傳染性胰腺壞死病毒膠體金免疫層析試紙條的研制
發(fā)布時(shí)間:2021-03-13 14:38
傳染性胰壞死病病毒(Infectious pancreatic necrosis virus)是一種嚴(yán)重的病毒性傳染病,它對(duì)鱒魚(yú)及蛙魚(yú)的幼魚(yú)有特別明顯的傳染性及致病性,高致病性毒株可在兩個(gè)月內(nèi)導(dǎo)致70%的幼魚(yú)死亡。該病主要危害鮭鱒魚(yú)類的幼魚(yú),死亡率高達(dá)90%以上。傳染性胰壞死病病毒是通過(guò)魚(yú)卵垂直傳播的,已經(jīng)被感染過(guò)的魚(yú)自身已存在抗體,可以抵抗病毒的再次侵襲,但是這些魚(yú)會(huì)將自身的病毒感染給其他魚(yú)類,造成的擴(kuò)散常給魚(yú)類養(yǎng)殖業(yè)帶來(lái)災(zāi)難性的損失,是各國(guó)進(jìn)出口魚(yú)的檢測(cè)對(duì)象。本研究將抗IPNV單克隆抗體腹水和抗IPNV VP2重組蛋白多抗血清結(jié)合雙抗體夾心原理建立一種檢測(cè)IPNV的膠體金免疫層析試紙條。將金標(biāo)抗體噴涂在金標(biāo)墊上,IPNV VP2多抗與山羊抗鼠IgG二抗均噴涂于硝酸纖維素膜上分別作為檢測(cè)線與質(zhì)控線,試紙條的兩端分別為樣品墊與吸收墊。利用辛酸-飽和硫酸銨法純化血清抗體以及單克隆抗體腹水。純化后血清抗體的濃度為10.014mg/ml,效價(jià)為 1.0×106;腹水抗體的濃度為 2.071mg/ml,效價(jià)為 1.0×106。經(jīng) Western Blot鑒定,腹水抗體與血清抗體具有良好的反應(yīng)原...
【文章來(lái)源】:東北農(nóng)業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校
【文章頁(yè)數(shù)】:63 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
圖1試紙條組裝模型??Fi1?Model?of?the?ImmunitColloid?Gold?Stri
圖3-1純化抗IPNV單克隆抗體腹水的SDS-PAGE電泳圖??1.蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)2.未純化的腹水單抗;3.辛酸?硫酸銨法純化后腹水單抗;??
圖3-2重組IPNVVP2蛋白的表達(dá)與純化??1.蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn);2.未經(jīng)過(guò)IPTG誘導(dǎo)的重組蛋白;3.經(jīng)過(guò)IPTG誘導(dǎo)的重組蛋白??
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]用于水產(chǎn)品中硝基呋喃類代謝物檢測(cè)的膠體金快速檢測(cè)試劑板的研制[J]. 張敏,桑麗雅,王振國(guó),王偉萍,盛慧萍,柳愛(ài)春. 中國(guó)食品衛(wèi)生雜志. 2013(01)
[2]應(yīng)用辛酸硫酸銨法提純兔抗雞傳染性法氏囊病IgG抗體[J]. 張燕欣,趙云英,李富桂. 黑龍江畜牧獸醫(yī). 2013(01)
[3]飼料中硝基呋喃類藥物免疫膠體金檢測(cè)試紙條的研制[J]. 何方洋,馮才偉,孫震,趙正苗,何麗霞. 飼料工業(yè). 2012(23)
[4]膠體金免疫層析技術(shù)在獸醫(yī)臨床診斷中的應(yīng)用進(jìn)展[J]. 莊金秋,梅建國(guó),沈志強(qiáng). 中國(guó)動(dòng)物檢疫. 2012(09)
[5]快速檢測(cè)豬繁殖與呼吸綜合征病毒膠體金免疫層析方法的建立[J]. 李雪松,符芳,李海忠,王偉,陳欣,郎越坤,田華彬,周艷君,劉永剛,蔡雪輝,李曦. 中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2011(09)
[6]豬旋毛蟲(chóng)病膠體金檢測(cè)試紙條的制備[J]. 苑淑賢,姚新華,任科研,李萌,楊金生,苑冬梅,李煜潔,常軍亮,楊淑蘋. 中國(guó)生物制品學(xué)雜志. 2011(08)
[7]水牛伊氏錐蟲(chóng)病免疫膠體金試紙條的研制及初步應(yīng)用[J]. 孟盟,曹池,陳漢忠,劉明如,王華俊,奉彬,陳國(guó)寶. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2011(07)
[8]貓瘟熱病毒膠體金快速檢測(cè)試紙的研究[J]. 燕永彬,孫靜,艾有為,田麗紅. 經(jīng)濟(jì)動(dòng)物學(xué)報(bào). 2011(02)
