厚殼貽貝含硒GPx克隆及在Cu 2+ 和LPS脅迫下的表達(dá)
發(fā)布時(shí)間:2021-03-07 02:49
海洋生物大多生活于水環(huán)境中,面臨比陸地環(huán)境更嚴(yán)重的環(huán)境脅迫,這些環(huán)境脅迫包括生物脅迫(寄生蟲(chóng)、細(xì)菌、真菌以及病毒)及非生物脅迫(重金屬、有機(jī)和無(wú)機(jī)污染等)。篩選當(dāng)?shù)匚锓N作為環(huán)境指示生物,深入開(kāi)展生物標(biāo)志物研究是當(dāng)前環(huán)境監(jiān)測(cè)領(lǐng)域的研究熱點(diǎn),可為常規(guī)海洋污染監(jiān)控提供有力補(bǔ)充。由于一些貝類具有固著生活、濾食性以及環(huán)境污染耐受性強(qiáng)等特性,世界上已有諸多國(guó)家開(kāi)展以貝類作為環(huán)境指示物的研究。本研究以當(dāng)?shù)靥厣駳べO貝(Mytilus coruscus)為研究對(duì)象,克隆了谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GPx)cDNA全長(zhǎng),并分析了其在銅及脂多糖脅迫下的表達(dá)。研究結(jié)果可為揭示厚殼貽貝谷胱甘肽過(guò)氧化物酶響應(yīng)外界脅迫的應(yīng)激機(jī)制提供理論依據(jù),同時(shí)也為厚殼貽貝GPx作為海洋標(biāo)志物的可能性提供支持。本研究首次從厚殼貽貝中克隆出GPx cDNA全長(zhǎng),命名為McGPx。McGPx cD-NA序列全長(zhǎng)為970 bp,其中開(kāi)放式閱讀框包含594 bp,共編碼197個(gè)氨基酸。第46個(gè)氨基酸(U)是由292TGA294編碼的硒半胱氨酸(Sec),表明它是硒依賴性谷胱甘肽過(guò)氧化物酶。在3’-U...
【文章來(lái)源】:浙江海洋大學(xué)浙江省
【文章頁(yè)數(shù)】:64 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
自由基之間的相互關(guān)系
圖 1-2 硒蛋白的生物合成[76]Fig 1.2 Biosynthesis of selenoprotein酸插入序列 SECIS 元件硒蛋白 mRNA 在其 3′UTR 中含有一個(gè)由大約 100 核為硒代半胱氨酸插入序列(selenocysteine insertion se導(dǎo) UGA 重新編碼為 Sec 是充分必要的[78]。真核生物可變[79]。在真核生物中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)兩種形式 SECIS 元模型源自大量的結(jié)構(gòu)研究和定點(diǎn)突變[80]。Ⅰ和Ⅱ的中存在附加的 Helix3,但其頂環(huán)較短。盡管它們的IS 元件存在 2 個(gè)保守區(qū)。第一個(gè)保守區(qū),SECIS 元-Watson–Crick 堿基對(duì),而四聯(lián)體是體內(nèi) Sec 摻入必基序總是包含 2 個(gè)串聯(lián) G-A,能形成保守的“莖-內(nèi)rn[81]。第二個(gè)保守區(qū)位于 I 型的頂環(huán)或位于 II 型的內(nèi)序,同樣也是 Sec 插入的關(guān)鍵。螺旋 2 作用被認(rèn)為可離[82]。SECISaln 是一個(gè)預(yù)測(cè) SECIS 元件的工具,基
圖 1-3 SECIS 元件的二級(jí)結(jié)構(gòu)模型[79]Fig 1.3 Secondary structure model of SECIS甘肽過(guò)氧化物酶抗氧化系統(tǒng)中,谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GPx)屬于清除 O2-和過(guò)氧[21]。在哺乳動(dòng)物中,GPx 家族根據(jù)結(jié)構(gòu)特征、特定底物的結(jié)合位細(xì)胞定位已經(jīng)鑒定出八種類型同工酶,分為兩大類型,經(jīng)典型Px2,GPx3,GPx5 和 GPx6)和磷脂氫過(guò)氧化物 GPx(GPx4,G經(jīng)典的 GPx 是多聚體(通常是四聚體)并且具有可溶性,而磷脂和細(xì)胞膜相關(guān)[85]。僅可以保護(hù)生物膜和其他細(xì)胞成分免受氧化損傷,還可以通過(guò)催調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳遞[86]。根據(jù)有沒(méi)有含有硒,又可分為含硒的谷胱不含硒的谷胱甘肽過(guò)氧化物酶。一種含有氧化還原活性半胱氨酸定為硫氧還蛋白過(guò)氧化物酶,另一種含有 Sec,其活性位點(diǎn)使用谷[87-88]
