學江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:157 頁
【學位級別】:博士
【部分圖文】:
圖2-1革蘭巧陰性菌的分泌系統(tǒng)??F"ig?2-1?Overview?of?secretion?systems?in?Gram-neg?
M.?Easier等P7調(diào)用細胞電子斷層成像技術(shù)(electron?cryotomography,ECr)觀察??到T細菌T6SS顯微結(jié)構(gòu),可見一明顯的直筒型結(jié)構(gòu),有兩個不同的構(gòu)象:一個是又??長又細的"擴展"型結(jié)構(gòu)(圖2-4a-d),一個是又短又粗的"收縮"型結(jié)構(gòu)煙2-4e-h)。??兩種結(jié)構(gòu)均與細胞質(zhì)膜垂直,而且非常明顯的定位在細胞質(zhì)中,研究人員共觀察了?90??株野生型細菌,其中26株中具有這種管狀結(jié)構(gòu),有些細胞中還不止1個管狀結(jié)構(gòu),??而在同一個細胞中還可同時觀察到"擴展"和"收縮"型兩種管狀結(jié)構(gòu)。相反,在??V皆公缺失株(0/53株),VCA109缺失株((mo株)和VCA0109/ClpV雙缺失株(0/8株)??均未觀察到如此管狀結(jié)構(gòu),充分說明這兩種管狀結(jié)構(gòu)都是T6SS相關(guān)的結(jié)構(gòu)。??r.|P圓??圖2-4電子斷層成像技術(shù)觀察完整細胞中T6巧結(jié)構(gòu)1221??Fig?2-4?Electron?cryo化mographic?imaging?of?T6SS?51〇1(;化化5?inside?intact?cells??IM,?in打er?membrane;?OM,outer?membrane;?F,flagellum;民,p山ative?ribosome;?SG,?polyphosphate??storage?granule).??18??
和化&基因的分布率顯著高于環(huán)境分離株;/加和基因在環(huán)境分離株中的分布率均??較低;在臨床株和環(huán)境分離株中f誠陽性株均高于陽性株。部分代表性菌株的PC民??擴增結(jié)果見圖3-1。??心?M?1?2?3?4?5?6?7?8?2345678??2000?2000??5。。mWUHB?一200?化??-HH??圖3-1副溶血弧菌t加(A)和trh?(B)基因的PCR檢測??Fig?3-1?PCR?detection?of?genes?/堿(A)?and?妒&?(B)?of?F./w口A口ewo?如/cw5??Lane?M,?DMA?Marker;?Lane?1—7,?幻r幻A幻ewo少"cws?isolates;?Lane?8,?ne呂ative?control.??34??
【參考文獻】:
期刊論文
[1]細菌Ⅵ型分泌系統(tǒng)的研究進展[J]. 陳君逸,鄒清華. 醫(yī)學研究雜志. 2013(08)
[2]一株引起凡納濱對蝦紅體病的病原菌——副溶血弧菌的初步研究[J]. 樊景鳳,宋立超,王斌,臧紅梅,梁玉波. 海洋科學. 2006(04)
[3]1992~2001年食源性疾病暴發(fā)資料分析——國家食源性疾病監(jiān)測網(wǎng)[J]. 劉秀梅,陳艷,王曉英,計融. 衛(wèi)生研究. 2004(06)
本文編號:3144381
【文章來源】:南京農(nóng)業(yè)大學江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:157 頁
【學位級別】:博士
【部分圖文】:
圖2-1革蘭巧陰性菌的分泌系統(tǒng)??F"ig?2-1?Overview?of?secretion?systems?in?Gram-neg?
M.?Easier等P7調(diào)用細胞電子斷層成像技術(shù)(electron?cryotomography,ECr)觀察??到T細菌T6SS顯微結(jié)構(gòu),可見一明顯的直筒型結(jié)構(gòu),有兩個不同的構(gòu)象:一個是又??長又細的"擴展"型結(jié)構(gòu)(圖2-4a-d),一個是又短又粗的"收縮"型結(jié)構(gòu)煙2-4e-h)。??兩種結(jié)構(gòu)均與細胞質(zhì)膜垂直,而且非常明顯的定位在細胞質(zhì)中,研究人員共觀察了?90??株野生型細菌,其中26株中具有這種管狀結(jié)構(gòu),有些細胞中還不止1個管狀結(jié)構(gòu),??而在同一個細胞中還可同時觀察到"擴展"和"收縮"型兩種管狀結(jié)構(gòu)。相反,在??V皆公缺失株(0/53株),VCA109缺失株((mo株)和VCA0109/ClpV雙缺失株(0/8株)??均未觀察到如此管狀結(jié)構(gòu),充分說明這兩種管狀結(jié)構(gòu)都是T6SS相關(guān)的結(jié)構(gòu)。??r.|P圓??圖2-4電子斷層成像技術(shù)觀察完整細胞中T6巧結(jié)構(gòu)1221??Fig?2-4?Electron?cryo化mographic?imaging?of?T6SS?51〇1(;化化5?inside?intact?cells??IM,?in打er?membrane;?OM,outer?membrane;?F,flagellum;民,p山ative?ribosome;?SG,?polyphosphate??storage?granule).??18??
和化&基因的分布率顯著高于環(huán)境分離株;/加和基因在環(huán)境分離株中的分布率均??較低;在臨床株和環(huán)境分離株中f誠陽性株均高于陽性株。部分代表性菌株的PC民??擴增結(jié)果見圖3-1。??心?M?1?2?3?4?5?6?7?8?2345678??2000?2000??5。。mWUHB?一200?化??-HH??圖3-1副溶血弧菌t加(A)和trh?(B)基因的PCR檢測??Fig?3-1?PCR?detection?of?genes?/堿(A)?and?妒&?(B)?of?F./w口A口ewo?如/cw5??Lane?M,?DMA?Marker;?Lane?1—7,?幻r幻A幻ewo少"cws?isolates;?Lane?8,?ne呂ative?control.??34??
【參考文獻】:
期刊論文
[1]細菌Ⅵ型分泌系統(tǒng)的研究進展[J]. 陳君逸,鄒清華. 醫(yī)學研究雜志. 2013(08)
[2]一株引起凡納濱對蝦紅體病的病原菌——副溶血弧菌的初步研究[J]. 樊景鳳,宋立超,王斌,臧紅梅,梁玉波. 海洋科學. 2006(04)
[3]1992~2001年食源性疾病暴發(fā)資料分析——國家食源性疾病監(jiān)測網(wǎng)[J]. 劉秀梅,陳艷,王曉英,計融. 衛(wèi)生研究. 2004(06)
本文編號:3144381
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