發(fā)布時(shí)間：2021-01-02 21:27

　　企鵝珍珠貝是培育優(yōu)質(zhì)海水珍珠的大型育珠母貝,外殼一致的黑色,其黑色素的表達(dá)水平可影響珍珠質(zhì)的色澤,進(jìn)而影響珍珠質(zhì)量。本研究首次半定量分析了黑色素合成相關(guān)基因Tyr,Creb,Cdk2,Pax3,Sox10,Bcl-2在企鵝珍珠貝各組織中的表達(dá),克隆了企鵝珍珠貝Creb基因c DNA序列全長(zhǎng),初步研究了黑色素合成的增強(qiáng)劑和抑制劑對(duì)企鵝珍珠貝生長(zhǎng)性狀的影響,結(jié)果如下:1、采用半定量分析技術(shù)初步研究了黑色素合成通路中的調(diào)控基因Tyr,Creb,Cdk2,Pax3,Sox10,Bcl-2在企鵝珍珠貝外套膜、鰓、閉殼肌、消化盲囊、足、精巢、卵巢7個(gè)組織中的表達(dá)。半定量結(jié)果顯示:Tyr基因在外套膜和精巢中表達(dá)量最高,鰓、閉殼肌卵巢中也有表達(dá),初步判定Tyr基因與珍珠層成色有關(guān)。Bcl-2在外套膜、閉殼肌、和精巢中高表達(dá),消化盲囊和卵巢中沒(méi)有表達(dá)。Creb在各個(gè)組織中均有表達(dá),但有差異,在消化盲囊、足、精巢和卵巢中表達(dá)量較高。Cdk2在消化盲囊和精巢中表達(dá)量較高,其他5個(gè)組織中表達(dá)較低。Pax3只在足組織中表達(dá),Sox10在鰓和消化盲囊中表達(dá)量較高,精巢和卵巢中有少量表達(dá)。2、采用RACE-PCR技... 

