厚殼貽貝含硒GPx克隆及在Cu 2+ 和LPS脅迫下的表達
發(fā)布時間:2021-03-07 02:49
海洋生物大多生活于水環(huán)境中,面臨比陸地環(huán)境更嚴重的環(huán)境脅迫,這些環(huán)境脅迫包括生物脅迫(寄生蟲、細菌、真菌以及病毒)及非生物脅迫(重金屬、有機和無機污染等)。篩選當?shù)匚锓N作為環(huán)境指示生物,深入開展生物標志物研究是當前環(huán)境監(jiān)測領域的研究熱點,可為常規(guī)海洋污染監(jiān)控提供有力補充。由于一些貝類具有固著生活、濾食性以及環(huán)境污染耐受性強等特性,世界上已有諸多國家開展以貝類作為環(huán)境指示物的研究。本研究以當?shù)靥厣駳べO貝(Mytilus coruscus)為研究對象,克隆了谷胱甘肽過氧化物酶(GPx)cDNA全長,并分析了其在銅及脂多糖脅迫下的表達。研究結(jié)果可為揭示厚殼貽貝谷胱甘肽過氧化物酶響應外界脅迫的應激機制提供理論依據(jù),同時也為厚殼貽貝GPx作為海洋標志物的可能性提供支持。本研究首次從厚殼貽貝中克隆出GPx cDNA全長,命名為McGPx。McGPx cD-NA序列全長為970 bp,其中開放式閱讀框包含594 bp,共編碼197個氨基酸。第46個氨基酸(U)是由292TGA294編碼的硒半胱氨酸(Sec),表明它是硒依賴性谷胱甘肽過氧化物酶。在3’-U...
【文章來源】:浙江海洋大學浙江省
【文章頁數(shù)】:64 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
自由基之間的相互關系
圖 1-2 硒蛋白的生物合成[76]Fig 1.2 Biosynthesis of selenoprotein酸插入序列 SECIS 元件硒蛋白 mRNA 在其 3′UTR 中含有一個由大約 100 核為硒代半胱氨酸插入序列(selenocysteine insertion se導 UGA 重新編碼為 Sec 是充分必要的[78]。真核生物可變[79]。在真核生物中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)兩種形式 SECIS 元模型源自大量的結(jié)構(gòu)研究和定點突變[80]。Ⅰ和Ⅱ的中存在附加的 Helix3,但其頂環(huán)較短。盡管它們的IS 元件存在 2 個保守區(qū)。第一個保守區(qū),SECIS 元-Watson–Crick 堿基對,而四聯(lián)體是體內(nèi) Sec 摻入必基序總是包含 2 個串聯(lián) G-A,能形成保守的“莖-內(nèi)rn[81]。第二個保守區(qū)位于 I 型的頂環(huán)或位于 II 型的內(nèi)序,同樣也是 Sec 插入的關鍵。螺旋 2 作用被認為可離[82]。SECISaln 是一個預測 SECIS 元件的工具,基
圖 1-3 SECIS 元件的二級結(jié)構(gòu)模型[79]Fig 1.3 Secondary structure model of SECIS甘肽過氧化物酶抗氧化系統(tǒng)中,谷胱甘肽過氧化物酶(GPx)屬于清除 O2-和過氧[21]。在哺乳動物中,GPx 家族根據(jù)結(jié)構(gòu)特征、特定底物的結(jié)合位細胞定位已經(jīng)鑒定出八種類型同工酶,分為兩大類型,經(jīng)典型Px2,GPx3,GPx5 和 GPx6)和磷脂氫過氧化物 GPx(GPx4,G經(jīng)典的 GPx 是多聚體(通常是四聚體)并且具有可溶性,而磷脂和細胞膜相關[85]。僅可以保護生物膜和其他細胞成分免受氧化損傷,還可以通過催調(diào)節(jié)細胞內(nèi)信號傳遞[86]。根據(jù)有沒有含有硒,又可分為含硒的谷胱不含硒的谷胱甘肽過氧化物酶。一種含有氧化還原活性半胱氨酸定為硫氧還蛋白過氧化物酶,另一種含有 Sec,其活性位點使用谷[87-88]
【參考文獻】:
期刊論文
[1]Cu2+脅迫對中華絨螯蟹毒性作用及免疫相關基因表達的影響[J]. 毛振方,林奇辰,王彬宇,張翠真,陳志和,簡少卿,趙大顯. 江西農(nóng)業(yè)大學學報. 2018(02)
[2]LPS介導的炎癥反應過程及作用機制[J]. 曹承華,賀雅靜,高熒苒,施中東,姬新穎. 河南大學學報(醫(yī)學版). 2017(01)
[3]舟山海域厚殼貽貝軟體部分營養(yǎng)成分分析與評價[J]. 何建瑜,趙榮濤,劉慧慧. 南方水產(chǎn)科學. 2012(04)
[4]三角帆蚌GPX基因cDNA全序列的克隆及其編碼蛋白的結(jié)構(gòu)分析[J]. 李西雷,汪桂玲,李家樂,袁一鳴. 遺傳. 2010(04)
[5]Cu2+對櫛孔扇貝鰓組織抗氧化酶的影響[J]. 王凡,趙元鳳,呂景才,劉長發(fā). 湖北農(nóng)業(yè)科學. 2007(01)
[6]Glutathione Peroxidase Revisited—Simulation of the Catalytic Cycle by Computer-Assisted Molecular Modelling[J]. K. -D. AUMANN; N. BEDORF; R. BRIGELIUS-FLOHED;D. SCHOMBURG; AND L. FLOHE(Gesellschaft fur Biotechnologische Forschung mbH (GBF) Mascheroder Weg 1, D-38124 Braunschweig, Germany; Deutsches Institut fur Ernahrungsforschung (DIfE) Arthur-Scheunert-Allee 114. Biomedical and Environmental Sciences. 1997(Z1)
