發(fā)布時(shí)間：2021-02-20 13:20

　　大黃魚（Larimichthys crocea）作為我國(guó)主要海洋養(yǎng)殖魚類,隨著養(yǎng)殖規(guī)模擴(kuò)大、養(yǎng)殖產(chǎn)量增多,病害問(wèn)題也日益突出,嚴(yán)重制約了大黃魚產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。解決病害問(wèn)題的關(guān)鍵是提高魚體自身免疫力,加強(qiáng)大黃魚免疫機(jī)制的理論研究,有利于提升大黃魚疾病控制與預(yù)防水平,促進(jìn)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)持續(xù)健康發(fā)展。本文分析了大黃魚小G蛋白家族中Rab5A、Rab11和Rab13三個(gè)基因的分子結(jié)構(gòu)以及特征;運(yùn)用熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)了刺激隱核蟲（Cryptocaryon irritans）、滅活的副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus）和脂多糖LPS、射病毒類似物poly I:C進(jìn)行免疫刺激后,不同組織mRNA水平表達(dá)變化;在大腸桿菌中進(jìn)行了Rab5A基因重組表達(dá),利用純化的重組蛋白制備了多克隆抗體,并用Elisa方法確定最佳工作濃度及標(biāo)定抗體效價(jià),用于Western blot檢測(cè)Rab5A蛋白組織表達(dá)量以及在免疫刺激后蛋白質(zhì)水平表達(dá)變化。本研究還采用GST pull-down技術(shù)初步分析大黃魚Rab5A互作蛋白,運(yùn)用免疫電鏡方法觀察了大黃魚不同組織/器官中Rab5A和Rab13的亞細(xì)胞定位。結(jié)... 

【文章來(lái)源】：集美大學(xué)福建省

【文章頁(yè)數(shù)】：89 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

RabGTPase作用機(jī)理Fig.1-1RegulationmechanismofRabGTPase.

合了 GST 融合蛋白的 Glutathione Sepharose 4B 介對(duì)還原型谷胱甘肽（50 mM Tris-HCl，10 mM）析。檢測(cè)分析 得到的蛋白質(zhì)洗脫液，進(jìn)行冷凍干燥濃縮，SDS-P染色后，割取目的片段用于質(zhì)譜分析質(zhì)譜分析NA 的提取與檢測(cè)A，分析 28S 、18S 條帶確認(rèn)完整性（如圖 2-1合成。檢測(cè)吸光度 OD260 和 OD280、OD230 比值

ab5A 基因 ORF 擴(kuò)增瓊脂糖凝膠CR products of the ORF of Rab5A 性擴(kuò)增產(chǎn)物；M. 2000bp DNAmarker. conserved fragment was amplified; M.22bp，包括一個(gè) 651 bp 的 OR提交 GenBank，登錄號(hào)為 K列為 GACAGTGT，符合 Ko 320bp，其中 3′端包含終止密ab5A 基因的基因組序列 6281T-AG。結(jié)果與其他硬骨魚結(jié)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[9]Rho小G蛋白相關(guān)激酶的結(jié)構(gòu)與功能[J]. 閆慧娟,勿呢爾,莫日根,范麗菲.  中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào). 2014(07)
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碩士論文
[1]Rab6蛋白在果蠅S2細(xì)胞抗病毒吞噬中的作用[D]. 唐文.浙江大學(xué) 2012



本文編號(hào)：3042829