本文主要目的在于研究氟化鈉對成年斑馬魚所產(chǎn)生的生殖毒性,為進一步研究氟化物對魚類（水產(chǎn)類）產(chǎn)生的生殖毒性提供理論依據(jù)和經(jīng)驗借鑒。本課題將斑馬魚成魚作為受試動物,選擇氟化鈉作為染毒化合物,開展慢性毒理暴露試驗。首先通過急性毒理試驗確定氟化鈉對于斑馬魚成魚的半數(shù)致死濃度,為慢性毒理試驗中氟的濃度梯度設(shè)置提供必要的依據(jù)和科學(xué)的參考；然后開始慢性毒理試驗,分別在氟化鈉暴露后的45 d和90 d進行相應(yīng)試驗分別運用酶聯(lián)免疫分析（ELISA）、實時熒光定量PCR （QRT-PCR）檢測斑馬魚成魚體內(nèi)相關(guān)基因的表達量變化和激素水平變化,運用普通HE染色技術(shù)觀察斑馬魚成魚性腺（精巢、卵巢）的發(fā)育情況。結(jié)果顯示：在雌性成年斑馬魚體內(nèi)：（1）通過酶聯(lián)免疫分析（ELISA）檢測發(fā)現(xiàn)氟化鈉暴露會降低雌性斑馬魚體內(nèi)雌二醇（E2）、卵黃蛋白原（VTG）的含量,而提升睪酮（T）的含量；（2）通過實時熒光定量PCR （QRT-PCR）檢測發(fā)現(xiàn)雌性成年斑馬魚體內(nèi)孕酮（Prg）受體相對表達量隨氟濃度的增加呈現(xiàn)先降后升的趨勢（40 mg/L組表達量降低、80 mg/L組表達量升高）、糖皮質(zhì)激素受體（GR） mRNA相對表達... 

【文章來源】：山西農(nóng)業(yè)大學(xué)山西省

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１下丘腦－垂體－性腺（ＨＰＧ）軸作用機制模型圖??Ｆｉｇ?１－１?Ｔｈｅ?ｍｅｃｈａｎｉｓｍ?ｏｆ?ａｃｔｉｏｎ?ｏｆ?化ｅ?ｈｙｐｏ化ａｌａｍｕｓ?－?ｐｉｔｕｉｔａｒｙ?－ｇｏ打ａｄ?ａｘｉｓ??

Ｓｐ巧ｍａｔｏｃｙｔｅ；Ｓｔ．Ｓｐｅｒｍａｔｉｄｓ；Ｓｐ．Ｓｐｅｒｍａ化ｚｏａ；ＳＣ．Ｓｅｒｔｏｌｉ?Ｃｅｌｌｓ；ＬＣ丄ｅｙｄｉｇ?Ｃｅｌｌｓ；ＳＴ．Ｓｅｍｍｉｆｅｒｏｕｓ??Ｔｕｂｕｌｅｓ；?Ｓｃａｌｅ?ｂａｒ＝?１０?｜ｘｍ．??圖４－１為氣化銷暴露４５?ｄ、９０?ｄ后成年雄性斑馬魚精巢顯微結(jié)構(gòu)的變化。其中Ａ圖??顯示４５?ｄ后對照組成年雄性斑馬魚精巢中含有大量成熟精子、精細胞，兩類細胞分布??相對集中；精母細胞（初級精母細胞、次級精母細胞）的數(shù)量相對較少，且各類＾胞分??布較均勻。Ｂ圖顯示４５?ｄ后相對于對照組而言，氣離子濃度為４０?ｍｇ／Ｌ組成年雄｛＾斑馬??魚精巢中成熟精子、精細胞的數(shù)量相對減少，而支持細胞、精母細胞（初級精母細胞、??次級精母細胞）、精原細胞、間質(zhì)細胞、生精小管相對增多；同時各類細胞的分布狀態(tài)??也相對集中、精子出現(xiàn)濃縮。Ｃ圖顯示４５?ｄ后相對于對照組而言，氣離子濃度為８０?ｍｇ／Ｌ??組成年雄性斑馬魚精巢中成熟精子、精細胞的數(shù)量急劇減少

３下丘腦－垂體－性腺（ＨＰＧ）袖的概述??下丘腦－垂體－性腺（ＨＰＧ）軸是一個完整而協(xié)調(diào)的神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)，其調(diào)節(jié)機制如??圖１所示，下丘腦、垂體、性腺Ｈ個不同的器官分工合作，分泌不同的激素，共同完成??對動物機體生殖活動的調(diào)控。其中，下丘腦分泌神經(jīng)生殖激素：促黃體生成素釋放激素??（ＬＨＲＨ）或促性腺激素釋放激素（ＧｎＲＨ），作用于垂體前葉；垂體前葉部分（即腺垂??體）則產(chǎn)生促生殖激素：促卵泡生成素（ＦＳＨ）、促黃體生成素（ＬＨ）進而作用于性腺；??性腺分泌生殖激素，卵巢產(chǎn)生雌性激素、孕激素、松弛素（狀）ｔＷ。睪丸則產(chǎn)生睪丸麗。??這就組成了下丘腦－垂體－性腺（ＨＰＧ）軸。??研究發(fā)現(xiàn)，豆腦－垂體－性腺（ＨＰＧ）?軸的活動主要受到ｔ＾＞ｉ下Ｈ種不同的反饋機制的??調(diào)節(jié)：＂長＂反饋調(diào)結(jié)系統(tǒng)、＂短＂反饋調(diào)結(jié)系統(tǒng)、＂超短＂反饋調(diào)結(jié)系統(tǒng)。＂長＂反??饋調(diào)結(jié)系統(tǒng)由性腺和腎上腺產(chǎn)生的激素（主要是雄激素）提供抑制信號；＂短＂反饋調(diào)??結(jié)系統(tǒng)由垂體前葉（腺垂體）合成的促性腺激素提供抑制信號；＂超短＂反饋調(diào)結(jié)系統(tǒng)??由釋放因子直接參與控制激素的產(chǎn)生速率Ｗ７３。??Ａ巧巧?Ｂ雌性＾＾??ｆ?了＆腦?１＾￣Ｉ??人塵??＾雨?Ｅ２?—??ｙ化間巧頌ｙ?八－??Ａ－ｉ－ｆ?Ｈ?Ａ?￣？叛?￣?ｍ?咎??＂Ｌ?Ｔ??４＾寧古爭，??［?ｉｆ－＾?Ｉ?片剛?Ｉ?—公??［卵子Ｉ?ｆ巧喜肯ｉ??圖１－１下丘腦－垂體－性腺（ＨＰＧ）


本文編號：2978325