團(tuán)頭魴（Megalobrama amblycephala）,鯉科,是我國(guó)重要的淡水養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)魚類,具有養(yǎng)殖成本低、成活率高、生長(zhǎng)快等優(yōu)點(diǎn),上海海洋大學(xué)也培育出了“浦江1號(hào)”團(tuán)頭魴,具有明顯的生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì);但團(tuán)頭魴與鯉魚、鯽魚等魚類相比,表現(xiàn)為極不耐低氧,在實(shí)際大規(guī)模養(yǎng)殖中,容易由于缺氧而引起死亡,給團(tuán)頭魴養(yǎng)殖帶來(lái)極大危害。因此,探索團(tuán)頭魴低氧調(diào)控機(jī)制、發(fā)掘主效基因的功能對(duì)團(tuán)頭魴遺傳育種基礎(chǔ)研究及耐低氧品種的選育都具有重要的實(shí)際應(yīng)用意義。血紅素加氧酶（Heme oxygenase,HO）是血紅素分解代謝過(guò)程中的限速酶,主要功能是分解血紅素產(chǎn)生一氧化碳（CO）,亞鐵和膽綠素,隨后膽綠素被還原為膽紅素。本研究采用cDNA末端快速擴(kuò)增（RACE）的方法成功克隆出了團(tuán)頭魴HO-2a和HO-2b基因,并對(duì)團(tuán)頭魴不同發(fā)育時(shí)期的胚胎和成魚的多個(gè)組織進(jìn)行表達(dá)分析,同時(shí)對(duì)不同時(shí)期的胚胎及成魚進(jìn)行低氧處理。序列分析表明,團(tuán)頭魴HO-2a和HO-2b基因cDNA序列全長(zhǎng)分別為1380 bp和1390 bp,分別編碼305個(gè)氨基酸（aa）和317 aa;團(tuán)頭魴HO-2a和-2b基因具有相對(duì)較低,67%的相似度,兩者在... 

【文章來(lái)源】：上海海洋大學(xué)上海市

【文章頁(yè)數(shù)】：57 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
引言
第一章 團(tuán)頭魴血紅素加氧酶（HO）2 重復(fù)基因低氧應(yīng)答分析
    1.1 材料、儀器和試劑
        1.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1.2 主要儀器
        1.1.3 主要試劑
    1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        1.2.1 RNA提取
        1.2.2 團(tuán)頭魴重復(fù)基因HO-2 全長(zhǎng)cDNA的克隆
        1.2.3 團(tuán)頭魴qRT -PCR組織和胚胎表達(dá)
        1.2.4 整胚原位雜交（WISH）
        1.2.5 急性缺氧實(shí)驗(yàn)
        1.2.6 序列分析與系統(tǒng)進(jìn)化樹的構(gòu)建
    1.3 結(jié)果
        1.3.1 團(tuán)頭魴HO-2a和HO-2b全長(zhǎng)cDNA序列的克隆
        1.3.2 團(tuán)頭魴HO-2a和HO-2b基因氨基酸序列同源性及分子進(jìn)化分析
        1.3.3 團(tuán)頭魴HO-2a和HO-2b表達(dá)模式分析
        1.3.4 整胚原位雜交（WISH）
        1.3.5 急性缺氧處理對(duì)團(tuán)頭魴HO-2a和HO-2b mRNA表達(dá)的影響
    1.4 討論
第二章 PB-Tgf2復(fù)合轉(zhuǎn)座元件在團(tuán)頭魴基因組中的插入誘變研究
    2.1 材料與方法
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.2 主要儀器
        2.1.3 主要化學(xué)和生物試劑
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 引物設(shè)計(jì)
        2.2.2 轉(zhuǎn)座酶mRNA制備
        2.2.3 顯微注射和子代培育
        2.2.4 團(tuán)頭魴基因組中的陽(yáng)性率檢測(cè)
    2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.3.1 本實(shí)驗(yàn)室已構(gòu)建的供體質(zhì)粒pPBs-Tgf2-RPrmP-eGFP和轉(zhuǎn)基因輔助質(zhì)粒pCS2-PBTP的結(jié)構(gòu)
    2.4 討論
結(jié)論與展望
參考文獻(xiàn)
附錄：英文縮略語(yǔ)表
在校發(fā)表論文情況
致謝



本文編號(hào)：3114584