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Cu2+脅迫對(duì)中華絨螯蟹毒性作用及免疫相關(guān)基因表達(dá)的影響[J]. 毛振方,林奇辰,王彬宇,張翠真,陳志和,簡(jiǎn)少卿,趙大顯. 江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2018(02)
[2]LPS介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)過(guò)程及作用機(jī)制[J]. 曹承華,賀雅靜,高熒苒,施中東,姬新穎. 河南大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2017(01)
[3]舟山海域厚殼貽貝軟體部分營(yíng)養(yǎng)成分分析與評(píng)價(jià)[J]. 何建瑜,趙榮濤,劉慧慧. 南方水產(chǎn)科學(xué). 2012(04)
[4]三角帆蚌GPX基因cDNA全序列的克隆及其編碼蛋白的結(jié)構(gòu)分析[J]. 李西雷,汪桂玲,李家樂(lè),袁一鳴. 遺傳. 2010(04)
[5]Cu2+對(duì)櫛孔扇貝鰓組織抗氧化酶的影響[J]. 王凡,趙元鳳,呂景才,劉長(zhǎng)發(fā). 湖北農(nóng)業(yè)科學(xué). 2007(01)
[6]Glutathione Peroxidase Revisited—Simulation of the Catalytic Cycle by Computer-Assisted Molecular Modelling[J]. K. -D. AUMANN; N. BEDORF; R. BRIGELIUS-FLOHED;D. SCHOMBURG; AND L. FLOHE(Gesellschaft fur Biotechnologische Forschung mbH (GBF) Mascheroder Weg 1, D-38124 Braunschweig, Germany; Deutsches Institut fur Ernahrungsforschung (DIfE) Arthur-Scheunert-Allee 114. Biomedical and Environmental Sciences. 1997(Z1)
[7]Phospholipid Hydroperoxide Glutathione Peroxidase(PHGPx): More Than an Antioxidant Enzyme?[J]. FULVIO URSINI;MATILDE MAIORINO; AND ANTONELLA ROVERI(Department of Biological Chemistry, University of Padotu, Italy). Biomedical and Environmental Sciences. 1997(Z1)
本文編號(hào):3068270
【文章來(lái)源】:浙江海洋大學(xué)浙江省
【文章頁(yè)數(shù)】:64 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
自由基之間的相互關(guān)系
圖 1-2 硒蛋白的生物合成[76]Fig 1.2 Biosynthesis of selenoprotein酸插入序列 SECIS 元件硒蛋白 mRNA 在其 3′UTR 中含有一個(gè)由大約 100 核為硒代半胱氨酸插入序列(selenocysteine insertion se導(dǎo) UGA 重新編碼為 Sec 是充分必要的[78]。真核生物可變[79]。在真核生物中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)兩種形式 SECIS 元模型源自大量的結(jié)構(gòu)研究和定點(diǎn)突變[80]。Ⅰ和Ⅱ的中存在附加的 Helix3,但其頂環(huán)較短。盡管它們的IS 元件存在 2 個(gè)保守區(qū)。第一個(gè)保守區(qū),SECIS 元-Watson–Crick 堿基對(duì),而四聯(lián)體是體內(nèi) Sec 摻入必基序總是包含 2 個(gè)串聯(lián) G-A,能形成保守的“莖-內(nèi)rn[81]。第二個(gè)保守區(qū)位于 I 型的頂環(huán)或位于 II 型的內(nèi)序,同樣也是 Sec 插入的關(guān)鍵。螺旋 2 作用被認(rèn)為可離[82]。SECISaln 是一個(gè)預(yù)測(cè) SECIS 元件的工具,基
