發(fā)布時(shí)間：2021-01-02 01:23

　　草魚（Ctenopharyngodon idella）是我國(guó)重要的淡水經(jīng)濟(jì)魚類之一。然而,草魚極易受到草魚呼腸孤病毒（grass carp reovirus,GCRV）的感染。干擾素（interferon,IFN）是一種重要的細(xì)胞功能調(diào)節(jié)因子,具有抗病毒、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)等功能。宿主細(xì)胞IFN的誘導(dǎo)產(chǎn)生及其后續(xù)信號(hào)傳導(dǎo)機(jī)制既是機(jī)體抗病毒的第一道防線更是免疫學(xué)研究的核心內(nèi)容之一。TANK結(jié)合激酶1（TANK-binding kinase 1,TBK1）是IKK相關(guān)激酶家族的一員,在機(jī)體抗病毒、抗菌免疫中發(fā)揮重要作用。TBK1可磷酸化下游的干擾素調(diào)節(jié)因子3/7（interferon regulatory factor 3/7,IRF3/7）誘導(dǎo)干擾素的表達(dá)。相對(duì)于哺乳類而言,TBK1信號(hào)通路在硬骨魚中研究較少。本試驗(yàn)通過本地EST數(shù)據(jù)庫(kù)搜索和RACE技術(shù)克隆得到草魚TBK1（CiTBK1）序列;構(gòu)建啟動(dòng)子載體轉(zhuǎn)染細(xì)胞分析啟動(dòng)子活性;用定量RT-PCR法檢測(cè)了CiTBK1的組織差異表達(dá)模式、病毒或細(xì)菌PAMPs刺激后的時(shí)序表達(dá)模式;構(gòu)建過表達(dá)載體轉(zhuǎn)染細(xì)胞研究了CiTBK1介導(dǎo)的免疫反應(yīng)。取得... 

【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：62 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 草魚與草魚出血病的概述
    1.2 先天性免疫的模式識(shí)別受體
        1.2.1 TLR家族
        1.2.2 RLR家族
    1.3 TBK1研究概述
        1.3.1 TBK1的發(fā)現(xiàn)及結(jié)構(gòu)特征
        1.3.2 TBK1的功能
        1.3.3 TBK1信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)控機(jī)制
        1.3.4 魚類TBK1基因的研究進(jìn)展
    1.4 研究目的和意義
第二章 草魚TBK1基因的克隆及其參與IFN-I信號(hào)通路調(diào)節(jié)的功能研究
    2.1 前言
    2.2 材料與方法
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2.2 CiTBK1基因的cDNA序列獲得
        2.2.3 CiTBK1基因組序列擴(kuò)增
        2.2.4 CiTBK1基因序列的生物信息學(xué)分析
        2.2.5 CiTBK1啟動(dòng)子活性驗(yàn)證
        2.2.6 CiTBK1基因體內(nèi)和體外的表達(dá)模式
        2.2.7 CiTBK1過表達(dá)載體的構(gòu)建和轉(zhuǎn)染
        2.2.8 GCRV、poly I:C、LPS和PGN刺激后CiTBK1、CiIRF3、CiIRF7、CiIFN-I、CiMx1定量檢測(cè)
        2.2.9 CiTBK1基因的抗GCRV活性分析
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 CiTBK1基因組及序列分析
        2.3.2 啟動(dòng)子預(yù)測(cè)和驗(yàn)證
        2.3.3 CiTBK1基因的組織差異表達(dá)
        2.3.4 CiTBK1在GCRV感染的脾臟和頭腎組織中的時(shí)序表達(dá)
        2.3.5 CiTBK1在GCRV、poly I:C、LPS和PGN刺激的CIK細(xì)胞中的時(shí)序表達(dá)
        2.3.6 GCRV、poly I:C、LPS和PGN刺激后CiTBK1、CiIRF3、CiIRF7、CiIFN-I和CiMx1定量檢測(cè)
        2.3.7 CiTBK1基因的抗GCRV活性
    2.4 討論
        2.4.1 CiTBK1基因的結(jié)構(gòu)特征
        2.4.2 CiTBK1啟動(dòng)子活性驗(yàn)證
        2.4.3 CiTBK1體內(nèi)外表達(dá)
        2.4.4 CiTBK1參與IFN-I信號(hào)通路調(diào)節(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
縮略詞
致謝
作者簡(jiǎn)介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]草魚呼腸孤病毒分子生物學(xué)研究進(jìn)展[J]. 李永剛,曾偉偉,王慶,殷亮,王英英,石存斌,吳淑勤.  動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2013(04)
[2]草魚呼腸孤病毒的致病機(jī)制及抗病毒新對(duì)策[J]. 郭帥,李家樂,呂利群.  漁業(yè)現(xiàn)代化. 2010(01)
[3]草魚呼腸孤病毒及其免疫防治研究進(jìn)展[J]. 肖波.  魯東大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2010(01)



本文編號(hào)：2952371