發(fā)布時間：2021-03-13 14:38

　　傳染性胰壞死病病毒（Infectious pancreatic necrosis virus）是一種嚴(yán)重的病毒性傳染病,它對鱒魚及蛙魚的幼魚有特別明顯的傳染性及致病性,高致病性毒株可在兩個月內(nèi)導(dǎo)致70%的幼魚死亡。該病主要危害鮭鱒魚類的幼魚,死亡率高達(dá)90%以上。傳染性胰壞死病病毒是通過魚卵垂直傳播的,已經(jīng)被感染過的魚自身已存在抗體,可以抵抗病毒的再次侵襲,但是這些魚會將自身的病毒感染給其他魚類,造成的擴(kuò)散常給魚類養(yǎng)殖業(yè)帶來災(zāi)難性的損失,是各國進(jìn)出口魚的檢測對象。本研究將抗IPNV單克隆抗體腹水和抗IPNV VP2重組蛋白多抗血清結(jié)合雙抗體夾心原理建立一種檢測IPNV的膠體金免疫層析試紙條。將金標(biāo)抗體噴涂在金標(biāo)墊上,IPNV VP2多抗與山羊抗鼠IgG二抗均噴涂于硝酸纖維素膜上分別作為檢測線與質(zhì)控線,試紙條的兩端分別為樣品墊與吸收墊。利用辛酸-飽和硫酸銨法純化血清抗體以及單克隆抗體腹水。純化后血清抗體的濃度為10.014mg/ml,效價為 1.0×106;腹水抗體的濃度為 2.071mg/ml,效價為 1.0×106。經(jīng) Western Blot鑒定,腹水抗體與血清抗體具有良好的反應(yīng)原... 

【文章來源】：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１試紙條組裝模型??Ｆｉ１?Ｍｏｄｅｌ?ｏｆ?ｔｈｅ?ＩｍｍｕｎｉｔＣｏｌｌｏｉｄ?Ｇｏｌｄ?Ｓｔｒｉ

圖３－１純化抗ＩＰＮＶ單克隆抗體腹水的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ電泳圖??１．蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)２．未純化的腹水單抗；３．辛酸？硫酸銨法純化后腹水單抗；??

圖３－２重組ＩＰＮＶＶＰ２蛋白的表達(dá)與純化??１．蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)；２．未經(jīng)過ＩＰＴＧ誘導(dǎo)的重組蛋白；３．經(jīng)過ＩＰＴＧ誘導(dǎo)的重組蛋白??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]用于水產(chǎn)品中硝基呋喃類代謝物檢測的膠體金快速檢測試劑板的研制[J]. 張敏,桑麗雅,王振國,王偉萍,盛慧萍,柳愛春.  中國食品衛(wèi)生雜志. 2013(01)
[2]應(yīng)用辛酸硫酸銨法提純兔抗雞傳染性法氏囊病IgG抗體[J]. 張燕欣,趙云英,李富桂.  黑龍江畜牧獸醫(yī). 2013(01)
[3]飼料中硝基呋喃類藥物免疫膠體金檢測試紙條的研制[J]. 何方洋,馮才偉,孫震,趙正苗,何麗霞.  飼料工業(yè). 2012(23)
[4]膠體金免疫層析技術(shù)在獸醫(yī)臨床診斷中的應(yīng)用進(jìn)展[J]. 莊金秋,梅建國,沈志強.  中國動物檢疫. 2012(09)
[5]快速檢測豬繁殖與呼吸綜合征病毒膠體金免疫層析方法的建立[J]. 李雪松,符芳,李海忠,王偉,陳欣,郎越坤,田華彬,周艷君,劉永剛,蔡雪輝,李曦.  中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報. 2011(09)
[6]豬旋毛蟲病膠體金檢測試紙條的制備[J]. 苑淑賢,姚新華,任科研,李萌,楊金生,苑冬梅,李煜潔,常軍亮,楊淑蘋.  中國生物制品學(xué)雜志. 2011(08)
[7]水牛伊氏錐蟲病免疫膠體金試紙條的研制及初步應(yīng)用[J]. 孟盟,曹池,陳漢忠,劉明如,王華俊,奉彬,陳國寶.  畜牧獸醫(yī)學(xué)報. 2011(07)
[8]貓瘟熱病毒膠體金快速檢測試紙的研究[J]. 燕永彬,孫靜,艾有為,田麗紅.  經(jīng)濟(jì)動物學(xué)報. 2011(02)
[9]狂犬病病毒抗體膠體金檢測試紙的制備[J]. 王鐵成,張濤,楊松濤,王化磊,高玉偉,孫瑋,靳曉霞,趙平森,馮娜,黃耕,鄒嘯環(huán),夏咸柱.  生物工程學(xué)報. 2011(05)
[10]實驗動物弓形蟲免疫膠體金快速檢測方法的建立及試紙制備[J]. 余建國,何忠平.  福建畜牧獸醫(yī). 2011(03)

碩士論文
[1]傳染性胰腺壞死病毒VP2抗原表位區(qū)間接免疫熒光方法的建立[D]. 王健楠.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012



本文編號：3080399