[7]Phospholipid Hydroperoxide Glutathione Peroxidase(PHGPx): More Than an Antioxidant Enzyme?[J]. FULVIO URSINI;MATILDE MAIORINO; AND ANTONELLA ROVERI(Department of Biological Chemistry, University of Padotu, Italy). Biomedical and Environmental Sciences. 1997(Z1)
本文編號:3068270
【文章來源】:浙江海洋大學浙江省
【文章頁數(shù)】:64 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
自由基之間的相互關系
圖 1-2 硒蛋白的生物合成[76]Fig 1.2 Biosynthesis of selenoprotein酸插入序列 SECIS 元件硒蛋白 mRNA 在其 3′UTR 中含有一個由大約 100 核為硒代半胱氨酸插入序列(selenocysteine insertion se導 UGA 重新編碼為 Sec 是充分必要的[78]。真核生物可變[79]。在真核生物中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)兩種形式 SECIS 元模型源自大量的結(jié)構(gòu)研究和定點突變[80]。Ⅰ和Ⅱ的中存在附加的 Helix3,但其頂環(huán)較短。盡管它們的IS 元件存在 2 個保守區(qū)。第一個保守區(qū),SECIS 元-Watson–Crick 堿基對,而四聯(lián)體是體內(nèi) Sec 摻入必基序總是包含 2 個串聯(lián) G-A,能形成保守的“莖-內(nèi)rn[81]。第二個保守區(qū)位于 I 型的頂環(huán)或位于 II 型的內(nèi)序,同樣也是 Sec 插入的關鍵。螺旋 2 作用被認為可離[82]。SECISaln 是一個預測 SECIS 元件的工具,基
圖 1-3 SECIS 元件的二級結(jié)構(gòu)模型[79]Fig 1.3 Secondary structure model of SECIS甘肽過氧化物酶抗氧化系統(tǒng)中,谷胱甘肽過氧化物酶(GPx)屬于清除 O2-和過氧[21]。在哺乳動物中,GPx 家族根據(jù)結(jié)構(gòu)特征、特定底物的結(jié)合位細胞定位已經(jīng)鑒定出八種類型同工酶,分為兩大類型,經(jīng)典型Px2,GPx3,GPx5 和 GPx6)和磷脂氫過氧化物 GPx(GPx4,G經(jīng)典的 GPx 是多聚體(通常是四聚體)并且具有可溶性,而磷脂和細胞膜相關[85]。僅可以保護生物膜和其他細胞成分免受氧化損傷,還可以通過催調(diào)節(jié)細胞內(nèi)信號傳遞[86]。根據(jù)有沒有含有硒,又可分為含硒的谷胱不含硒的谷胱甘肽過氧化物酶。一種含有氧化還原活性半胱氨酸定為硫氧還蛋白過氧化物酶,另一種含有 Sec,其活性位點使用谷[87-88]
【參考文獻】:
期刊論文
[1]Cu2+脅迫對中華絨螯蟹毒性作用及免疫相關基因表達的影響[J]. 毛振方,林奇辰,王彬宇,張翠真,陳志和,簡少卿,趙大顯. 江西農(nóng)業(yè)大學學報. 2018(02)
[2]LPS介導的炎癥反應過程及作用機制[J]. 曹承華,賀雅靜,高熒苒,施中東,姬新穎. 河南大學學報(醫(yī)學版). 2017(01)
[3]舟山海域厚殼貽貝軟體部分營養(yǎng)成分分析與評價[J]. 何建瑜,趙榮濤,劉慧慧. 南方水產(chǎn)科學. 2012(04)
[4]三角帆蚌GPX基因cDNA全序列的克隆及其編碼蛋白的結(jié)構(gòu)分析[J]. 李西雷,汪桂玲,李家樂,袁一鳴. 遺傳. 2010(04)
[5]Cu2+對櫛孔扇貝鰓組織抗氧化酶的影響[J]. 王凡,趙元鳳,呂景才,劉長發(fā). 湖北農(nóng)業(yè)科學. 2007(01)
[6]Glutathione Peroxidase Revisited—Simulation of the Catalytic Cycle by Computer-Assisted Molecular Modelling[J]. K. -D. AUMANN; N. BEDORF; R. BRIGELIUS-FLOHED;D. SCHOMBURG; AND L. FLOHE(Gesellschaft fur Biotechnologische Forschung mbH (GBF) Mascheroder Weg 1, D-38124 Braunschweig, Germany; Deutsches Institut fur Ernahrungsforschung (DIfE) Arthur-Scheunert-Allee 114. Biomedical and Environmental Sciences. 1997(Z1)
[7]Phospholipid Hydroperoxide Glutathione Peroxidase(PHGPx): More Than an Antioxidant Enzyme?[J]. FULVIO URSINI;MATILDE MAIORINO; AND ANTONELLA ROVERI(Department of Biological Chemistry, University of Padotu, Italy). Biomedical and Environmental Sciences. 1997(Z1)
本文編號:3068270
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