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滲透壓應激對金錢魚腎細胞的影響及抗菌肽鐵調(diào)素的研究

發(fā)布時間:2021-02-07 01:36
  金錢魚(Scatophagus argus)是一種鹽度適應性極強的廣鹽性硬骨魚類,尤其對急性鹽度脅迫有極強的耐受力,使其非常適合用于研究硬骨魚類滲透壓調(diào)節(jié)機制。研究這種調(diào)節(jié)機制不但可以補充完善魚類細胞生理學、發(fā)育生物學等基礎(chǔ)研究,同時,掌握魚類滲透壓調(diào)節(jié)方式和機理,可以為魚類鹽度訓養(yǎng)提供理論依據(jù),對海水經(jīng)濟魚類的淡化養(yǎng)殖非常有意義。1.為更好地了解魚類的滲透調(diào)節(jié)機制及能更精確地分析魚類適應滲透壓的特性,建立了金錢魚腎細胞系(SK)并傳代至40代。從細胞水平對金錢魚腎細胞在滲透壓應激作用下的調(diào)節(jié)機制做進一步分析。金錢魚腎細胞大都為成纖維樣細胞,具有正常的二倍體核型(2n=48)。金錢魚低滲適應細胞系(SK-la)誘導產(chǎn)生于低滲培養(yǎng)基(150 m Osm)。我們利用顯微鏡觀察、流式細胞儀和Na+/K+-ATP酶活檢測,探討不同滲透壓(150,300和450 m Osm)對廣鹽性硬骨魚類金錢魚腎細胞SK、SK-la和淡水硬骨魚類草魚腎細胞CIK形態(tài)、細胞增殖、細胞體積變化及細胞損傷的影響。SK細胞在低滲培養(yǎng)基(150 m Osm)中形態(tài)明顯變小,且... 

【文章來源】:上海海洋大學上海市

【文章頁數(shù)】:64 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

滲透壓應激對金錢魚腎細胞的影響及抗菌肽鐵調(diào)素的研究


不同滲透壓條件處理SK細胞、CIK細胞和SK-la細胞24小時

陽離子蛋白,前肽,信號肽,等電點


corresponding to the predicted signal peptide is boxed, whereas the prodomain region is in cursiveletters and the mature peptides shaded grey. Nucleotides and amino acids are numbered on the left ofthe sequences.SA-hepcidin1 和 SA-hepcidin2 都含有三個區(qū)域:信號肽(24 aa),前結(jié)構(gòu)域(44aa)和成熟肽(SA-hepcidin1 為 26 aa, SA-hepcidin2 為 24 aa)。SA-hepcidin1 和SA-hepcidin2 信號肽剪切位點預測在 Ala24和 Val25之間,SA-hepcidin1 的前肽剪切位點預測在 Arg64和 Gln65之間,SA-hepcidin2 的前肽剪切位點預測 Arg64和 Asn65之間。SA-hepcidin1 多肽的理論等電點(PI)為 8.75,為陽離子蛋白;SA-hepcidin2多肽的理論等電點(PI)為 8.23,也為陽離子蛋白。SA-hepcidin1 和 SA-hepcidin2 的氨基酸序列比對結(jié)果都有八個相對保守的半胱氨酸殘基(圖 2-2),SA-hepcidin1 和 SA-hepcidin2 的一致性和相似性分別為 62 %和 72 %,SA-hepcidin1 N 端序列為(Q-S-H-L-S-M),與假定的鐵離子調(diào)控序列相似(Q-S/I-H-L/I-S/A-L)[84],而 SA-hepcidin2 沒有這段序列。

氨基酸序列,哺乳動物,氨基酸序列,比目魚


37圖 2-3 金錢魚鐵調(diào)素與一些魚及哺乳動物鐵調(diào)素的氨基酸序列比對;驇斓顷懱柸缦拢汉u-1(BAH03289.1),海鯛-2(BAH03290.1),海鯛-3(BAH03291.1), 海鯛-4(BAH03292.1),大菱鲆-1(CAJ34592.1), 大菱鲆-2(AFE88622.1),比目魚-1 (AAV37453.1), 比目魚-2(AAV37454.1),河豚魚(XP_003980066.1),三文魚(AAO85553.1),斑馬魚(AAN10302.1),鼠(NP_115930.1),猴子(XP_001094273.1),人(NP_066998.1)。

【參考文獻】:
期刊論文
[1]金錢魚腎細胞系的建立及生長特性研究[J]. 張瑩瑩,梁雪梅,曾文剛,張俊彬.  海洋與湖沼. 2014(03)
[2]硬骨魚類滲透調(diào)控的研究進展[J]. 劉珊,李冰,張成鋒,朱健.  安徽農(nóng)業(yè)科學. 2011(20)
[3]斑點叉尾腎臟組織細胞系的建立及其生物學特性[J]. 曾令兵,李曉莉,張林,徐進,張燕.  中國水產(chǎn)科學. 2009(01)
[4]Detection of Grass Carp Hemorrhage Virus (GCHV) from Vietnam and Comparison with GCHV Strain from China[J]. 張奇亞.  High Technology Letters. 2003(02)
[5]草魚腎組織細胞系CIK的建立及其生物學特性[J]. 左文功,錢華鑫,許映芳,杜森英,楊先樂.  水產(chǎn)學報. 1986(01)



本文編號:3021427

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