發(fā)布時(shí)間：2021-03-07 01:06

　　葡甘低聚糖是一種水溶性的高分子多糖,它作為功能性低聚糖,可以改善動(dòng)物腸道微生物菌群,提高機(jī)體的免疫功能及抗氧化性等,廣泛應(yīng)用于食品、藥品以及飼料行業(yè)。其特殊的生理功能和廣泛的應(yīng)用前景,極大地引起了學(xué)者們的興趣。本文通過(guò)含有β-甘露聚糖酶基因的重組工程菌利用全細(xì)胞催化的方式制備葡甘低聚糖,并對(duì)其酶解工藝條件進(jìn)行響應(yīng)面優(yōu)化,之后對(duì)酶解產(chǎn)物進(jìn)行薄層色譜檢測(cè),并對(duì)酶解產(chǎn)物進(jìn)行脫色和去單糖處理。Rossate-pET32a-CH3是本實(shí)驗(yàn)室構(gòu)建的含有β-甘露聚糖酶基因的重組工程菌,酶活力較高。該重組工程菌利用全細(xì)胞催化的方式水解魔芋粉制備葡甘低聚糖,通過(guò)單因素優(yōu)化分析,探究不同酶解溫度、酶解時(shí)間、pH值、底物濃度以及加酶量對(duì)魔芋粉水解率的影響。單因素優(yōu)化結(jié)果顯示,酶解反應(yīng)的最佳溫度為50℃,最佳時(shí)間為12 h,最佳pH值為7.0,最佳底物濃度為3%,最佳酶量為1000U。由于酶解時(shí)間和加酶量這兩個(gè)因素對(duì)魔芋粉水解率的影響顯著性不明顯,選取反應(yīng)溫度（A）、底物濃度（B）、pH值（C）為三個(gè)變量,以酶解反應(yīng)的水解率Y為響應(yīng)面值,利用Design-Expert軟件根據(jù)BOx-Behnken的原理設(shè)計(jì)試... 

【文章來(lái)源】：河南師范大學(xué)河南省

【文章頁(yè)數(shù)】：66 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－１?Ｄ－甘露糖的標(biāo)準(zhǔn)曲線??Ｆｉｇ．２－１?Ｔｈｅ?Ｓ化ｎｄａｒｄ?ｃｕｒｖｅ?ｏｆ?Ｄ－ｍａｎｎｏｓｅ??

?巧解時(shí)間００??圖２－２溫度對(duì)水解率的影響?圖２－３反應(yīng)時(shí)間對(duì)水解率的影響??Ｆｉｇ．?２－２?Ｅｆｆｅｃｔｓ?ｏｆ?化ｍｐｅｒａＵｉｒｅ?ｏｎ?ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ?巧ｇ．?２－３?巨ｆｆｅｃｔｓ?ｏｆ?ｈｙｄｒｏｌｙｔｉｃ?ｔｉｍｅ?ｏｎ?ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ?ｒａｈ??ｒ３化??驗(yàn)了不同ｐＨ值對(duì)水解率的影響（圖２－４）。圖２－４表明，低于ｐＨ?７．０，水解率逐漸上升，??之后，隨著ｐＨ值的升高，水解率卻有所下降。由于酶促反應(yīng)的反應(yīng)條件比較溫和，中??性ｐＨ更加適合該反應(yīng)的進(jìn)行，酸性或者堿性ｐＨ都容易使得酶活降低，致使水解率降??低。所Ｗ，選化ｐＨ?７．０為最佳反應(yīng)ｐＨ值。??（４）

