日本沼蝦（Macrobrachium niponense）,俗稱青蝦、河蝦,隸屬于甲殼綱,十足目,長臂蝦科,沼蝦屬,是目前我國淡水養(yǎng)殖業(yè)中的主要經(jīng)濟蝦類之一。近年來日本沼蝦出現(xiàn)了個體小型化,性早熟等種質(zhì)資源退化的現(xiàn)象,嚴重制約日本沼蝦的養(yǎng)殖效益。性腺抑制激素（Gonad inhibiting hormone,GIH）作為甲殼動物生殖內(nèi)分泌調(diào)控體系中的重要一員,與日本沼蝦的性腺發(fā)育密切相關。性腺抑制激素（GIH）是甲殼動物高血糖激素家族（CHH家族）中的一種神經(jīng)肽。除GIH外,該家族還包括高血糖激素（CHH）、蛻皮抑制激素（MIH）和大顎器抑制激素（MOIH）。日本沼蝦存在兩種類型性腺抑制激素（GIH-A和GIH-B）。本文利用基因工程的方法克隆了兩種性腺抑制激素基因,并利用原核表達載體和大腸桿菌感受態(tài)細胞Rosetta（DE3）成功表達出了GIH-A和GIH-B的蛋白。利用鎳柱與超濾管將蛋白濃縮復性后,獲得純度較高的兩種蛋白,并利用其制備多克隆抗體。抗體效價檢測結(jié)果表明,兩種抗體效價均為1:64;Western blot結(jié)果顯示,兩種抗體特異性良好。在此基礎上,利用免疫熒光法對兩種性腺... 

【文章來源】：河北大學河北省

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

眼柄視神經(jīng)節(jié)總RNA提取電泳結(jié)果

第 2 章 日本沼蝦性腺抑制激素的克隆及原核表達11圖2 日本沼蝦GIH-A和GIH-B成熟區(qū)區(qū)全長PCR克隆結(jié)果Fig 2 PCR production of GIH-A and GIH-B1：marker；2：GIH-A；3：GIH-B；圖 3 日本沼蝦 GIH-A 測序結(jié)果Fig 3 Nucleotide sequence of GIH-A

圖3日本沼蝦GIH-A測序結(jié)果

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Toxic Effects of Atrazine on Reproductive System of Male Rats[J]. SONG Yang,JIA Zhen Chao,CHEN Jin Yao,HU Jun Xiang,ZHANG Li Shi.  Biomedical and Environmental Sciences. 2014(04)
[2]食品中莠去津殘留檢測方法的研究進展[J]. 楊陽,劉霞,毛祿剛,劉優(yōu)錢.  食品安全質(zhì)量檢測學報. 2014(02)
[3]青蝦高血糖激素基因全長cDNA序列的克隆及表達分析[J]. 金舒博,王寧,喬慧,傅洪拓,吳滟,龔永生,蔣速飛,熊貽偉.  中國水產(chǎn)科學. 2013(01)
[4]青蝦種質(zhì)資源研究與保護進展[J]. 呂丁,傅洪拓,喬慧,吳滟,龔永生,蔣速飛,熊貽偉.  中國農(nóng)學通報. 2012(11)
[5]甲殼動物高血糖激素家族生理功能研究進展[J]. 楊濟芬,朱冬發(fā),沈建明,蘇青.  動物學雜志. 2009(01)
[6]反相高效液相色譜法分離中華絨螯蟹性腺抑制激素的初步研究[J]. 馬奎,康現(xiàn)江,穆淑梅,張亮,溫秀榮.  中國水產(chǎn)科學. 2007(02)
[7]鹽度對中華絨螯蟹性早熟生理機制的影響[J]. 魏薇,吳嘉敏,魏華.  中國水產(chǎn)科學. 2007(02)
[8]中華絨螯蟹蛻皮抑制激素基因的表達及抗體制備[J]. 姚燕,周開亞,宋大祥.  動物學報. 2006(01)
[9]武湖日本沼蝦食性的研究[J]. 劉軍,龔世園,何緒剛,張訓蒲.  淡水漁業(yè). 2005(01)
[10]蝦蟹類眼柄激素的生理生化及基因克隆研究進展[J]. 張愛萍.  水產(chǎn)學雜志. 2001(01)



本文編號：2937496