發(fā)布時(shí)間：2021-01-25 13:58

　　近年來,隨著高密度集約化養(yǎng)殖模式的快速發(fā)展,為了降低飼料成本,生產(chǎn)中廣泛采用高能低蛋白飼料,通常就會(huì)誘發(fā)一些魚體脂代謝紊亂和生理異常等問題,嚴(yán)重的還可能導(dǎo)致魚體脂肪肝,使魚生長(zhǎng)速度減慢、餌料系數(shù)升高、抗病能力減弱,還會(huì)引發(fā)機(jī)體的炎癥反應(yīng)。這一系列的問題會(huì)給養(yǎng)殖戶的實(shí)際生產(chǎn)造成重大的損失。因此,尋找可以預(yù)防或緩解脂代謝功能障礙的解決辦法,對(duì)于水產(chǎn)養(yǎng)殖的可持續(xù)健康發(fā)展顯得尤為重要。鑒于此,本試驗(yàn)旨在探討團(tuán)頭魴腫瘤壞死因子（Tumor necrosis factor alpha,TNF-α）的克隆及分子生物學(xué)分析,以及甘草提取物對(duì)TNF-α介導(dǎo)的團(tuán)頭魴脂代謝及相關(guān)基因的調(diào)控作用。本研究分為以下三個(gè)試驗(yàn)部分:試驗(yàn)一 團(tuán)頭魴腫瘤壞死因子（TNF-α）基因克隆及與脂代謝相關(guān)基因表達(dá)的分析腫瘤壞死因子α（TNF-α）是一種與炎癥和脂質(zhì)代謝相關(guān)的細(xì)胞因子。本實(shí)驗(yàn)采用RACE技術(shù)和實(shí)時(shí)熒光定量PCR的方法,對(duì)團(tuán)頭魴TNF-α基因全序列進(jìn)行克隆。其TNF-α基因序列全長(zhǎng)1466 bp,含有723 bp的開放閱讀框,且編碼240個(gè)氨基酸,預(yù)測(cè)其蛋白分子量（Mw）為26457.90 kDa,等電點(diǎn)（PI）為6... 

【文章來源】：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：87 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１脂肪細(xì)胞中ＴＮＦ－ａ對(duì)脂代謝的影響ＰＩ??Ｆｉｇ?１?Ａｃｔｉｏｎｓ?ｏｆ?ＴＮＦ－ａ?ｏｎ?ｌｉｐｉｄ?ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ?ｉｎ?ａｄｉｐｏｃｙｔｅｓ??

文獻(xiàn)綜述??（Ｄｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅ，ＤＡＧ）。然后?ＨＳＬ?再將?ＤＡＧ?水角？？成甘汕單醋（Ｍｏｎｏｇｌｙｃｅｒｉｄｅ，ＭＡＧ），??最后ＭＡＧ被ＭＧＬ進(jìn)一步分解生成脂肪酸（Ｆａｔｔｙ?ａｃｉｄ，?ＦＡ）（如圖２所示）。此外，??一些脂滴蛋白，如包被蛋白Ｐｅｒｉｌｉｐｉｎ，是脂肪細(xì)胞中脂滴表面含量比較豐富的一種蛋??白，這對(duì)于脂滴核心甘油三酯的儲(chǔ)存和分解起著很重要的作川，也是ＨＳＬ發(fā)揮脂肪??分解作用必不可少的，能夠促進(jìn)脂肪的分解［｜３］。??脂類分解過程中，細(xì)胞內(nèi)部的ＡＴＰ在腺苷酸環(huán)化酶（Ａｄｅｎｙｌａｔｅ?ｃｙｃｌａｓｅ，?ＡＣ）的??激活作用下轉(zhuǎn)變成環(huán)憐酸腺苷（ｃｙｃｌｉｃ?Ａｄｅｎｏｓｉｎｅ?ｍｏｉｉｏｐｌｉｏｓｐｌｉａｔｅ，ｃＡＭＰ），ｃＡＭＰ?接??著作用于蛋白激釀八（？１＾丨１１１＜丨１＾６八，丨＞１＜八），諒后與憐酸化的包被蛋丨１：彳八－起作用??于ＨＳＬ［Ｗ。作為脂酶的一個(gè)抑制物，包被蛋白Ａ還參與ＨＳＬ的水解過程。在激素的??刺激下

送至外周組織，而磷脂是脂蛋白的合成組裝的必需原件。日本對(duì)蝦的研究表明，飼中的磷脂在一定程度上可促進(jìn)甘油三酯的轉(zhuǎn)運(yùn)％?Ｍ。因此，磷脂在脂代謝中起到很的調(diào)節(jié)作用。??２．２．４膽堿、甜菜堿與蛋氨酸??膽堿、甜菜堿和蛋氨酸三者在體內(nèi)可以相互轉(zhuǎn)化，并且都能為動(dòng)物體提供活性某，因此通過在飼料中添加，動(dòng)物攝食后可以滿足機(jī)體對(duì)甲基的需求。大量研究表這三種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)不僅能夠提高動(dòng)物生長(zhǎng)性能、降低餌料系數(shù)、增強(qiáng)抗病力等，而且脂肪代謝過程中也發(fā)揮著重要作用。膽堿可以作為一種脂肪調(diào)控劑，促進(jìn)肝臟中脂向外運(yùn)輸和脂肪酸的氧化供能，這一功能可以在Ｌｉ等Ｍｌ關(guān)于團(tuán)頭妨脂代謝的實(shí)驗(yàn)得到印證。在肝臟和腎臟中，膽堿會(huì)在相應(yīng)酶的催化作用下生成甜菜堿，而甜菜堿夠通過甲基－轉(zhuǎn)移生成膽堿，因此兩者具有相似的生物學(xué)功能。除此之外，甜菜堿還以促進(jìn)脂肪的動(dòng)員和氧化，且能夠改變機(jī)體脂肪的含量和分布ＩＭ。甜菜堿作為一種？效的甲基供體，參與蛋氨酸的再甲基化過程，提供活性中基并生成蛋氨酸，然后在硫Ｍ酸腺１Ｔ？轉(zhuǎn)移＿作用下生成Ｓ－腺苷甲硫氣酸（Ｓ－Ａｄｅｎｏｓｙｌｍｅｔｌｉｉｏｎｉｎｅ，ＳＡＭ）。氨酸除了能夠合成蛋白質(zhì)之外，還可提供甲基來合成膽堿、肉堿等物質(zhì)。因此三荇間可以相互轉(zhuǎn)化，來滿足機(jī)體的代謝需求??


本文編號(hào)：2999339