發(fā)布時間：2021-03-11 00:57

　　利用反向點(diǎn)雜交技術(shù),研制靈敏度較高的南美白對蝦4種病原體檢測試劑盒,其檢測指標(biāo)包括致對蝦急性肝胰腺壞死病副溶血弧菌（VpAHPND）、對蝦白斑綜合征病毒（WSSV）、對蝦傳染性皮下及造血組織壞死病毒（IHHNV）、對蝦肝腸胞蟲（EHP）,用重組質(zhì)粒分別對其進(jìn)行了最低檢測限測試,并與現(xiàn)有推薦方法進(jìn)行比較。本研究研發(fā)的檢測試劑盒對4種病原體的最低檢測限為1μl 10～100拷貝。特異性檢測結(jié)果表明,4種病原體彼此不產(chǎn)生交叉反應(yīng),特異性良好,與各病原體推薦檢測方法的結(jié)果相比,陽性符合率完全一致。本研究研發(fā)的檢測試劑盒具有操作方便,靈敏度高,特異性好,檢測時間短,設(shè)備要求簡單等特點(diǎn),適合應(yīng)用于南美白對蝦VpAHPND、WSSV、IHHNV、EHP的檢測、篩查工作中。 

【文章來源】：江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報. 2020,36(03)北大核心

【文章頁數(shù)】：10 頁

【部分圖文】：

普通PCR法和生物芯片法對IHHNV的檢測結(jié)果

表2 探針及其序列Table 2 Sequences of the probes used in this study 探針名稱 序列 (5′→3′) 探針長度 (bp) 檢測對象 Pir-P AGGAAAACCAACAGCAGGTGA 21 pirB 基因 EHP-P CATCGCTCTCGCAACACCCA 20 對蝦肝腸胞蟲 vp28-P TAGAGACGGGGGTGAAGGAG 20 對蝦白斑綜合征病毒 IHHNV-P CTTTCGGCGTGTTCTTCGTC 20 對蝦傳染性皮下及造血組織壞死病毒 18S rDNA-P CTAGGGCGGTATCTGATCGC 20 南美白對蝦 HC TTTTTTTAAATGTTGGGGAA 20 擴(kuò)增產(chǎn)物1.2.5 對蝦組織樣本提取

圖5顯示,將最低檢測限濃度的質(zhì)粒與陰性蝦基因組混合,VpAHPND、WSSV、IHHNV的最低檢測限可達(dá)到1 μl 10拷貝,EHP的最低檢測限為1 μl 100拷貝,VpAHPND、IHHNV、WSSV、EHP在最低檢測限下的信號均明顯增強(qiáng)。圖3 生物芯片檢測體系雜交時間的優(yōu)化

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3075580