建立了3齡仿刺參和幼參體腔液中皮質醇的超高效液相色譜—串聯(lián)質譜的檢測方法。樣品采用乙腈-0.2%甲酸溶液均質振蕩、超聲提取,用Captiva EMR-Lipid固相萃取柱凈化,BEH C-18色譜柱分離,采用超高效液相色譜—串聯(lián)質譜儀進行測定。試驗結果表明,方法的檢出限為0.11μg/L,定量限為0.35μg/L,在空白樣品中分別添加皮質醇質量濃度為20、40、100μg/L,其回收率均為77%～105%,該方法基質干擾小,準確,易操作,能夠滿足仿刺參體腔液中痕量皮質醇的測定。 

【文章來源】：水產科學. 2020,39(04)北大核心

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【部分圖文】：

不同提取溶劑對皮質醇提取效率

由于樣品基質中蛋白質和脂類含量較為豐富,干擾組分多,對凈化方法要求較高,液—液凈化法及基質固相分散法難以達到凈化要求,其提取液仍需進一步凈化方可用于儀器檢測。因此本研究通過試驗考察對比了Oasis HLB固相萃取柱、OasisPrime固相萃取柱、Captiva EMR-Lipid固相萃取柱和Bond Elut Plexa固相萃取柱的純化效果(圖3),結果發(fā)現(xiàn),Oasis HLB固相萃取柱雖有一定的凈化效率,但比較費時,需要經過活化、平衡和淋洗3個步驟。OasisPrime固相萃取柱和Bond Elut Plexa固相萃取柱提取效率較低。只有Captiva EMR-Lipid固相萃取柱提取效率高,操作時間短,只需將提取溶液直接過柱,保持一定的速度,就能快速去除脂肪、磷脂等雜質,減小基質效應,節(jié)省時間和溶劑。因此,選擇使用Captiva EMR-Lipid 固相萃取柱作為凈化小柱。3.5 基質效應的評價

用本試驗所建立的方法,對幼參和3齡參體腔液進行檢測,幼參體腔液中未檢出皮質醇,3齡參混合體腔液中皮質醇的含量為6.91 μg/L,雌3齡參體腔液中皮質醇含量為6.28 μg/L,雄3齡參體腔液中皮質醇含量為6.21 μg/L,實際樣品與標準品溶液多重反應監(jiān)測色譜圖見圖1。本試驗的樣品檢測結果與周曉夢等[21]結果不同,周曉夢等[21]是用平均體質量(31.68±3.29) g的仿刺參,而本試驗用的是平均體質量(15±2.59) g的仿刺參,分析可能是由于個體差異所致。3 討 論


本文編號：3075536