圖 1-3 SECIS 元件的二級(jí)結(jié)構(gòu)模型[79]Fig 1.3 Secondary structure model of SECIS甘肽過(guò)氧化物酶抗氧化系統(tǒng)中,谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GPx)屬于清除 O2-和過(guò)氧[21]。在哺乳動(dòng)物中,GPx 家族根據(jù)結(jié)構(gòu)特征、特定底物的結(jié)合位細(xì)胞定位已經(jīng)鑒定出八種類型同工酶,分為兩大類型,經(jīng)典型Px2,GPx3,GPx5 和 GPx6)和磷脂氫過(guò)氧化物 GPx(GPx4,G經(jīng)典的 GPx 是多聚體(通常是四聚體)并且具有可溶性,而磷脂和細(xì)胞膜相關(guān)[85]。僅可以保護(hù)生物膜和其他細(xì)胞成分免受氧化損傷,還可以通過(guò)催調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳遞[86]。根據(jù)有沒(méi)有含有硒,又可分為含硒的谷胱不含硒的谷胱甘肽過(guò)氧化物酶。一種含有氧化還原活性半胱氨酸定為硫氧還蛋白過(guò)氧化物酶,另一種含有 Sec,其活性位點(diǎn)使用谷[87-88]
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Cu2+脅迫對(duì)中華絨螯蟹毒性作用及免疫相關(guān)基因表達(dá)的影響[J]. 毛振方,林奇辰,王彬宇,張翠真,陳志和,簡(jiǎn)少卿,趙大顯. 江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2018(02)
[2]LPS介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)過(guò)程及作用機(jī)制[J]. 曹承華,賀雅靜,高熒苒,施中東,姬新穎. 河南大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2017(01)
[3]舟山海域厚殼貽貝軟體部分營(yíng)養(yǎng)成分分析與評(píng)價(jià)[J]. 何建瑜,趙榮濤,劉慧慧. 南方水產(chǎn)科學(xué). 2012(04)
[4]三角帆蚌GPX基因cDNA全序列的克隆及其編碼蛋白的結(jié)構(gòu)分析[J]. 李西雷,汪桂玲,李家樂(lè),袁一鳴. 遺傳. 2010(04)
[5]Cu2+對(duì)櫛孔扇貝鰓組織抗氧化酶的影響[J]. 王凡,趙元鳳,呂景才,劉長(zhǎng)發(fā). 湖北農(nóng)業(yè)科學(xué). 2007(01)
[6]Glutathione Peroxidase Revisited—Simulation of the Catalytic Cycle by Computer-Assisted Molecular Modelling[J]. K. -D. AUMANN; N. BEDORF; R. BRIGELIUS-FLOHED;D. SCHOMBURG; AND L. FLOHE(Gesellschaft fur Biotechnologische Forschung mbH (GBF) Mascheroder Weg 1, D-38124 Braunschweig, Germany; Deutsches Institut fur Ernahrungsforschung (DIfE) Arthur-Scheunert-Allee 114. Biomedical and Environmental Sciences. 1997(Z1)
[7]Phospholipid Hydroperoxide Glutathione Peroxidase(PHGPx): More Than an Antioxidant Enzyme?[J]. FULVIO URSINI;MATILDE MAIORINO; AND ANTONELLA ROVERI(Department of Biological Chemistry, University of Padotu, Italy). Biomedical and Environmental Sciences. 1997(Z1)
本文編號(hào):3068270
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