[9]狂犬病病毒抗體膠體金檢測(cè)試紙的制備[J]. 王鐵成,張濤,楊松濤,王化磊,高玉偉,孫瑋,靳曉霞,趙平森,馮娜,黃耕,鄒嘯環(huán),夏咸柱. 生物工程學(xué)報(bào). 2011(05)
[10]實(shí)驗(yàn)動(dòng)物弓形蟲(chóng)免疫膠體金快速檢測(cè)方法的建立及試紙制備[J]. 余建國(guó),何忠平. 福建畜牧獸醫(yī). 2011(03)
碩士論文
[1]傳染性胰腺壞死病毒VP2抗原表位區(qū)間接免疫熒光方法的建立[D]. 王健楠.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
本文編號(hào):3080399
【文章來(lái)源】:東北農(nóng)業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校
【文章頁(yè)數(shù)】:63 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
圖1試紙條組裝模型??Fi1?Model?of?the?ImmunitColloid?Gold?Stri
圖3-1純化抗IPNV單克隆抗體腹水的SDS-PAGE電泳圖??1.蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)2.未純化的腹水單抗;3.辛酸?硫酸銨法純化后腹水單抗;??
圖3-2重組IPNVVP2蛋白的表達(dá)與純化??1.蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn);2.未經(jīng)過(guò)IPTG誘導(dǎo)的重組蛋白;3.經(jīng)過(guò)IPTG誘導(dǎo)的重組蛋白??
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]用于水產(chǎn)品中硝基呋喃類代謝物檢測(cè)的膠體金快速檢測(cè)試劑板的研制[J]. 張敏,桑麗雅,王振國(guó),王偉萍,盛慧萍,柳愛(ài)春. 中國(guó)食品衛(wèi)生雜志. 2013(01)
[2]應(yīng)用辛酸硫酸銨法提純兔抗雞傳染性法氏囊病IgG抗體[J]. 張燕欣,趙云英,李富桂. 黑龍江畜牧獸醫(yī). 2013(01)
[3]飼料中硝基呋喃類藥物免疫膠體金檢測(cè)試紙條的研制[J]. 何方洋,馮才偉,孫震,趙正苗,何麗霞. 飼料工業(yè). 2012(23)
[4]膠體金免疫層析技術(shù)在獸醫(yī)臨床診斷中的應(yīng)用進(jìn)展[J]. 莊金秋,梅建國(guó),沈志強(qiáng). 中國(guó)動(dòng)物檢疫. 2012(09)
[5]快速檢測(cè)豬繁殖與呼吸綜合征病毒膠體金免疫層析方法的建立[J]. 李雪松,符芳,李海忠,王偉,陳欣,郎越坤,田華彬,周艷君,劉永剛,蔡雪輝,李曦. 中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2011(09)
[6]豬旋毛蟲(chóng)病膠體金檢測(cè)試紙條的制備[J]. 苑淑賢,姚新華,任科研,李萌,楊金生,苑冬梅,李煜潔,常軍亮,楊淑蘋. 中國(guó)生物制品學(xué)雜志. 2011(08)
[7]水牛伊氏錐蟲(chóng)病免疫膠體金試紙條的研制及初步應(yīng)用[J]. 孟盟,曹池,陳漢忠,劉明如,王華俊,奉彬,陳國(guó)寶. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2011(07)
[8]貓瘟熱病毒膠體金快速檢測(cè)試紙的研究[J]. 燕永彬,孫靜,艾有為,田麗紅. 經(jīng)濟(jì)動(dòng)物學(xué)報(bào). 2011(02)
[9]狂犬病病毒抗體膠體金檢測(cè)試紙的制備[J]. 王鐵成,張濤,楊松濤,王化磊,高玉偉,孫瑋,靳曉霞,趙平森,馮娜,黃耕,鄒嘯環(huán),夏咸柱. 生物工程學(xué)報(bào). 2011(05)
[10]實(shí)驗(yàn)動(dòng)物弓形蟲(chóng)免疫膠體金快速檢測(cè)方法的建立及試紙制備[J]. 余建國(guó),何忠平. 福建畜牧獸醫(yī). 2011(03)
碩士論文
[1]傳染性胰腺壞死病毒VP2抗原表位區(qū)間接免疫熒光方法的建立[D]. 王健楠.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
本文編號(hào):3080399
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