中華絨螯蟹（Eriocheir sinensis）又稱河蟹,屬甲殼綱,十足目,方蟹科,絨螯蟹屬,目前已經(jīng)成為我國(guó)重要養(yǎng)殖的經(jīng)濟(jì)蟹類。脂類在魚(yú)類、蝦蟹類等水產(chǎn)動(dòng)物的生長(zhǎng)、生理活動(dòng)中發(fā)揮十分重要的作用,而肝胰腺是中華絨螯蟹脂類代謝中心,脂類含量對(duì)其結(jié)構(gòu)、功能和生化組成具有重要影響。脂肪酸結(jié)合蛋白FABP的種類和分布與其結(jié)合的脂肪酸、組織的脂肪酸需求及其參與的功能有著密切關(guān)系。研究表明甲殼動(dòng)物FABP的種類分化較少但參與多種生理過(guò)程,而目前對(duì)其配基及親和力及功能的研究甚少。本研究在已有的研究結(jié)果基礎(chǔ)上,采用RT-PCR技術(shù)從中華絨螯蟹肝胰腺組織中克隆了FABP3、FABP9和FABP10基因,通過(guò)分子生物學(xué)手段構(gòu)建原核表達(dá)載體,經(jīng)過(guò)表達(dá)和純化獲得Es-FABP3、9和10三種可溶性目的蛋白并以此蛋白作為材料,利用穩(wěn)態(tài)熒光光譜對(duì)中華絨螯蟹FABP與脂肪酸等疏水配基的親和力進(jìn)行分析,并在離體條件下通過(guò)熒光定量PCR研究單一脂肪酸對(duì)Es-FABP3、9和10的調(diào)控作用。通過(guò)以上研究闡明中華絨螯蟹FABP與脂肪酸的親和力,脂肪酸代謝相關(guān)基因FABP3、FABP9和FABP10在不同脂肪酸調(diào)控下的相互... 

【文章來(lái)源】：上海海洋大學(xué)上海市

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

中華絨螯蟹菌液PCR瓊脂糖凝膠電泳圖，從左到右依次為pMD-19T-FABP3,

圖 2-3 三種 pMD-19T-FABP 質(zhì)粒雙酶切結(jié)果1：PMD19-T-FABP3 雙酶切條帶；2：PMD3：PMD19-T-FABP10 雙酶切條帶 restriction enzyme results of three kinds of pM: restriction enzyme bone of PMD19-T-FABP3;-T-FABP9; 3: restriction enzyme bone of PMD1達(dá)載體 pET-15b-FABP 菌液 PCR 反應(yīng)9 和FABP10 片段與雙酶切后的原核表ET-15b-FABP3、pET-15b-FABP9 和 pETBP3-F，F(xiàn)ABP3-R；FABP9-F，F(xiàn)ABP9-R；定，通過(guò) 1.2%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)(圖雙酶切檢測(cè)后，證明能夠切下 FABP3、

圖 2-4 三種重組質(zhì)粒 pET-15b-FABP 驗(yàn)證A：M：DNA Marker 1000 (a: 1000bp; b: 400bp)；1-2：pET-15b-FABP3 菌液 PCR 電泳圖；3-4pET-15b-FABP9 菌液 PCR 電泳圖；4-5：pET-15b-FABP10 菌液 PCR 電泳圖B：M：DNA Marker 5000 (a: 5000bp; b: 1000bp)；1：pET-15b-FABP3 雙酶切；2：pET-15b-FAB雙酶切；pET-15b-FABP10 雙酶切Figure 2-4 The certification of the three kinds of recombinant plasmid pET-15b-FABPA: M: DNA Marker 1000 (a: 1000bp; b: 400bp)；1-2: PCR agarose gel electrophoresis ofpET-15b-FABP3; 3-4: PCR agarose gel electrophoresis of pET-15b-FABP9; 5-6: PCR agarose geelectrophoresis of pET-15b-FABP10B: M：DNA Marker 5000 (a: 5000bp; b: 1000bp); 1: The restriction enzyme results ofpET-15b-FABP3; 2: The restriction enzyme results of pET-15b-FABP9; 3: The restriction enzymeresults of pET-15b-FABP102.2.4 三種重組蛋白的表達(dá)


本文編號(hào)：2943013