企鵝珍珠貝是培育優(yōu)質(zhì)海水珍珠的大型育珠母貝,外殼一致的黑色,其黑色素的表達水平可影響珍珠質(zhì)的色澤,進而影響珍珠質(zhì)量。本研究首次半定量分析了黑色素合成相關基因Tyr,Creb,Cdk2,Pax3,Sox10,Bcl-2在企鵝珍珠貝各組織中的表達,克隆了企鵝珍珠貝Creb基因c DNA序列全長,初步研究了黑色素合成的增強劑和抑制劑對企鵝珍珠貝生長性狀的影響,結(jié)果如下:1、采用半定量分析技術(shù)初步研究了黑色素合成通路中的調(diào)控基因Tyr,Creb,Cdk2,Pax3,Sox10,Bcl-2在企鵝珍珠貝外套膜、鰓、閉殼肌、消化盲囊、足、精巢、卵巢7個組織中的表達。半定量結(jié)果顯示:Tyr基因在外套膜和精巢中表達量最高,鰓、閉殼肌卵巢中也有表達,初步判定Tyr基因與珍珠層成色有關。Bcl-2在外套膜、閉殼肌、和精巢中高表達,消化盲囊和卵巢中沒有表達。Creb在各個組織中均有表達,但有差異,在消化盲囊、足、精巢和卵巢中表達量較高。Cdk2在消化盲囊和精巢中表達量較高,其他5個組織中表達較低。Pax3只在足組織中表達,Sox10在鰓和消化盲囊中表達量較高,精巢和卵巢中有少量表達。2、采用RACE-PCR技... 

【文章來源】：廣東海洋大學廣東省

【文章頁數(shù)】：67 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 文獻綜述
    1.1 企鵝珍珠貝的研究進展
        1.1.1 人工育苗的研究
        1.1.2 成貝的養(yǎng)殖研究
        1.1.3 育珠技術(shù)
        1.1.4 分子生物學研究
        1.1.5 殼色及珍珠層研究
    1.2 動物黑色素的產(chǎn)生機制和相關基因的研究
        1.2.1 動物黑色素的產(chǎn)生機制
        1.2.2 動物黑色素生成的相關基因的研究
    1.3 黑色素生成的抑制劑和增強劑
        1.3.1 黑色素生成的抑制劑和增強劑的研究進展
    1.4 本研究的目的和意義
2 企鵝珍珠貝黑色素相關基因片段的半定量分析
    2.1 材料與方法
        2.1.1 主要儀器、試劑及材料
        2.1.2 試驗方法
    2.2 實驗結(jié)果與分析
        2.2.1 各組織RNA提取
        2.2.2 各基因片段的擴增
        2.2.3 各基因片段的半定量表達分析
    2.3 討論
        2.3.1 企鵝珍珠貝與黑色素生物合成
        2.3.2 黑色素合成相關基因在企鵝珍珠貝各組織中的表達
3 企鵝珍珠貝Creb基因的克隆及特征分析
    3.1 主要儀器、試劑及試驗材料
    3.2 實驗方法
        3.2.1 各組織總RNA的提取
        3.2.2 SMART cDNA的合成
        3.2.3 Creb 3’末端序列和 5’末端序列的克隆
        3.2.4 RACE片段的分離、純化
        3.2.5 連接、轉(zhuǎn)化、克隆
        3.2.6 Creb基因的生物信息學分析
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 組織RNA的提取
        3.3.2 SMART cDNA文庫的建立和檢測
        3.3.3 企鵝珍珠貝Creb基因全長的克隆
        3.3.4 企鵝珍珠貝Creb基因的序列分析和蛋白結(jié)構(gòu)預測
    3.4 討論
4 黑色素合成的抑制劑熊果苷和增強劑丙戊酸（VPA）對企鵝珍珠貝幼貝生長性狀的影響
    4.1 主要儀器、試劑及材料
        4.1.1 主要儀器設備
        4.1.2 試劑
        4.1.3 實驗材料
    4.2 試驗方法設計
        4.2.1 處理劑處理樣品幼貝
        4.2.2 餌料的培養(yǎng)
        4.2.3 殼長、殼高、殼寬的測量
        4.2.4 殼長殼高殼寬數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
    4.3 實驗結(jié)果
        4.3.1 幼貝殼長殼寬變化
        4.3.3 殼色變化的幼貝
    4.4 討論
        4.4.1 熊果苷和丙戊酸對黑色素合成的影響
5 結(jié)論
參考文獻
致謝
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導師簡介


【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：2953670