【文章來(lái)源】：廣東海洋大學(xué)廣東省

【文章頁(yè)數(shù)】：67 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 文獻(xiàn)綜述
    1.1 企鵝珍珠貝的研究進(jìn)展
        1.1.1 人工育苗的研究
        1.1.2 成貝的養(yǎng)殖研究
        1.1.3 育珠技術(shù)
        1.1.4 分子生物學(xué)研究
        1.1.5 殼色及珍珠層研究
    1.2 動(dòng)物黑色素的產(chǎn)生機(jī)制和相關(guān)基因的研究
        1.2.1 動(dòng)物黑色素的產(chǎn)生機(jī)制
        1.2.2 動(dòng)物黑色素生成的相關(guān)基因的研究
    1.3 黑色素生成的抑制劑和增強(qiáng)劑
        1.3.1 黑色素生成的抑制劑和增強(qiáng)劑的研究進(jìn)展
    1.4 本研究的目的和意義
2 企鵝珍珠貝黑色素相關(guān)基因片段的半定量分析
    2.1 材料與方法
        2.1.1 主要儀器、試劑及材料
        2.1.2 試驗(yàn)方法
    2.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
        2.2.1 各組織RNA提取
        2.2.2 各基因片段的擴(kuò)增
        2.2.3 各基因片段的半定量表達(dá)分析
    2.3 討論
        2.3.1 企鵝珍珠貝與黑色素生物合成
        2.3.2 黑色素合成相關(guān)基因在企鵝珍珠貝各組織中的表達(dá)
3 企鵝珍珠貝Creb基因的克隆及特征分析
    3.1 主要儀器、試劑及試驗(yàn)材料
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 各組織總RNA的提取
        3.2.2 SMART cDNA的合成
        3.2.3 Creb 3’末端序列和 5’末端序列的克隆
        3.2.4 RACE片段的分離、純化
        3.2.5 連接、轉(zhuǎn)化、克隆
        3.2.6 Creb基因的生物信息學(xué)分析
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 組織RNA的提取
        3.3.2 SMART cDNA文庫(kù)的建立和檢測(cè)
        3.3.3 企鵝珍珠貝Creb基因全長(zhǎng)的克隆
        3.3.4 企鵝珍珠貝Creb基因的序列分析和蛋白結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)
    3.4 討論
4 黑色素合成的抑制劑熊果苷和增強(qiáng)劑丙戊酸（VPA）對(duì)企鵝珍珠貝幼貝生長(zhǎng)性狀的影響
    4.1 主要儀器、試劑及材料
        4.1.1 主要儀器設(shè)備
        4.1.2 試劑
        4.1.3 實(shí)驗(yàn)材料
    4.2 試驗(yàn)方法設(shè)計(jì)
        4.2.1 處理劑處理樣品幼貝
        4.2.2 餌料的培養(yǎng)
        4.2.3 殼長(zhǎng)、殼高、殼寬的測(cè)量
        4.2.4 殼長(zhǎng)殼高殼寬數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
    4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.3.1 幼貝殼長(zhǎng)殼寬變化
        4.3.3 殼色變化的幼貝
    4.4 討論
        4.4.1 熊果苷和丙戊酸對(duì)黑色素合成的影響
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介
導(dǎo)師簡(jiǎn)介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]黃顙魚黑色素細(xì)胞原代培養(yǎng)及遷移相關(guān)基因克隆分析[J]. 程煒軒,許國(guó)煥,熊達(dá),張麗,吳清洋,郭瑩姿,譚文俊.  生態(tài)毒理學(xué)報(bào). 2014(06)
[2]沙皮犬MC1R基因的克隆與序列分析[J]. 劉滿清,劉清神,方梅霞,謝亮,聶慶華.  廣東農(nóng)業(yè)科學(xué). 2014(23)
[3]MC1R基因在中國(guó)草金魚中的遺傳變異及其進(jìn)化分析[J]. 楊竹青,王自蕊,熊六鳳,阮記明,隗黎麗.  江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2014(05)
[4]企鵝珍珠貝游離珍珠顏色與珍珠規(guī)格的相關(guān)性[J]. 李自強(qiáng),石耀華,江勇波,王愛(ài)民,顧志峰.  漁業(yè)科學(xué)進(jìn)展. 2014(01)
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[6]甌江彩鯉體色調(diào)控相關(guān)因子MC1R的克隆與表達(dá)分析[J]. 胡建尊,李康樂(lè),項(xiàng)松平,王劍,朱麗艷,王成輝.  上海海洋大學(xué)學(xué)報(bào). 2013(04)
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[8]黑色素生物合成與酪氨酸酶抑制劑的研究進(jìn)展[J]. 李溯,丁勁松.  中南藥學(xué). 2013(04)
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[10]哈薩克綿羊MC1R和ASIP基因多態(tài)性及表達(dá)量與被毛顏色表型相關(guān)性的研究[J]. 李洪濤,曾獻(xiàn)存,張文祥,趙海璇,惠文巧,劉鋼,羅燕,班謙,趙宗勝,賈斌.  畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2013(03)

博士論文
[1]Wnt1-cre條件性敲除Sox10基因?qū)π∈髢?nèi)耳螺旋神經(jīng)節(jié)發(fā)育的影響及相關(guān)機(jī)制[D]. 毛彥妍.山東大學(xué) 2014
[2]MITF、PAX3和SOX10基因突變致Waardenburg綜合征發(fā)病的分子機(jī)制研究[D]. 張華.中南大學(xué) 2012

碩士論文
[1]α-MSH和cAMP對(duì)泰和烏骨雞黑色素細(xì)胞增殖及黑色素合成的影響研究[D]. 熊渺.江西農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
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[4]兔MC1R基因克隆、遺傳變異及不同時(shí)期表達(dá)水平的研究[D]. 王曉明.揚(yáng)州大學(xué) 2012
[5]大珠母貝和企鵝珍珠貝組織蛋白酶D基因及α-淀粉酶基因的克隆與表達(dá)分析[D]. 潘俐玲.上海海洋大學(xué) 2011
[6]長(zhǎng)牡蠣Calbin和Tyrosinase基因的克隆及其在幼蟲生長(zhǎng)發(fā)育中的表達(dá)分析[D]. 王曉菲.河北大學(xué) 2011
[7]幾種麻醉方法對(duì)企鵝珍珠貝麻醉效果的研究[D]. 萬(wàn)正平.廣東海洋大學(xué) 2010
[8]SOX10基因新突變導(dǎo)致Waardenburg綜合征Ⅱ型家系的分析[D]. 陳艷.中南大學(xué) 2009



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