石斑魚是我國南部沿海及東南亞地區(qū)重要的海水養(yǎng)殖魚類。石斑魚肉質(zhì)鮮美、蛋白質(zhì)含量高、脂肪含量低,富含人體代謝所必須的多種氨基酸和多種維生素,是一種經(jīng)濟(jì)價(jià)值和營養(yǎng)價(jià)值都很高的食用魚類,隨著石斑魚養(yǎng)殖規(guī)模的擴(kuò)大及養(yǎng)殖環(huán)境的惡化,石斑魚病害頻發(fā)且呈逐年上升趨勢,已成為石斑魚養(yǎng)殖業(yè)可持續(xù)發(fā)展最大的障礙。因此,研究石斑魚自身的免疫相關(guān)基因及其作用機(jī)制,從而提高石斑魚的免疫力和抗病能力,對于石斑魚養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)十分重要。魚類eIF2 α激酶PKR和HRI與魚類的免疫系統(tǒng)密切相關(guān),其中,PKR能激活細(xì)胞的抗病毒能力,調(diào)節(jié)生物體的免疫機(jī)制,本文對斜帶石斑魚（Epinepheluscoioides）的PKR和HHI基因進(jìn)行了克隆表達(dá),并對其功能做了初步研究。本研究利用RACE技術(shù),從石斑魚的脾組織中克隆獲得了PK 與HRI基因全長cDNA。其中石斑魚PKR全長為2151bp,其中ORF區(qū)為1863bp,編碼621個(gè)氨基酸,蛋白的分子量大小為70157.15 D,PI為5.72。石斑魚的HRI基因全長為2467bp,其中ORF區(qū)為1995bp,編碼664個(gè)氨基酸,其蛋白分子量大小為74207.58 D,PI為6.... 

【文章來源】：海南大學(xué)海南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

Sb1ART軟件分析P%R的結(jié)構(gòu)城Fig.3.3TheconserveddomainofP%Ranalyzedby

圖３．４?ＳＭＡＲＴ軟件分析ｆｆｉＷ的結(jié)構(gòu)域??Ｆｉｇ．?３．４?Ｔｈｅ?ｃｏｎｓｅｒｖｅｄ?ｄｏｍａｉｎ?ｏｆ?ＨＲＩ?ａｎａｌｙｚｅｄ?ｂｙ?ＳＭＡＲＴ??３５??

中取材正常生長石斑魚的肝臟、脾臟、腎臟、腦、腸道、心臟、皮膚、肌肉、胃、鰓??和頭腎等１１種組織，抽提組織的ＲＮＡ并逆轉(zhuǎn)錄成ｃＤＮＡ用ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ?ＰＣＲ的方法在??ＲｏｃｈｅＬｉｇｈｔＣｙｃｌｅｒ４８０熒光定量ＰＣＲ儀上進(jìn)行分析，結(jié)果如圖３．７和３．８所示，經(jīng)研??究發(fā)現(xiàn)石斑魚的各組織中均有份？／和？的表達(dá)，其中石斑魚的腸道和胃中Ｗ基??因的表達(dá)量最高，而在脾臟和腸道，胃中／／似表達(dá)量最高，這表明／＾以和？在石??斑魚體內(nèi)是普遍表達(dá)廣泛分布的兩種蛋白。??＾?ｆｏｎｌ＇ｎｌ?—――＿?．?－Ｔ．．??Ｃ?｝?Ｉ，?．??ｉｌｌ］；?—．．．．．．．．．．．．．．．．．：．．＿＾＝術(shù)??〇?２．００Ｅ－０４?Ｎ?ＦＴ??。０?００Ｅ＋０（ｊ?＿?ｉ?ｉ?ｉｄ?ｉ?ｎ?ｉ?ｆｊ?ｉ?ｌｊ?１?Ｌ?ｉ?１１」．．．ｌ．?ｍ?ｉ?ｉ．．．?ＪＩ?ｉ?ｆ?１１?；??ｉ??／??圖３．７石斑魚各組織中ＰＯ的表達(dá)情況??用ＲｅａＵｉｍｅＰＣＲ的方法檢測各組織中的Ｐ／Ｗ？ｎｉＲＮＡ以１８ＳｒＲＮＡ為內(nèi)參，分析各組織中的??／／？／的相對表達(dá)量。每個(gè)樣品重復(fù)３次，得到其標(biāo)準(zhǔn)偏差。??Ｆｉｇ?３．７?Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ?ｏｆ?ＰＫＲ?ｉｎ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｔｉｓｓｕｅｓ??Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ?ＰＣＲ?ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ＰＫＲ?ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｓ?ｉｎ?ｆｌｏｕｎｄｅｒ?ｔｉｓｓｕｅｓ．?Ｔｈｅ?ｓａｍｐｌｅｓ?ｗｅｒｅ?ｎｏｒｍａｌｉｚｅｄ?ｏｎ??ｔｈｅ?ｂａｓｉｓ?ｏｆ?１８Ｓ?ｒＲＮＡ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ．Ｔｉｓ


本文編號：2943370