脂多糖及銅離子脅迫下厚殼貽貝補體C3分子表達研究
發(fā)布時間:2021-01-31 05:53
補體系統(tǒng)作為一個重要的人體先天免疫系統(tǒng),在防御宿主病原體方面,發(fā)揮著不可替代的功能。補體C3是補體系統(tǒng)中最關(guān)鍵的分子,其作用主要體現(xiàn)在免疫調(diào)節(jié),免疫防疫以及免疫病理學(xué)方面。補體C3分子在一些無脊椎動物中已被發(fā)現(xiàn),但在雙殼類的研究還有待進一步的探索。厚殼貽貝(Mytilus coruscus)被視為中國最重要的經(jīng)濟類貽貝物種之一,廣泛分布于黃海,朝鮮半島及日本北海道水域。近年來,厚殼貽貝正在遭受由各種環(huán)境變化引起的疾病危害,其中包括各種生物壓力(細(xì)菌和病毒)和非生物類壓力(熱休克或冷休克,高滲壓力,食物缺乏,氧含量降低,重金屬濃度,有機或無機類化學(xué)物質(zhì)),這種種因素最終導(dǎo)致厚殼貽貝嚴(yán)重的經(jīng)濟損失;诋(dāng)前厚殼貽貝的養(yǎng)殖背景,本文通過克隆厚殼貽貝補體C3 MC-C3基因c DNA全長及脂多糖刺激下,銅離子脅迫下厚殼貽貝組織內(nèi)補體C3 MC-C3表達情況分析,旨在填補補體C3基因在厚殼貽貝中的研究空白,同時為厚殼貽貝面對細(xì)菌感染及海洋污染現(xiàn)狀對養(yǎng)殖技術(shù)的改進等方面提供應(yīng)用型的指導(dǎo)。具體研究成果如下:本文采用RACE技術(shù),首次獲得了厚殼貽貝MC-C3基因c DNA全長,并對其功能域,生物學(xué)信息...
【文章來源】:浙江海洋大學(xué)浙江省
【文章頁數(shù)】:58 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
引言
第一章 文獻綜述
1.1 補體系統(tǒng)概述
1.2 補體C3概述
1.2.1 補體C3基因和分子結(jié)構(gòu)特征
1.2.2 補體C3功能
1.2.2.1 補體C3的生物學(xué)活性
1.2.2.2 C3相關(guān)疾病
1.3 厚殼貽貝概述
1.3.1 厚殼貽貝的生物學(xué)特性
1.3.2 厚殼貽貝的營養(yǎng)成分
1.3.3 養(yǎng)殖現(xiàn)狀
1.4 研究目的與意義
1.4.1 研究目的
1.4.2 研究意義
第二章 厚殼貽貝補體C3基因cDNA克隆表達
2.1 實驗材料
2.1.1 樣品材料
2.1.2 實驗試劑及儀器
2.2 厚殼貽貝總RNA提取
2.2.1 前期準(zhǔn)備
2.2.2 總RNA提取
2.2.3 RNA逆轉(zhuǎn)錄
2.2.4 厚殼貽貝C3核心序列擴增
2.3 RACE獲得C3基因cDNA的全長
2.4 PCR產(chǎn)物的純化與克隆
2.5 生物信息分析
2.6 結(jié)果與討論
2.6.1 厚殼貽貝C3基因克隆及分子特征分析
2.6.2 厚殼貽貝C3系統(tǒng)進化樹分析
第三章 厚殼貽貝C3基因組織特異性表達
3.1 實驗材料
3.1.1 實驗樣品
3.1.2 實驗試劑與儀器
3.1.2.1 實驗試劑
3.1.2.2 實驗儀器
3.2 實驗方法
3.2.1 厚殼貽貝組織總RNA提取
3.2.2 cDNA模板合成
3.2.3 熒光定量PCR引物設(shè)計
3.2.4 實時熒光定量
3.2.5 熒光數(shù)據(jù)分析
3.3 結(jié)果與討論
第四章 脂多糖及銅離子脅迫下厚殼貽貝C3基因表達
4.1 實驗材料
4.1.1 樣品材料
4.1.2 實驗儀器及試劑
4.2 實驗方法
4.2.1 銅離子脅迫
4.2.2 脂多糖刺激
4.2.3 樣品處理
4.2.4 熒光定量PCR
4.2.5 熒光數(shù)據(jù)分析
4.3 結(jié)果分析與討論
結(jié)論
致謝
在讀期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文及研究成果
參考文獻
本文編號:3010319
【文章來源】:浙江海洋大學(xué)浙江省
【文章頁數(shù)】:58 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
引言
第一章 文獻綜述
1.1 補體系統(tǒng)概述
1.2 補體C3概述
1.2.1 補體C3基因和分子結(jié)構(gòu)特征
1.2.2 補體C3功能
1.2.2.1 補體C3的生物學(xué)活性
1.2.2.2 C3相關(guān)疾病
1.3 厚殼貽貝概述
1.3.1 厚殼貽貝的生物學(xué)特性
1.3.2 厚殼貽貝的營養(yǎng)成分
1.3.3 養(yǎng)殖現(xiàn)狀
1.4 研究目的與意義
1.4.1 研究目的
1.4.2 研究意義
第二章 厚殼貽貝補體C3基因cDNA克隆表達
2.1 實驗材料
2.1.1 樣品材料
2.1.2 實驗試劑及儀器
2.2 厚殼貽貝總RNA提取
2.2.1 前期準(zhǔn)備
2.2.2 總RNA提取
2.2.3 RNA逆轉(zhuǎn)錄
2.2.4 厚殼貽貝C3核心序列擴增
2.3 RACE獲得C3基因cDNA的全長
2.4 PCR產(chǎn)物的純化與克隆
2.5 生物信息分析
2.6 結(jié)果與討論
2.6.1 厚殼貽貝C3基因克隆及分子特征分析
2.6.2 厚殼貽貝C3系統(tǒng)進化樹分析
第三章 厚殼貽貝C3基因組織特異性表達
3.1 實驗材料
3.1.1 實驗樣品
3.1.2 實驗試劑與儀器
3.1.2.1 實驗試劑
3.1.2.2 實驗儀器
3.2 實驗方法
3.2.1 厚殼貽貝組織總RNA提取
3.2.2 cDNA模板合成
3.2.3 熒光定量PCR引物設(shè)計
3.2.4 實時熒光定量
3.2.5 熒光數(shù)據(jù)分析
3.3 結(jié)果與討論
第四章 脂多糖及銅離子脅迫下厚殼貽貝C3基因表達
4.1 實驗材料
4.1.1 樣品材料
4.1.2 實驗儀器及試劑
4.2 實驗方法
4.2.1 銅離子脅迫
4.2.2 脂多糖刺激
4.2.3 樣品處理
4.2.4 熒光定量PCR
4.2.5 熒光數(shù)據(jù)分析
4.3 結(jié)果分析與討論
結(jié)論
致謝
在讀期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文及研究成果
參考文獻
本文編號:3010319
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