魚類細(xì)菌性疾病一直是限制水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的重要因素之一,其中嗜水氣單胞菌（Aeromonas hydrophila）是淡水中一種常見的條件致病菌,而利用益生菌替代抗生素來防治疾病在養(yǎng)殖業(yè)上得到高度關(guān)注。本實(shí)驗(yàn)室從草魚（Ctenopharyngodon idella）腸道中分離出一株枯草芽孢桿菌（Bacillus Subtllis）Ch9,發(fā)現(xiàn)其對(duì)草魚的生長(zhǎng),免疫等有良好的益生作用。本文主要研究了Ch9菌株對(duì)感染嗜水氣單胞菌的草魚腸道細(xì)胞凋亡的影響。分析了草魚口灌枯草芽孢桿菌3天后,用嗜水氣單胞菌口灌攻毒的結(jié)果。實(shí)驗(yàn)分為3組:對(duì)照組（Control）,第1、3、5、6天口灌磷酸緩沖液（PBS）;Ah組（A.hydrophila group）,第1、3、5天口灌PBS后第6天口灌嗜水氣單胞菌;Bs+Ah組（B.Subtllis+A.hydrophila group）,第1、3、5天口灌枯草芽孢桿菌Ch9后第6天口灌嗜水氣單胞菌。收集嗜水氣單胞菌攻毒后0h,12h,24h,48h,72h和96h的草魚腸道組織,應(yīng)用原位末端標(biāo)記法（TUNEL）測(cè)定細(xì)胞凋亡,實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)caspase-... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：56 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

口灌枯草芽孢桿菌對(duì)受嗜水氣單胞菌感染的草魚腸上皮細(xì)胞凋亡的影響

圖 2 口灌枯草芽孢桿菌對(duì)受嗜水氣單胞菌感染的草魚腸上皮細(xì)胞的 TUNEL 陽性細(xì)胞率的影響Fig. 2 Effect of orally Bacillus subtilis on the rate of intestinal TUNEL-positive cells ofCtenopharyngodon idellus challenged with Aeromonas hydrophilaControl：對(duì)照組口灌 PBS；A.hydrophila：嗜水氣單胞菌攻毒組；B. subtilis + A.hydrophila：枯草芽孢桿菌預(yù)處理后攻毒組，在 0h，12h，24h，48h，72h，96h TUNEL 陽性細(xì)胞的比例，數(shù)據(jù)表示為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差，P＜0.05Control: oral PBS; A.hydrophila: challeged with Aeromonas hydrophila; B. subtilis + A.hydrophila:pre-treated with B. subtilisand challeged with Aeromonas hydrophila. The rate of TUNEL-positive cells at 0h, 12h,24h, 48h, 72h and 96h, Data shown represent mean ± SD, P＜0.053.1.2 Caspase-3，caspase-8 和 bcl-2 基因表達(dá)口灌枯草芽孢桿菌的草魚，在嗜水氣單胞菌攻毒后 caspase-3，caspase-8 和bcl-2 的基因表達(dá)詳見圖 3。實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 分析 caspase-3，caspase-8 和 bcl-2的 mRNA 轉(zhuǎn)錄水平，與對(duì)照組相比，受嗜水氣單胞菌感染的兩組草魚腸細(xì)胞的

22 3 口灌枯草芽孢桿菌對(duì)受嗜水氣單胞菌感染的草魚腸上皮細(xì)胞的 caspase-3，caspa和 bcl-2 基因轉(zhuǎn)錄水平的影響Fig.3 Effect of orally Bacillus subtilis on intestinal caspase-3, caspase-8 and bcl-2 genrelative transcriptional level of Ctenopharyngodon idellus challenged with Aeromonahydrophila）caspase-3 基因在攻毒后 0h，12h，24h，48h，72h，96h 的相對(duì)表達(dá)量；（b）caspase-8 基因在攻12h，24h，48h，72h，96h 的相對(duì)表達(dá)量；（c）bcl-2 基因在攻毒后 0h，12h，24h，48h，72h，9相對(duì)表達(dá)量。數(shù)據(jù)表示為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差，P＜0.05After challeged with Aeromonas hydrophila at 0h, 12h, 24h, 48h, 72h and 96h , (a) Relative expression opase-3 (b) Relative expression of caspase-8 (c) Relative expression of bcl-2. The results shown are means P＜0.05

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]益生芽孢桿菌對(duì)草魚腸黏膜結(jié)構(gòu)的保護(hù)作用[J]. 黃燦,張忠海,吳淑勤,張丁,李思思,陳孝煊,吳志新.  水生生物學(xué)報(bào). 2017(04)
[2]急性熱應(yīng)激對(duì)草魚腎細(xì)胞的影響[J]. 童娜,尹曉燕,李大鵬,湯蓉.  華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2014(04)
[3]嗜水氣單胞菌防控技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 周宇,周秋白.  生物災(zāi)害科學(xué). 2012(02)



本文編號(hào)：3019922