?巧物巧度從）??圖２－４?ＰＨ對(duì)水解率的影響?圖２品吁物產(chǎn)＜章嚴(yán)解率白甲Ｐ向??＾?，?，?，，，．?Ｆｉｇ．?２－５?Ｅｆｆｅｃ化?ｏｆ?ｓｕｂｓｔｒａ化?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ?ｏｎ??Ｆｉｇ．?２＊４?Ｅｆｆｅｃｔｓ?ｏｆ?ｐＨ?ｖａ山ｅ?ｏｎ?ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ?ｒａ化?ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ?ｒａ化?．??４０??３５??．?化?－??ｇ２ｓＫ??斯２０??１０??５??０??－??５００?１０００?２０００?３０００?４０００?５０００??ｉｎｗｔ?（ｕ）??圖２－６加酶量對(duì)水解率的影響??巧ｇ．?２－６?巨ｆｆｅｃｔｓ?ｏｆ?ｅｎｚｙｍｅ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ?ｏｎ?ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ?巧化??２．４．４魔芋粉酶解的喃應(yīng)面試驗(yàn)??（１）響應(yīng)面試驗(yàn)結(jié)果??選�。玻矗硢我蛩卦囼�(yàn)結(jié)果中對(duì)魔芋粉水解率較為思著的３個(gè)因素，根據(jù)響應(yīng)面法??中Ｂｏｘ－Ｂｅｈｎｋｅｎ的原理設(shè)計(jì)試驗(yàn)方案，選�。保穫�(gè)試驗(yàn)點(diǎn)開(kāi)始試驗(yàn)。各因素所選的水平??值如表２－１。試驗(yàn)當(dāng)中的變量分別為反應(yīng)溫度（Ａ）、底物濃度（Ｂ）、ｐＨ值（Ｃ），Ｗ??酶解反應(yīng)的水解率Ｙ為響應(yīng)面值，尖驗(yàn)方案及結(jié)果如表２－２。??由表２－２可知，在這１７組試驗(yàn)中，魔芋粉的水解率最低為１９．５３％，含量在４０％Ｗ??上的有５組

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]外源寡糖對(duì)山羊瘤胃液酶活及粗飼料瘤胃降解率的影響[J]. 林英庭,祁茹,王利華,朱風(fēng)華,趙發(fā)盛,胡靜.  動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào). 2014(12)
[2]飼料中添加甘露寡糖對(duì)團(tuán)頭魴幼魚(yú)生長(zhǎng)性能、抗氧化能力和腸道菌群的影響[J]. 孫盛明,謝駿,朱健,戈賢平,江曉浚.  動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào). 2014(11)
[3]全細(xì)胞催化制備單糖酸及其鑒定[J]. 王滎,周鑫,徐勇,勇強(qiáng),余世袁.  林產(chǎn)化學(xué)與工業(yè). 2014(05)
[4]氣相色譜法及其應(yīng)用[J]. 王芹,馮景春,馮開(kāi).  廣東化工. 2014(12)
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[6]酶法制備魔芋甘露寡糖和產(chǎn)物分析[J]. 何丹,郭熊,楊雙蓮,李俊俊,黃遵錫,唐湘華.  中國(guó)釀造. 2013(05)
[7]酶法制備甘露低聚糖[J]. 康立新,周玉玲,馬立新.  食品科技. 2012(07)
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[9]響應(yīng)曲面法優(yōu)化酸法魔芋葡甘露聚糖水解工藝[J]. 羅清楠,譚玉榮,劉宏,龐杰,趙國(guó)華.  食品科學(xué). 2012(06)
[10]微生物全細(xì)胞催化技術(shù)在工業(yè)生產(chǎn)中的應(yīng)用[J]. 萬(wàn)紅貴,趙宗松,蔣導(dǎo)航,袁建鋒,吳啟賜.  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2011(04)

博士論文
[1]黑曲霉酸性β-甘露聚糖酶及制備魔芋低聚糖研究[D]. 李劍芳.江南大學(xué) 2007

碩士論文
[1]香蕉低聚糖的分離、結(jié)構(gòu)鑒定及品種比較[D]. 唐雪娟.華南理工大學(xué) 2014
[2]魔芋低聚糖的制備及其性質(zhì)研究[D]. 張琳.吉林大學(xué) 2013
[3]β-甘露聚糖酶基因的克隆、表達(dá)及酶學(xué)性質(zhì)研究[D]. 胡文波.河南師范大學(xué) 2012
[4]產(chǎn)β-甘露聚糖酶內(nèi)生菌的篩選及酶學(xué)特性研究[D]. 趙丹丹.河南師范大學(xué) 2011
[5]半乳甘露低聚糖的酶法制備及其應(yīng)用研究[D]. 何紫姣.暨南大學(xué) 2011
[6]魔芋葡甘露寡糖的酶解制備及其分離純化的研究[D]. 王紹云.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2009
[7]大棗低聚糖的分離純化及結(jié)構(gòu)研究[D]. 蔣梅峰.山西大學(xué) 2009
[8]β-甘露聚糖酶的生產(chǎn)及其酶法制備魔芋葡甘露低聚糖的研究[D]. 徐春梅.江南大學(xué) 2008
[9]瓜爾膠的接枝改性和酶解法制備半乳甘露低聚糖的研究[D]. 趙曉峰.廣西大學(xué) 2008



本文編號(hào)：3068132